摘要:群集定期间隔短的短膜重复序列(CRISPR)/CAS(CRISPR相关蛋白质)9工具已经彻底改变了生物学 - 已经构建了几个高效的高效工具,这些工具已导致能够快速设计模型细菌,例如,Escherichia coli。但是,CRISPR/CAS9工具的使用已落后于非模型细菌,阻碍了工程工作。在这里,我们开发了改进的CRISPR/CAS9工具,以实现与工业相关细菌丙梭菌的有效快速代谢工程。以前的努力在C. actobutylicum中实施CRISPR/CAS9系统已受到缺乏严格控制的诱导系统以及大质粒的影响,从而阻碍了较低的转化效率。我们从艰难梭菌的木糖诱导系统控制下成功地将Cas9基因从链球菌诱导的系统控制到了基因组,然后我们表明,这导致了一个紧密控制的系统。然后,我们优化了编辑盒的长度,从而产生了一个小的编辑质粒,该质粒还包含UPP基因,以便使用UPP /5-氟尿嘧啶的反式系统快速失去质粒。我们使用该系统执行LDHA和PTB-BUK操纵子的单独和顺序缺失。
div de Novo射击器官发生是植物研究和繁殖中众多应用的先决条件,但通常是基因组编辑方法中的限制因素。III类同源核心蛋白拉链(HD-ZIP III)转录因子已被视为芽规范的关键调节剂,但是在芽再生过程中控制其活性的上流集成部分仅部分鉴定。在化学遗传筛选中,我们分离了ZIC2,这是HD-ZIP III活性的新型激活剂。使用拟南芥和阳光(Helianthus annuus)中的分子,生理和激素转运分析,我们检查了该药物促进HD-ZIP III表达的分子机制。ZIC2依赖性上调促进了拟南芥中的芽再生,并伴随着芽的指定因子WUS和RAP2.6L的诱导以及细胞分裂素生物合成酶的子集。ZIC2对HD-ZIP III的影响和再生是基于限制极性生长素转运的能力。我们进一步提供了证据,表明生长素的化学调节可以在再生顽固物种阳光下增强从头芽的形成。在芽再生过程中,HD-ZIP III转录的激活取决于生长素的局部分布和生长素转运的化学调节,可用于克服组织培养中较差的芽器官发生。
传感器与微系统 第 44 卷 殊形状的刀片完成剪切,采摘成功率达 97 . 36 % 。进一步 设计了一种提拉断梗的机械手,舵机带动主动手指和从动 手指转动,将茶梗折弯并拉断,采摘成功率为 74 . 3 % 。华 中农业大学 [ 6 ] 设计了一种结构为曲柄滑块剪切机构的末 端执行器,通过刀片闭合将鲜叶掐断,利用真空装置将剪切 后的茶叶吸入容纳箱。四川农业大学 [ 7 ] 设计了一种可夹 提式采摘茶叶嫩梢的末端执行器,通过预设夹持力使夹持 件夹断嫩梢叶柄,对一芽一叶和一芽两叶都达到较高的采 摘率。纵观现有大宗茶采摘末端执行器的结构和特点,多 以刀片切割的方式作为采摘原理,无法保证芽叶的完整,这 将在很大程度上降低茶叶的品质,不能用于高档名优绿茶 采摘。南京林业大学 [ 8~12 ] 基于机器视觉、颜色特征、并联 机器人等技术,研发了对新梢有选择性采摘的机器人,研制 了一种气动采摘指,设置固定阈值,确定采摘指夹持嫩芽时 的闭合间隙,通过提拉动作完成采摘,成功率达到 90 % 。 由于自然生长的新梢枝条粗细不一,夹持时的夹持力波动 较大,会存在打滑或夹断现象。 针对现有采茶末端执行器导致嫩芽完整性的不足,本 文设计了一种柔性可感知的仿生采摘指作为采茶机器人的 末端执行器,模仿人工“提手采”的动作,通过固定和提拉 动作实现嫩芽采摘,并增加夹持力测量电路,在夹持过程中 检测夹持力,提高采摘成功率。
BAP和IAA在芽的再生和以1%水平的射击的增殖中起着重要作用(Yadav,Sreenu,Maheswari,Vanaja和Venkateswarlu,2010年)。在其他不同浓度的BAP和IAA中,7.5 mg/l BAP和0.5 mg/l IAA显示最大的芽再生和增殖,为0.75 2.75 2.75 2.75和6.25次,在15 dai 30 dai和45 dai和45 dai时,每个epplant和6.25个芽(Wilken等人,2014年)。在15、30和45 dai时产生的最大芽数。当MS培养基补充7.5 mg/l BAP和1.0 mg/l IAA时,也获得了相同的结果,该培养基分别显示了芽的最大再生数量,分别是O.75、2.75和5.75,分别为15、30和45 dai(Kavino&Manoranjitham,2018年)。
•假设A想要向B发送消息,该消息称为明文。•现在,为了避免阅读明文,使用算法和秘密键(在1)加密明文。•此加密的宣传文字称为Ciphertext。使用相同的秘密密钥和加密算法反向运行(在2),•b可以获取a的明文,因此读取消息并保持安全性。•常规加密主要具有5种成分:
双梗巴贝斯虫是一种蜱传顶复门血液原虫,可引起牛巴贝斯虫病。目前用于治疗牛巴贝斯虫病的药物有几个缺点,包括毒性、无法有效清除寄生虫以及可能产生耐药性。寻找针对寄生虫必需和独特代谢途径的化合物是寻找替代药物治疗方法的合理方法。基于基因组序列和转录组学分析,可以推断无氧糖酵解是巴贝斯虫的主要三磷酸腺苷 (ATP) 供应,而乳酸脱氢酶 (LDH) 是该途径中必需的酶之一。此外,巴贝斯虫的 LDH 序列与其牛同源物不同,因此是一种潜在的化疗靶点,可减少寄生虫的 ATP 供应,但不减少宿主的 ATP 供应。已知棉酚是狭义牛巴贝斯虫和广义田鼠巴贝斯虫以及其他相关寄生虫中LDH的有效特异性抑制剂,但目前还没有关于狭义双芽巴贝斯虫寄生虫的此类数据。据此,我们表明LDH氨基酸序列在狭义巴贝斯虫中高度保守,但在广义巴贝斯虫中并非如此。对双芽巴贝斯虫LDH的预测性结构分析表明,与牛巴贝斯虫相比,与棉酚结合的关键氨基酸是保守的。棉酚对双芽巴贝斯虫的体外生长有显著(P < 0.0001)抑制作用,处理72小时后IC 50 为43.97 mM。在60 mM棉酚时观察到最大IC(IC 98)。然而,与暴露于 DMSO 的对照细胞相比,用 60 mM (IC 98 ) 棉酚培养牛 PBMC 时,观察到对细胞活力的显著影响。有趣的是,在 3% 氧气中培养的 B. bigemina 表达的 LDH 水平明显高于在含有 ~20% 氧气的环境条件下维持的寄生虫,并且对棉酚的抵抗力更强。总之,结果表明棉酚有可能成为一种有效的抗 B. bigemina 感染药物,但应在体内研究中进一步评估治疗剂量下宿主毒性的风险。
尽管宿主生理调节已被解释为支持杆状病毒传播的重要过程,但不能排除宿主抗病毒反应对能量供应的需求。我们目前的研究表明,家蚕 AcMNPV(芽生病毒)感染后的代谢诱导刺激了病毒清除和抗病毒蛋白 gloverin 的产生。此外,我们证明了腺苷受体信号 (AdoR) 在调节杆状病毒感染后的这种代谢重编程中起着重要作用。通过使用第二个鳞翅目模型草地贪夜蛾 Sf-21 细胞,我们证明了由腺苷信号调节的糖酵解诱导是调节杆状病毒感染允许性的保守机制。我们目前的研究中的另一个有趣发现是,BmNPV 和 AcMNPV 感染都会引起代谢活化,但似乎 BmNPV 感染会缓和 ATP 产生的水平,这与 AcMNPV 感染后的急剧增加形成鲜明对比。我们鉴定出 BmNPV 感染诱导的潜在 AdoR miRNA,并得出结论,BmNPV 可能试图通过抑制腺苷信号传导并进一步降低宿主的抗杆状病毒反应来最大限度地减少代谢活化。我们目前的研究表明,杆状病毒感染后腺苷信号传导激活能量合成是宿主的生理反应,对于支持抗感染的先天免疫反应至关重要。
骨稳态通过破骨细胞介导的骨吸收和成骨细胞介导的骨形成保持。绝经后妇女雌激素水平的急剧下降会导致破骨细胞过度活化,骨稳态受损和随后的骨质流失。肠道微生物组的变化会影响骨矿物质密度。但是,肠道微生物组在雌激素缺乏引起的骨质流失及其潜在机制中的作用仍然未知。在这项研究中,我们发现孢子菌的丰度(C. spor。) 及其衍生的代谢产物,吲哚丙酸(IPA)在卵巢切除(OVX)小鼠中降低。 体外测定法表明IPA抑制了破骨细胞的分化和功能。 在分子水平上,IPA抑制了核因子Kappa-配体(RANKL)诱导的妊娠X受体(PXR)泛素化和降解的受体激活剂,从而导致PXR与P65的持续结合增加。 在体内每日IPA给药或重复的C. spor。 定殖侵害了OVX诱导的骨质流失。 保护活细菌免受严峻的胃环境,并延迟口服孢子孢子的排空。 从肠道,一个C. spor。 - 封装的丝纤维蛋白(SF)水凝胶系统,在OVX小鼠中获得了与重复的细菌移植或每日给药相当的OVX小鼠的骨骼保护。 总体而言,我们发现肠道孢子 - 衍生的IPA通过调节PXR/p65复合物来参与雌激素缺乏诱导的破骨细胞过度活化。在这项研究中,我们发现孢子菌的丰度(C. spor。)及其衍生的代谢产物,吲哚丙酸(IPA)在卵巢切除(OVX)小鼠中降低。体外测定法表明IPA抑制了破骨细胞的分化和功能。在分子水平上,IPA抑制了核因子Kappa-配体(RANKL)诱导的妊娠X受体(PXR)泛素化和降解的受体激活剂,从而导致PXR与P65的持续结合增加。在体内每日IPA给药或重复的C. spor。 定殖侵害了OVX诱导的骨质流失。 保护活细菌免受严峻的胃环境,并延迟口服孢子孢子的排空。 从肠道,一个C. spor。 - 封装的丝纤维蛋白(SF)水凝胶系统,在OVX小鼠中获得了与重复的细菌移植或每日给药相当的OVX小鼠的骨骼保护。 总体而言,我们发现肠道孢子 - 衍生的IPA通过调节PXR/p65复合物来参与雌激素缺乏诱导的破骨细胞过度活化。在体内每日IPA给药或重复的C. spor。定殖侵害了OVX诱导的骨质流失。保护活细菌免受严峻的胃环境,并延迟口服孢子孢子的排空。从肠道,一个C. spor。- 封装的丝纤维蛋白(SF)水凝胶系统,在OVX小鼠中获得了与重复的细菌移植或每日给药相当的OVX小鼠的骨骼保护。总体而言,我们发现肠道孢子 - 衍生的IPA通过调节PXR/p65复合物来参与雌激素缺乏诱导的破骨细胞过度活化。C.孢子。包含的SF水凝胶系统是一种有前途的工具,可打击绝经后骨质疏松症,而无需重复的细菌移植。
