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消除非天然氨基酸诱变的一些“障碍”
IISER 博帕尔的研究人员在 2022 年发表的一项研究中证明，通过加强 UAG 终止密码子与其抑制 tRNA 之间的结合，可以显着提高终止密码子通读翻译的效率。使用这种方法将非天然氨基酸掺入蛋白质中可应用于多种应用，例如在细胞中蛋白质定位研究中对带有荧光氨基酸的蛋白质进行视觉跟踪，以及将光交联剂分子引入蛋白质中以识别蛋白质-蛋白质相互作用。
来源:IndiaBioscienceIISER 博帕尔的研究人员在 2022 年发表的一项研究中证明，通过加强 UAG 终止密码子与其抑制 tRNA 之间的结合，可以显着提高终止密码子通读翻译的效率。使用这种方法将非天然氨基酸掺入蛋白质中可应用于多种应用，例如在细胞中蛋白质定位研究中对带有荧光氨基酸的蛋白质进行视觉跟踪，以及将光交联剂分子引入蛋白质中以识别蛋白质-蛋白质相互作用。
印度博帕尔科学教育与研究学院 (IISER Bhopal) 有机化学和化学生物学副教授 Ishu Saraogi 和她在研究发表时的博士生 Purnima Mala（现为美国马萨诸塞州阿默斯特大学 (UMass) 的 RNA 生物化学博士后研究员）表明，在反密码子的 3’ 位引入了 2,6-二氨基嘌呤 (D)抑制性 tRNA (tRNACUD) 中的 (5'-CUD-3') 可识别 5'-UAG-3' 终止密码子，相对于涉及正常抑制性 tRNA (tRNACUA) 反密码子 5'-CUA-3' 的相互作用，显着增强了这种密码子 – 反密码子相互作用。
这种更强的相互作用使抑制 tRNA 能够有效地与释放因子 1 (RF1) 竞争 5'-UAG-3' 结合，从而防止翻译（蛋白质合成）过早终止。相反，RF1 取代 tRNACUA，引发核糖体（翻译机器）的后续分解。
产量
tRNA CUA
tRNA CUD
1 琥珀色
23%
47%
2 琥珀
0%*
20 – 25%
*由于终止密码子通读效率低下