摘要:蛋白质微阵列已成为药物和生物标志物开发以及诊断等各个领域的一种有吸引力的工具。因此,以微阵列形式进行多重结合亲和力测量变得至关重要。基于微阵列的蛋白质测定的制备依赖于探针溶液的精确分配,以有效固定在活性表面上。微阵列制造所需的设备成本过高,并且需要经过培训的人员来操作高复杂性的机器人点样器,这对研究人员来说是重大的不利因素,尤其是对于资源有限的小型实验室而言。在这里,我们提出了一种低成本、无需仪器的分配技术,通过该技术,熟悉微量移液的用户可以手动创建多重蛋白质测定,与机器人点样测定相比,该测定的捕获效率和噪音水平有所提高。在本研究中,我们使用干涉反射成像传感器平台,通过分析与抗 α -乳清蛋白抗体相互作用获得的结合动力学,比较了手动和机器人分配 α -乳清蛋白探针点的效率。我们表明,通过微量移液器手动点样制备的蛋白质阵列达到并超过了通过最先进的机器人点样器制备的蛋白质阵列的性能。与通过平均 75 个机器人点(对应于相同有效传感器表面积)获得的数据相比,这些无需仪器的蛋白质测定具有更高的结合信号(改善了约 4 倍)和结合曲线中的信噪比 (SNR) 提高了约 3 倍。我们展示了以 24 多路复用芯片格式确定抗原-抗体结合系数的潜力,测量误差小于 5%。
主要关键词