使用真空采血方案,从每位研究参与者身上无菌采集 9ml 血液样本,放入乙二胺四乙酸 (EDTA) 抗凝管中进行处理。静脉样本采集是从参与者静脉获取血液样本进行实验室检测的程序。该过程涉及几个步骤,以确保准确性、安全性和参与者舒适度。首先,在详细解释研究和程序后,获得参与者的知情同意。选择合适的静脉进行采血,通常是肘前窝。使用 70% 酒精消毒剂清洁采集部位。为了使静脉更明显,在上臂使用止血带,限制血流。要求参与者握紧拳头,帮助静脉突出并促进血液流入管内。将真空采血针插入静脉。然后将真空采血管推到针头组件的背面。3ml 血液被真空吸入管内。装满后,取出试管并倒置四次,使血液与 EDTA 抗凝剂混合。以这种方式填充了三个试管,以获得 9 毫升血液。取样后,松开止血带,并从静脉中取出针头。用棉球对穿刺部位施加压力以防止出血,然后使用绷带保持该区域清洁并降低感染风险。
图 1 | 使用 DNA 支架形成 Cy3 聚集体的化学方法。 (a) Cy3 (左) 共价连接到单链 DNA (ss-DNA) 脱氧核糖磷酸骨架的 3' 和 5' 端。 Cy3 修饰的 DNA 纳米结构是通过将 Cy3 修饰的 ssDNA 与规范互补的 ssDNA 链杂交而形成的,如连接到 DNA 双链体的 Cy3 单体的分子动力学快照 (中间) 和示意图 (右、上) 中蓝色椭圆表示 Cy3 所示。 Cy3 二聚体和三聚体是通过将连续的 Cy3 发色团连接到 ssDNA 并与互补链杂交而形成的 (右、中和下) (b) Cy3 单体 (棕色)、二聚体 (蓝色) 和三聚体 (绿色) 的吸光度 (实线) 和量子产率归一化的荧光光谱 (虚线)。 [DNA 双链] = 0.5 µ M,溶于 40 mM Tris、20 mM 醋酸盐、2 mM 乙二胺四羧酸 (EDTA) 和 12 mM MgCl 2 (TAE-MgCl 2 缓冲液)。(c) 双链中 Cy3 单体、二聚体和三聚体的荧光量子产量 (ΦF)。[DNA 双链] = 0.5 µ M,溶于 1 × TAE-MgCl 2 缓冲液。(d) Cy3 单体、二聚体和三聚体的圆二色性 (CD) 光谱。(e) Cy3 单体、二聚体和三聚体的荧光衰减轨迹,仪器响应函数以黑色显示。
目的:研究基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂在体内对自酸蚀粘合剂中树脂复合材料与牙本质微拉伸粘结强度的影响。对象和方法:研究纳入九只成年杂种犬。在狗口的上下颌(犬齿 - 第一和第二磨牙)共制备90个标准化I类腔。根据使用的MMP抑制剂类型将牙齿分为三组(n = 30):对照组(不使用MMPs抑制剂),CHX组(2%葡萄糖酸氯己定,Kempetro,ARE)和EDTA组(乙二胺四乙酸,META BIOMED,CO.LTD,韩国)。每组根据测试期6个月和12个月又分为两个亚组(n=15)。在每个测试期结束时,处死动物,然后将牙齿与颌骨分离。将每颗牙齿安装到切割机上,在水冷条件下切成一系列1mm厚的板。使用万能试验机测量每个样品的微拉伸粘结强度。将数据制成表格并进行统计分析。结果:微拉伸粘结强度结果显示,6个月后,CHX的数值明显高于EDTA,而12个月后,CHX的数值明显低于EDTA和对照组。结论:使用EDTA可提高12个月老化后的微拉伸粘结强度,而CHX和对照组的粘结强度随年龄增长而降低。
