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双质粒诱导型 CRISPR-Cas9 系统在拜氏梭菌中的改造及应用
CRISPR 技术的最新发展为改进梭菌属专用的基因组编辑工具开辟了新的可能性。在本研究中，我们改进了基于该技术的双质粒工具，以便对产生丙酮/丁醇/乙醇 (ABE) 或异丙醇/丁醇/乙醇 (IBE) 混合溶剂的两种拜氏梭菌参考菌株的基因组进行无瘢痕修饰。在 NCIMB 8052 ABE 生产菌株中，SpoIIE 孢子形成因子编码基因的失活导致孢子形成缺陷的突变体，并且通过用功能性 spoIIE 基因补充突变菌株可以恢复此表型。此外，将真菌纤维素酶编码 celA 基因插入拜氏梭菌 NCIMB 8052 染色体中，产生具有内切葡聚糖酶活性的突变体。接下来，我们采用类似的双质粒方法对天然 IBE 产生菌株 C. beijerinckii DSM 6423 的基因组进行编辑，该菌株此前从未进行过基因工程改造。首先，删除赋予甲砜霉素抗性的 catB 基因，使该菌株与我们的双质粒编辑系统兼容。作为概念验证，我们在 C. beijerinckii DSM 6423 Δ catB 中使用了我们的双质粒系统，以去除内源性 pNF2 质粒，从而大幅提高转化效率。
ARALDITE® 2028-1 结构胶
产品 重量份数 体积份数 组分 A（树脂） 100 100 组分 B（硬化剂） 100 100 应将树脂和硬化剂混合直至形成均匀的混合物。ARALDITE ® 2028-1 以带有混合器的筒装形式提供，可借助 Huntsman Advanced Materials 推荐的工具作为即用型胶粘剂进行涂抹 胶粘剂的应用 可以手动或自动将树脂/硬化剂混合物涂抹在预处理和干燥的接头表面。Huntsman 的技术支持团队可协助用户选择合适的应用方法，并推荐各种制造和维修胶粘剂分配设备的知名公司。厚度为 0.05 至 0.10 毫米的胶粘剂层通常可使接头具有最大的搭接剪切强度。Huntsman 强调，正确的胶粘剂接头设计对于持久粘合也至关重要。涂抹胶粘剂后，应立即组装接头组件并固定在固定位置。有关表面准备和预处理、粘合剂接头设计和双注射器分配系统的更多详细说明，请访问 www.araldite2000plus.com。设备维护应在粘合剂残留物固化之前清洁所有工具。清除固化残留物是一项困难且耗时的操作。如果使用丙酮等溶剂进行清洁，操作人员应采取适当的预防措施，此外，还应避免皮肤和眼睛接触。
ARALDITE® 2028-1 结构胶
产品 重量份数 体积份数 组分 A（树脂） 100 100 组分 B（硬化剂） 100 100 应将树脂和硬化剂混合直至形成均匀的混合物。ARALDITE ® 2028-1 以带有混合器的筒装形式提供，可借助 Huntsman Advanced Materials 推荐的工具作为即用型胶粘剂进行涂抹 胶粘剂的应用 可以手动或自动将树脂/硬化剂混合物涂抹在预处理和干燥的接头表面。Huntsman 的技术支持团队可协助用户选择合适的应用方法，并推荐各种制造和维修胶粘剂分配设备的知名公司。厚度为 0.05 至 0.10 毫米的胶粘剂层通常可使接头具有最大的搭接剪切强度。Huntsman 强调，正确的胶粘剂接头设计对于持久粘合也至关重要。涂抹胶粘剂后，应立即组装接头组件并固定在固定位置。有关表面准备和预处理、粘合剂接头设计和双注射器分配系统的更多详细说明，请访问 www.araldite2000plus.com。设备维护应在粘合剂残留物固化之前清洁所有工具。清除固化残留物是一项困难且耗时的操作。如果使用丙酮等溶剂进行清洁，操作人员应采取适当的预防措施，此外，还应避免皮肤和眼睛接触。
三氧磷酸异构酶作为量子逻辑门
这项研究提出了以下假设：糖酵解中三氧磷酸异构酶（TIM）是一种量子逻辑门。利用量子力学，我们将蒂姆的二羟基丙酮（DHAP）催化转化为3-磷酸甘油醛（G3P）作为量子操作，参与精确的质子转移。为了探索这种量子行为的更广泛的含义，我们开发了一种量子模型，以评估钠 - 葡萄糖共转运蛋白2抑制剂（SGLT2I）对甲基聚糖形成的影响，这是一种与先进的糖化终极产物相关的有毒副产物（AGES）。我们的模型预测，SGLT2I可以通过降低中间形成的可能性来减少甲基甘氨酸，从而为在临床环境中观察到的保护作用提供了一种机制，包括糖尿病，肾病和心力衰竭的血管和肾脏性。通过将蒂姆重新构图为量子逻辑门，本研究不仅挑战了酶促功能的传统观点，而且为量子生物学开辟了新的途径，对代谢性疾病研究和药物开发的未来产生了深远的影响。此外，考虑到由于量子隧道效率低下而导致的甲基乙二醇，可以假设一种新的“ Noxa patogena”，将其作用解释为量子干扰。
