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事实证明，CRISPR-Cas 编辑系统是功能基因组学研究的有力工具，但它们在许多非模型物种中的有效性仍然有限。在马铃薯和番茄病原菌疫霉菌中，之前开发了一种编辑系统，该系统表达毛螺菌科细菌 Cas12a 内切酶 (LbCas12a) 和来自 DNA 载体的引导 RNA。然而，该方法效率低下。基于编辑受疫霉菌生长和内切酶催化的最佳温度不匹配限制的假设，我们测试了两种策略，将两个目标基因的编辑频率提高了约 10 倍。首先，我们发现 LbCas12a (D156R) 中的突变可以促进编辑，据报道，这种突变可以在更宽的温度范围内扩大其催化活性。其次，我们观察到，在较高温度下瞬时孵育转化组织可以增强编辑效果。这些修改应该使 CRISPR-Cas12a 更适用于研究 P. infestans 及其亲属中的基因和蛋白质功能，特别是在较低温度下生长最佳的物种。
卵菌门致病疫霉菌
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