广谱过滤对于保护有毒化学物质至关重要。此应用需要具有高孔隙率的材料,以用于物理吸附和化学反应的金属位点。尽管这些挑战已经得到很好的满足,但由于暴露于湿度或污染物而导致的老化限制了现场寿命。这项工作的目的是开发改进的过滤介质,以最大化集体保护过滤器的使用寿命。一种新的过程用于将金属氧化物共同于混合量的碳和Zr(OH)4粉末上。粘合剂用于制作串珠颗粒,然后装有三乙二胺(TEDA)。物理特性(例如孔隙率,密度和硬度)类似于传统的颗粒过滤介质(GFM)。然后,将串珠颗粒进行涉及湿度或战场污染物(燃料蒸气,X /no X)的加速衰老。衰老后,测试了材料的过滤性能,针对二甲基膦酸二甲基(DMMP),氰化氢(AC)和氯化氰化物(CK)。Zn-FE-SI(ZFS)沉淀金属氧化物材料,碳含量为70:30:ZR(OH)4被证明是最佳的。该媒体的生产高级制造业制造,以生产200磅的批次。使用这种介质,测试了不同程度的加速衰老以发展衰老谱。该媒体还放入了适合M98全体会议的防护床风格的过滤器中,并部署了以实现现实的现场衰老。
酸性Mn的基于MN的天主分解室会导致MNO 2固体的积累,钝化阴极并形成“ Dead Mn”(图1(b)-2)由于产物被电解质流冲洗,从而降低了排放电压,容量和循环稳定性,并限制了Zn-MN FBS的能量密度。已经进行了许多效果,以改善锰转化反应的可逆性,以提高稳定性,同时使能力或电压构成。通过利用与Mn 2+的阴离子的配位作用,例如,乙酸,乙二胺乙酸乙酸(EDTA),可以通过抑制Mn 3+中间体的分离并避免“死亡MN”的前提来修改可逆性。10,17,18乙酸酯的电解质已显示出流量电池的循环稳定性显着提高。9,11尽管如此,轻度电解质中的质子活性降低,配位结构的改变会降低放电电压(O 1.6 V与Zn/Zn 2+)。此外,乙酸电解质中锌阳极的兼容性受损会导致稳定性有限,尤其是在高面积下。19,20一种替代的天然方法涉及采用脱钩的电解质,使用酸性和碱性的电解质分别作为天主分析器和厌氧分子来实现。21–23电压大大增加,这是由于基于碱性的电体中Zn反应的负潜力更大(1.199 V与SHE)。5,24,25,但是,脱钩的系统需要合并阳离子 - 交换膜(CEM),
推荐采用市售商品化的DNA提取纯化试剂盒。如使用CTAB法提取DNA所需试剂如下: a) 乙二胺四乙酸二钠(Na 2 EDTA,C 10 H 14 N 2 O 8 Na 2 ·2H 2 O)。 b) 氢氧化钠(NaOH)。 c) EDTA 溶液:ρ(EDTA)=0.02 mol/L:称取5.8448 g EDTA 溶于适量超纯水中,NaOH 固体调节pH 至8.0,定容至1000 mL,121℃灭菌18 min,冷却后常温保存。 d) 三羟甲基氨基甲烷(Tris,C 4 H 11 NO 3 )。 e) 浓盐酸:ρ(HCl)=1.19 g/mL。 f) Tris-HCl 溶液:ρ(Tris-HCl)=0.1 mol/L:称取15.76 g Tris-HCl 溶于适量超纯水中,浓盐酸调pH 至8.0,定容至1000 mL,121℃灭菌18 min,冷却后常温保存。 g) 十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。 h) 氯化钠(NaCl)。 i) CTAB 提取液:称取4 g CTAB 和16.38 g NaCl,分别溶于适量超纯水中,加入0.02 mol/L EDTA 溶 液(5.3 c)8 mL 和0.1 mol/L Tris-HCl 溶液(5.3 f)20 mL,定容至200 mL,121℃灭菌18 min, 冷却后常温保存。 j) Tris 饱和酚(pH=8.0)。 