通过凝胶电泳提取 DNA 并确定未知 DNA 片段的长度

本实验旨在从颊细胞中提取 DNA,并使用凝胶电泳确定未知 DNA 片段的长度。DNA 是通过在凝胶电泳中摇晃佳得乐提取的...文章 DNA 提取和通过凝胶电泳确定未知 DNA 片段的长度首先出现在 The Science Notes 上。

来源:科学笔记

本实验旨在从颊细胞中提取 DNA,并使用凝胶电泳确定未知 DNA 片段的长度。将佳得乐在口中漱口,然后与洗涤剂、菠萝汁和异丙醇混合,使 DNA 沉淀,从而提取 DNA。提取的 DNA 在酒精和溶液的界面上可视化。对于凝胶电泳,将包括染料混合物、未知 DNA 和 DNA 标记的 DNA 样本装入琼脂糖凝胶中,并施加电场以按大小分离片段。DNA 标记迁移的距离可用于估计未知 DNA 片段的长度。结果表明,根据半对数标准曲线,未知 DNA 片段长约 2.7 千碱基 (kb)。本实验成功演示了 DNA 提取和电泳,为 DNA 分析的分子生物学技术提供了见解。

简介

凝胶电泳可按大小分离 DNA、RNA 或蛋白质(Hames 等人,1990 年)。每个 DNA 分子都是由两条互补核苷酸链组成的双螺旋结构,由碱基对鸟嘌呤 (G)-胞嘧啶 (C) 和腺嘌呤 (A)-胸腺嘧啶 (T) 之间的氢键结合在一起。DNA 由带负电荷的磷酸骨架组成,在电场作用下会向正极迁移(Alberts 等人,2002 年)。溴化乙锭和 SmartGlow Pre Stain(一种非致癌替代品)等染料在紫外光下发出荧光,使 DNA 可视化。分子穿过凝胶孔隙的速度与其长度成反比;较小的片段迁移得更快(Mika 等人,2024 年)。

本实验的目的是通过分析未知 DNA 片段与已知长度的标准 DNA 片段的电泳迁移情况来测量未知 DNA 片段的长度。

如果未知 DNA 片段的迁移情况与已知长度的标准 DNA 片段相似,则可以根据该比较估计其大小。

DNA