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使用热激法进行细菌转化
通过清晰的步骤、原理、应用和实验室相关性，了解使用热休克方法的细菌转化。使用热休克方法进行细菌转化后的文章首先出现在《科学笔记》上。
来源:科学笔记细菌转化是分子生物学、生物技术和基因工程的基础技术。它允许研究人员将外源 DNA 引入细菌细胞，从而实现 DNA 克隆、基因表达和大规模蛋白质生产。在可用的不同转化技术中，热激法由于其简单、经济实惠且可靠，仍然是使用最广泛的方法之一，尤其是在处理大肠杆菌 (E. coli) 时。
本文提供了使用热休克技术进行细菌转化的详细、分步的教育概述。它解释了生物学原理、实验室程序、应用和下游用途，非常适合本科生、研究生和早期职业研究人员。
什么是细菌转化？
转化是细菌细胞从其环境中吸收细胞外 DNA 的过程。然后，该 DNA 可以在细胞内维持、复制或表达。
在自然界中，一些细菌物种具有天然能力，这意味着它们可以自发地吸收 DNA。然而，许多常用的实验室菌株（例如大肠杆菌）需要人工诱导能力。
能够吸收 DNA 的细胞称为感受态细胞。在分子生物学实验室中，通常使用化学或物理方法来诱导能力。
什么是热激转变？
热休克转化是一种人工诱导的方法，暂时增加细菌细胞膜的通透性，使质粒DNA进入细胞内。
核心原则
细菌细胞暴露在富含钙的环境中，通常是氯化钙 (CaCl2)。
钙离子中和质粒 DNA 和细菌细胞表面的负电荷。
短暂暴露于高温 (42°C) 会造成膜上的热和压力不平衡。
这种不平衡导致临时孔的形成，质粒 DNA 通过这些孔进入。