k) 三氯甲烷(CHC l3 )。 l) 异戊醇(C 5 H1 2O )。 m) 酚氯仿:Tris 饱和酚、氯仿和异戊醇按25:24:1 体积比配制。 n) 乙酸铵(CH 3 COONH 4 )。 o) 乙酸铵溶液,ρ(CH3COONH4)=7.5 mol/L:称取5.78 g 乙酸铵溶于10 mL 超纯水中。 p) 乙酸钠(CH 3 COONa·3H 2 O)。 q) 乙酸钠溶液,ρ(CH 3 COONa)=3 mol/L:称取102.06 g 乙酸钠溶于适量超纯水中,冰醋酸调节pH 至5.2,定容至250 mL,121 ℃灭菌18 min; r) 无水乙醇(C 2 H 6 O)。 s) 冰乙酸(C 2 H 4 O 2 )。 t) 蛋白酶K:400 U/mL。 u) 超纯水:经121 ℃,0.1 MPa 灭菌30 min,无细菌无DNA 酶。
随着靶向放射性核素疗法在癌症治疗中的成功开发和广泛应用,骨髓受到辐射损伤的风险也随之增加——直接抑制和随机效应,导致肿瘤形成。在此,我们报告了一种新型放射保护药物,即 γ -生育三烯酚 (GT3) 的脂质体制剂,简称 GT3-Nano,用于减轻靶向放射性核素治疗期间的骨髓辐射损伤。方法:使用被动负载将 GT3 装入脂质体。合成 64 Cu-GT3-Nano 和 3 H-GT3-Nano,以分别研究脂质体和 GT3 的体内生物分布情况。在急性 137 Cs 全身照射(亚致死剂量(4 Gy)、致死剂量(9 Gy)或单次高剂量 153 Sm-乙二胺-N,N,N ′,N ′-四(亚甲基膦酸) (EDTMP))后评估 GT3-Nano 的放射防护效果。分别使用流式细胞术和荧光显微镜分析造血细胞群动态和 GT3-Nano 在脾脏和骨髓中的定位细胞位置。结果:24 小时时骨髓摄取和保留(每克组织注射剂量百分比)为 64 Cu-GT3-Nano 6.98 ± 2.34,3 H-GT3-Nano 7.44 ± 2.52。在 4 Gy 全身照射 (TBI) 前或后 24 小时施用 GT3-Nano 可促进快速和完全的造血恢复,而对照组的恢复率停滞在 60%。GT3-Nano 表现出剂量依赖性放射保护作用,在 50 mg/kg 剂量下,可达到 90% 的致死性 9-Gy TBI 存活率。骨髓流式细胞术表明,在 GT3-Nano 治疗的小鼠中,祖细胞骨髓 MPP2 和 CMP 上调。免疫组织化学显示 GT3-Nano 在 CD105 阳性窦状上皮细胞中聚集。结论:GT3-Nano 在减轻小鼠亚致死和致死性 TBI 的骨髓抑制作用方面非常有效。 GT3-Nano 可促进接受放射治疗剂 153 Sm-EDTMP 治疗的小鼠造血成分的快速恢复。
糖尿病是一种慢性代谢综合征,主要以持续性高血糖为特征。大多数2型DM患者患有微血管并发症。早期诊断这些并发症可以帮助成功治疗疾病。血小板指数(MPV,PDW,P-LCR)和血糖控制参数(FBS,RBS和HBA1C)之间的正相关表明糖尿病并发症的早期发现。这些生物标志物的诊断使用将提供可靠,准确且具有成本效益的信息,以预测未来的血小板事件,尤其是在像孟加拉国这样的社会经济地位差的国家中。这项研究旨在与HBA1C一起评估MPV,PDW和P-LCR,以确定它们作为糖尿病并发症的潜在标志。对75例2型糖尿病患者和75例正常血糖水平对照进行了血小板指数(MPV,PDW和P-LCR)的前瞻性横断面研究。在EDTA(乙二胺四乙酸)中收集血液,并在SYSMEX XN-1000自动血液学分析仪中进行分析,用于血小板指数[MPV,血小板分布宽度(PDW)和血小板 - Large细胞比率]。