转铁蛋白受体 1 靶向
(◀图 4) B. 与 pHrodo 染料结合的双环和转铁蛋白与细胞一起孵育 18 小时，并在 Incucyte 上进行分析。C. 和 D. 将 HT1080 细胞接种过夜。将细胞在无血清培养基中孵育 60 分钟，温度为 37 °C。对于 D. 细胞在 37 °C 下用载体 (0.1% DMSO) 或 Dyngo 4a (30 µM) 预处理 30 分钟。然后将细胞与结合的双环 (1.0 µM；红色) 在 4 °C 下孵育 1 小时。然后将细胞转移到 37 °C 下 1.5 分钟以进行内吞。洗涤后，在 -20 °C 下用 80% 丙酮固定和透化细胞 10 分钟。然后将细胞在 10% 山羊血清中封闭 1 小时，并用一抗 (指示) 标记。然后用二抗（绿色）和 Hoechst（蓝色）清洗细胞并标记。三重培养孔的代表性图像。放大 40 倍。（▲ 图 5）A. 和 B. 新鲜分离的人类近端曲小管细胞接种在 transwell 插入物中，Bicycles 测试浓度为 10μM。通过质谱法测量极化细胞的跨上皮吸收和分泌通量。结果标准化为基线 FITC 标记的转铁蛋白摄取（AB 和 BA）。测量单层完整性（80-120 Ω.cm 2 跨上皮电阻）作为质量控制。
ARALDITE® 2019 结构胶
树脂和硬化剂应充分混合，直至形成均匀的混合物。ARALDITE ® 2019 以带有混合器的筒装形式提供，可借助 Huntsman Advanced Materials 推荐的工具作为即用型粘合剂涂抹。粘合剂的应用用抹刀将树脂/硬化剂混合物涂抹在预处理过的干燥接头表面。0.05 至 0.10 毫米厚的粘合剂层通常可使接头获得最大的搭接剪切强度。如果可能，应在两种基材上都涂抹粘合剂，并且在涂抹粘合剂后立即组装和夹紧接头组件。对于粘合线厚度低于 0.5 毫米的粘合剂，必须在涂抹粘合剂后 60 分钟内组装组件，对于粘合线厚度较大的粘合剂，必须在涂抹粘合剂后 30 分钟内组装组件。整个接头区域的均匀接触压力将确保最佳固化。机械加工专业公司已经开发出计量、混合和摊铺设备，可实现粘合剂的批量加工。我们很乐意为客户提供建议，帮助他们选择适合其特定需求的设备。设备维护所有工具都应在粘合剂残留物固化之前进行清洁。清除固化残留物是一项困难且耗时的操作。如果使用丙酮等溶剂进行清洁，操作人员应采取适当的预防措施，此外，还应避免皮肤和眼睛接触。
araldite®2031-1结构粘合剂
按重量零件按体积组件A（树脂）100 100组件B（硬化器）120 100乘积零件零件，将树脂和硬化剂混合在一起，直到它们形成均匀的混合物为止。araldite®2031-1也可以在混合搅拌机的墨盒中获得，可以用作粘合剂，借助亨斯曼高级材料粘合剂推荐的工具使用粘合剂，将树脂/硬质混合物与刮刀一起涂在预处理和干燥的关节表面上。一层粘合剂0.05至0.10 mm厚通常会赋予关节最大的剪切强度。粘合剂包含间隔物，以确保最小键线厚度为0.05 mm。使用粘合剂后应立即组装并夹紧关节组件。整个关节区域的均匀接触压力将确保最佳治疗。有关表面准备和预处理，粘合关节设计以及双注射器分配系统的更详细说明，请访问www.aralditeadhesives.com。机械加工专家公司已经开发了计量，混合和传播设备，以实现胶粘剂的大量处理。我们将很高兴为客户选择设备的特定需求提供建议。设备维护所有工具应在粘合剂残留物有时间治愈之前清洁所有工具。去除固化残基是一个困难且耗时的操作。如果使用丙酮等溶剂进行清洁，则操作剂应采取适当的预防措施，此外，还应避免皮肤和眼神交流。治愈时间达到最小剪切强度
溶剂诱导蛋白质沉淀用于蛋白质组学规模的药物靶标发现