参考文献1。en ISO 11133:2014+AMD1:2018+AMD2:2020。 食物,动物饲料和水的微生物学 - 制备,生产,存储和性能测试。 2。 ISO 14189:2013。 水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。 3。 ISO 7937:2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌(Sucque provenienti o污染da acque浅表表)。 5。 downes F.P.和K. Ito(2001)食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会,华盛顿特区6。 Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。en ISO 11133:2014+AMD1:2018+AMD2:2020。食物,动物饲料和水的微生物学 - 制备,生产,存储和性能测试。2。ISO 14189:2013。 水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。 3。 ISO 7937:2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌(Sucque provenienti o污染da acque浅表表)。 5。 downes F.P.和K. Ito(2001)食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会,华盛顿特区6。 Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。ISO 14189:2013。水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。3。ISO 7937:2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌(Sucque provenienti o污染da acque浅表表)。 5。 downes F.P.和K. Ito(2001)食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会,华盛顿特区6。 Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。ISO 7937:2004。食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。4。Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。确定性DI梭状芽胞杆菌(Sucque provenienti o污染da acque浅表表)。5。downes F.P.和K. Ito(2001)食品微生物学检查的纲要。第4版。 美国公共卫生协会,华盛顿特区6。 Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。第4版。美国公共卫生协会,华盛顿特区6。Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。应用。微生物。27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。27:78。7。Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。Harmon,S.M.,O.A。Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。Kautler和J.T.Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。应用。微生物。22:688。8。Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。Shahidi,SA。和AR Ferguson(1971)App。微生物。21:500-606。