统计评估是通过使用学生的未配对t检验进行均值和比较进行的。2型糖尿病患者的年龄为41至70岁。糖尿病的平均持续时间为3.6±1.7岁。与对照组相比,病例的MPV,PDW和P-LCR明显更高(11.3±1.0 vs. 9.1±0.6,14.2±2.5 vs. 10.7±0.7 fl,32.0±8.1 vs. 21.0±2.4%)。这具有统计学意义。MPV,PDW和P-LCR的较高值表明它们是评估糖尿病患者初始血管并发症的更好风险指标。关键字:平均血小板体积;血小板分布;宽度血小板大;细胞比;糖尿病
下一代测序需要高质量的核酸,但是分离的DNA和RNA通常具有挑战性,尤其是在植物组织中。尽管开发了各种试剂盒和试剂,但这些产物是根据模型植物的分离而定制的。在这里,我们引入了一种通用裂解缓冲液,以将核酸与包括顽固植物在内的各种植物种类分开,以促进分子分析,例如定量PCR(QPCR),转录组学和全基因组测序(WGS)。该方案是对原始CTAB方法的修改,该方法导致从许多植物物种(包括单子叶植物和eudicot)中分离出核酸。裂解缓冲液由六烷基三甲基溴二铵(CTAB),氯化钠(NaCl),Tris碱,乙二胺甲乙酸抗乙酸(EDTA)和β-苯二甲醇(βME)组成。修饰的CTAB方法可以及时从少量植物组织(例如15-100 mg)中分离出核酸,这非常适合大量样品,并且当适当的样品收集是一个限制因素时。方案不仅分离出来自各种植物物种的DNA,还分离出RNA。这使得与先前描述的用于DNA分离的CTAB方法相比,它对分子分析非常有效。成分的适当浓度可以同时从植物组织中分离出高质量的DNA和RNA。此外,此协议与市售列兼容。使DNA和RNA有资格用于下一代测序平台,该方案补充了柱,以纯化同一组织中的DNA或RNA,以满足高标准以进行测序分析。该方案提供了一种理想的方法,可以克服从各种植物物种中分离出高质量DNA或RNA的潜在障碍,以进行下流的分子分析。
摘要:研究pH敏感瓜尔胶接枝聚合物包覆5氟尿嘧啶的设计、细胞毒性及肿瘤靶向药物递送。以瓜尔胶、2-羟乙基甲基丙烯酸酯和核黄素靶向剂为原料,以N,N-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,四甲基乙二胺(TEMED)引发剂和过硫酸铵为催化剂,成功制备了载GG接枝p(HEMA)共轭核黄素薄膜(GG-gP(HEMA)-RF),该薄膜可负载5氟尿嘧啶并用于肿瘤靶向治疗。采用FT-IR和XRD光谱技术分析了GG-gP(HEMA)-RF的结构特征。SEM结果表明,该载体呈均匀的棒状,孔隙率低,对5氟尿嘧啶的包覆和缓释性能优异。靶向药物输送策略因其疗效更有效、副作用更少等优势而受到科学界的特别关注。用台盼蓝拒染试验研究了不同浓度(0、25、50、100 和 150 μg/mL)下 5FU 负载的 GG-gP(HEMA)-RF 对艾氏腹水癌 (EAC) 细胞的体外细胞毒性作用。MTT 细胞毒性试验研究了针对 EAC 实验模型的细胞活力,并表明载体具有良好的生物相容性。结果揭示了艾氏腹水癌细胞系中的抗增殖作用以及凋亡的分子信号传导和产生的活性氧 (ROS)。EAC 细胞中凋亡的形态变化明显,染色后用光学显微镜观察到。采用DPPH自由基清除实验测定了5FU负载和未负载的GG-gP(HEMA)-RF的自由基清除活性,并用电子显微镜和荧光光谱法研究了5FU负载的GG-gP(HEMA)-RF与DNA的相互作用。