摘要：高通量药物发现高度依赖于可用的靶标，以加速候选药物的筛选过程。传统的化学蛋白质组学方法用于筛选药物靶标，通常需要固定/修饰药物分子以拉下相互作用的蛋白质。最近，基于能量学的蛋白质组学方法提供了一种研究药物 - 蛋白质相互作用的替代方法，即直接使用复杂的细胞裂解物，而无需对药物进行任何修饰。在本研究中，我们开发了一种新的基于能量学的蛋白质组学策略，即溶剂诱导蛋白质沉淀 (SIP) 方法，通过使用定量蛋白质组学来分析药物与其靶蛋白的相互作用。该方法适用于任何使用丙酮、乙醇和乙酸等常见化学试剂的实验室。SIP 方法能够识别细胞裂解物中众所周知的甲氨蝶呤、SNS-032 和星形孢菌素的泛激酶抑制剂的蛋白质靶标。我们进一步应用此方法发现格尔德霉素的靶标。成功鉴定了 HSP90 家族的三个已知蛋白质靶标，并首次鉴定了包括 NADH 脱氢酶亚基 NDUFV1 和 NDUFAB1 在内的几个潜在靶标，并使用蛋白质印迹法验证了 NDUFV1。此外，此方法能够评估药物 - 靶标相互作用的亲和力。这些数据共同证明我们的方法为药物靶标发现提供了一个强大的平台。
Araldite®2051A/B结构粘合剂
高级材料美国技术数据预处理粘合关节的强度和耐用性取决于对要键合的表面的适当处理。至少应用良好的脱脂剂（例如丙酮，ISO-丙醇（用于塑料）或其他专有脱脂剂）清洁关节表面，以消除所有油脂，油脂，油脂和污垢。低度酒精，汽油或油漆稀释剂绝不能使用。通过机械磨损或化学蚀刻（“腌制”）脱脂表面获得最强和最耐用的接头。磨损后应进行第二次脱脂处理。araldite®2051A/B结构粘合剂在掺入搅拌机的墨盒中可用，可以作为借助Huntsman Advanced材料推荐的工具作为准备使用的粘合剂。粘合剂的应用此系统可在包含搅拌机的墨盒中获得，并且可以作为借助Huntsman Advanced材料推荐的工具，可以作为准备使用粘合剂。树脂/硬质混合物可以手动或机器人施加到预处理和干燥的关节表面上。Huntsman的技术支持小组可以协助用户选择合适的应用方法，并建议各种生产和服务粘合剂分配设备的知名公司。一层粘合剂0.25 mm厚通常会赋予关节最大的剪切强度。应用粘合剂后应立即组装并固定在固定位置。有关表面准备和预处理，粘合关节设计和双盒分配系统的更详细说明，请访问www.aralditeadhesives.com。
Baird Parker 琼脂培养基 USP 预期用途
Baird Parker 琼脂培养基 USP 预期用途 Baird Parker 琼脂培养基添加了补充剂，用于按照 USP 从临床和非临床标本中选择性分离和计数凝固酶阳性葡萄球菌。 摘要 Braid Parker 琼脂由 Braid-Parker 开发，改良自 Zebovit 等人的亚碲酸盐-甘氨酸配方，用于回收凝固酶阳性葡萄球菌。有人建议用这种培养基替代 Vogel 和 Johnson 琼脂 (VJ)，因为它比 VJ 琼脂抑制性弱，但选择性更强，还具有 VJ 琼脂所不具备的诊断辅助剂（蛋黄反应）。随后，它被 AOAC 正式接受，也被 USP 和 IP 推荐用于微生物限度测试。APHA 推荐使用 Braid Parker 琼脂来检验牛奶和食品，它还被列入用于检测化妆品的细菌分析手册中。原理 酪蛋白、牛肉膏和酵母提取物的胰酶消化物提供含氮化合物、碳、硫和其他生长因子。丙酮酸钠保护受损细胞，帮助恢复，并在不破坏选择性的情况下刺激金黄色葡萄球菌的生长。甘氨酸促进葡萄球菌的生长。氯化锂抑制金黄色葡萄球菌以外的大多数微生物群。亚碲酸盐添加剂可抑制金黄色葡萄球菌以外的蛋黄透明菌株，并使菌落呈黑色。蛋黄除了作为富集剂外，还通过显示卵磷脂酶活性（蛋黄反应）来帮助识别过程。蛋黄使培养基变黄、不透明。蛋白水解细菌在含有蛋黄的培养基中在菌落周围产生一个透明区。该培养基上灰黑色菌落周围的透明区可用于诊断凝固酶阳性葡萄球菌。进一步培养后，菌落周围可能会形成不透明的脂解活性区。必须通过凝固酶反应来确认在 Baird Parker 琼脂上分离的金黄色葡萄球菌的身份。可以通过添加血浆纤维蛋白原混合物代替蛋黄乳液来检测凝固酶活性。在此培养基中，在 35ºC 下培养 24-40 小时内，葡萄球菌凝固酶阳性菌落呈白色至灰黑色，周围有不透明的凝固酶活性区。由于没有蛋黄乳液，因此需要减少亚碲酸盐，从而产生半透明的琼脂和白色至灰色的葡萄球菌菌落。配方* 成分 g/L 胰酪蛋白消化物 10.0 酵母提取物 1.0 牛肉提取物 5.0 丙酮酸钠 10.0 甘氨酸 12.0 氯化锂 5.0 琼脂 20.0 最终 pH 值（25°C 时） 6.8 ± 0.2 *根据性能参数进行调整 储存和稳定性 将脱水培养基储存在 30°C 以下的密闭容器中，将制备好的培养基储存在 2ºC-8°C 的环境中。避免冷冻和过热。请在标签上的有效期前使用。开封后，请保持粉状培养基密闭，以免受潮。样本类型临床样本 – 血液食品和乳制品样本药品样本