毒腺转录组学和生物活性分析表明 Mesobuthus crucittii(蝎目:Buthidae)毒液中存在双功能透明质酸酶活性

毒腺转录组学和生物活性分析表明,Mesobuthus crucittii(蝎目:Buthidae)的毒液中具有双功能透明质酸酶活性。摘要简介:蝎毒是生物活性分子的丰富来源,具有广阔的生物医学应用前景。透明质酸酶是毒液相关酶,通过降解细胞外基质糖胺聚糖促进毒素扩散,但其在蝎毒中的结构多样性和底物特异性仍未得到充分研究。本研究旨在鉴定和表征伊朗特有蝎子 Mesobuthus crucittii 毒腺中的一种新型透明质酸酶,并评估其生化和结构特性。方法:进行毒腺转录组分析。通过系统发育重建、基序预测、理化性质计算和结构建模对透明质酸酶序列进行计算机分析。进行分子对接以探索与透明质酸和硫酸软骨素底物的相互作用。使用比浊法对酶活性和热稳定性进行实验评估。结果:转录组分析揭示了以离子通道调节剂和酶组分为主的多种毒素库,包括编码推定透明质酸酶的新型前体,该前体表现出具有六个二硫键和三个保守诊断基序(GDWW、FPDC 和 GWGS)的独特半胱氨酸框架。结构建模建议的催化剂

来源:Arácnido

毒腺转录组学和生物活性分析表明 Mesobuthus crucittii(蝎目:Buthidae)毒液中存在双功能透明质酸酶活性

摘要

简介:

蝎毒是生物活性分子的丰富来源,具有广阔的生物医学应用前景。透明质酸酶是毒液相关酶,通过降解细胞外基质糖胺聚糖促进毒素扩散,但其在蝎毒中的结构多样性和底物特异性仍未得到充分研究。本研究旨在鉴定和表征来自伊朗特有蝎子 Mesobuthus crucittii 毒腺的新型透明质酸酶,并评估其生化和结构特性。

方法:

进行了毒腺转录组分析。通过系统发育重建、基序预测、理化性质计算和结构建模对透明质酸酶序列进行计算机分析。进行分子对接以探索与透明质酸和硫酸软骨素底物的相互作用。使用比浊测定法对酶活性和热稳定性进行实验评估。

结果:

转录组分析揭示了以离子通道调节剂和酶组分为主的多种毒素库,包括编码推定透明质酸酶的新型前体,该前体表现出具有六个二硫键的独特半胱氨酸框架和三个保守的诊断基序(GDWW、FPDC 和 GWGS)。结构模型表明催化和结合域与糖基水解酶家族 56 一致。分子对接支持对透明质酸四糖而不是更长或高度硫酸化的糖胺聚糖的优先结合亲和力。对粗毒液的功能测定证实了透明质酸的强烈降解和硫酸软骨素水解的减慢,表明双重底物活性。

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