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来自丛林毒蛇 (Lachesis muta) 的 Asp49 磷脂酶 A2 的晶体结构和功能表征
图片来源：Christopher Murray - en:Image:Lachesis muta muta.jpg，公共领域，https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=1120263来自丛林毒蛇 (Lachesis muta) 的 Asp49 磷脂酶 A2 的晶体结构和功能表征蛇毒磷脂酶 A2 (PLA2) 是一种结构保守的小型酶这对毒液的病理生理学有很大贡献。在这里，我们报告了从秘鲁亚马逊地区的一种响尾蛇 Lachesis muta 的毒液中分离出的 Asp49-PLA2 的纯化和晶体结构。使用离子交换和尺寸排阻色谱法纯化该酶，并在剂量和时间依赖性蛋黄降解测定中表现出磷脂酶活性。纯蛋白质晶体在 P6222 空间群中获得，衍射分辨率为 2.36 Å，不对称单元中有两个分子。该结构揭示了催化活性 II 族 PLA2 的典型折叠，其中一个单体的活性位点具有结合的 Ca2+ 离子和 MES 分子。七个二硫键稳定了结构，尽管通常与 β-发夹相关的一个桥不存在，并被盐桥取代，如其他蝰蛇 PLA2 中一样。 PISA 分析表明，潜在的四聚体组装由两个 AB 二聚体组成，在两个 A 亚基 (A–A') 之间产生界面。静电表面测绘揭示了 A-A' 界面处显着的带正电荷的通道，类似于来自 Crotalus durissus 的基本 PLA2 同二聚体
来源:Arácnido来自丛林毒蛇 (Lachesis muta) 的 Asp49 磷脂酶 A2 的晶体结构和功能表征
蛇毒磷脂酶 A 2 (PLA 2 s) 是一种结构保守的小酶，对毒液的病理生理学有显着贡献。在这里，我们报告了从秘鲁亚马逊地区的一种响尾蛇 Lachesis muta 的毒液中分离出来的 Asp49-PLA 2 的纯化和晶体结构。使用离子交换和尺寸排阻色谱法纯化该酶，并在剂量和时间依赖性蛋黄降解测定中表现出磷脂酶活性。纯蛋白质晶体在空间群 P 6 2 22 中获得，衍射分辨率为 2.36 Å，不对称单元中有两个分子。该结构揭示了催化活性组 II PLA 2 的典型折叠，其中一个单体的活性位点具有结合的 Ca 2+ 离子和 MES 分子。七个二硫键稳定了结构，尽管通常与 β-发夹相关的一个桥不存在，而是被盐桥取代，如其他蝰蛇 PLA 2 s 中一样。PISA 分析表明，潜在的四聚体组装由两个 AB 二聚体组成，在两个 A 亚基 (A–A') 之间产生界面。静电表面图显示 A-A' 界面处有一个显着的带正电荷的通道，类似于来自 Crotalus durissus terrificus 的基本 PLA 2 同二聚体，其中两个活性位点可接近膜。这项研究首次对来自 L. muta 的 Asp49-PLA 2 进行了结构和酶学分析，并深入了解了其寡聚组装、静电景观以及与其在毒液毒性中的作用相关的潜在适应性。