机构名称：
¥ 3.0
星形胶质细胞在神经元网络开发中起关键作用。尽管星形胶质细胞在神经系统疾病的病理生理中的作用众所周知，但人类诱导的多能干细胞（HIPSC）衍生的星形胶质细胞在神经元网络中的利用仍然有限。在这里，我们提出了一种简化的一步方案，用于直接将HIPSC分化为功能星形胶质细胞，而无需异位基因表达或神经祖细胞的产生。我们发现直接在商业星形胶质细胞培养基中培养HIPSC足以在五周内将HIPSC区分为功能性星形胶质细胞。验证30个HIPSC线的变化量的验证表现出一致的星形胶质细胞分化，并且批处理变量最小。我们通过免疫荧光，流环仪，RNA测序，谷氨酸摄取测定法和钙信号记录来证实hipsc-胃细胞单栽培的星形胶质细胞身份和功能。优化协议启用了与NGN2 HIPSC衍生的神经元（无神经元）的hipsc-astrocytes共同培养，从而促进了神经元分化和突触形成。最后，我们使用了单细胞电生理学和多电极阵列来确认5周大的HIPSC-胃细胞和Ineuron共培养的稳健神经元网络的发展。该方案提供了一种快速有效的方法来建立全人类星形胶质细胞神经元共培养，从而促进了对疾病发病机理的细胞类型特异性贡献的研究。虽然在多个HIPSC系列中进行了验证，但我们积极鼓励研究人员测试并提供有关此协议的反馈，以增强其对未来迭代的验证。
导航人星形细胞分化
主要关键词
相关文件推荐
