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方案 使用 CRISPR/Cas9 在马克斯克鲁维酵母中进行无标记基因敲除和敲低的方案
人们对食品和工业酵母马克斯克鲁维酵母的菌株工程越来越感兴趣，不同的研究小组已经描述并使用了许多 CRISPR/Cas9 系统。我们开发的方法允许使用细胞的内源性 DNA 修复机制非常快速有效地灭活靶基因。我们使用的菌株和质粒是免费提供的，在这里我们提供了一套集成的方案，可以轻松灭活基因并将 DNA 片段精确整合到基因组中，例如用于启动子替换、等位基因交换或引入点突变。这些方案使用 Cas9/gRNA 表达质粒 pUCC001 和 Golden Gate 组装来对靶向序列进行分子克隆。提供了一组全基因组的靶向序列。在野生型菌株或缺乏非同源末端连接 (NHEJ) DNA 修复的菌株中使用这些质粒，第一组方案解释了如何在精确目标处引入插入/缺失（NHEJ 介导）或精确缺失（同源性依赖性修复 (HDR) 介导）。第二组方案描述了如何交换启动子或编码序列以产生重编程基因。这些方法不需要使用显性或营养缺陷型标记基因，因此产生的菌株不含标记。这些方案已在多个 K. marxianus 菌株中进行了测试，非常简单，可以在任何分子生物学实验室中进行，无需专门的设备。
加利福尼亚大学圣克鲁斯大学...
2项目明星捕捉者：上肢康复的一种新颖的沉浸式虚拟现实体验64 2.1摘要。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。64 2.2简介。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。65 2.3为什么要虚拟现实？。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。67 2.4为什么要约束诱导运动疗法？。。。。。。。。。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>73 2.5我们的研究。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>74 2.6系统设计。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>77 2.7试点研究。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>82 2.8导致试点研究的讨论。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。。。。。。。。。。。83 2.9修订系统。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。91 2.10用户评估。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。94 2.11用户研究的结果和讨论。。。。。。。。。。。。。。。。95 2.12结论和未来工作。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。103 2.13致谢。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。106
第五届CDT储能及其应用会议，安德鲁·克鲁登（Andrew Cruden）教授，2021，01-21，实际上持有用于运输的燃料电池：to mee
1。Feigin VL，Vos T，Nichols E等。全球神经系统疾病的负担：将证据转化为政策。柳叶刀神经。2020; 19（3）：255-265。2。Vigo D，Thornicroft G，AtunR。估计精神疾病的真正全球负担。柳叶刀精神病学。2016; 3（2）：171-178。 3。 Deuschl G，Beghi E，Fazekas F等。 欧洲神经系统疾病的负担：2017年全球疾病负担研究的分析。 柳叶刀公共卫生。 2020; 5（10）：E551-E567。 4。 Olesen J，Gustavsson A，Svensson M等。 欧洲脑疾病的经济成本。 EUR J NEUROL。 2012; 19（1）：155-162。 5。 Wittchen Hu，Jacobi F，Rehm J等。 2010年欧洲大脑的精神障碍和其他疾病的大小和负担。 EUR神经心理药物。 2011; 21（9）：655-679。 6。 神经系统疾病：公共卫生挑战。 世界卫生组织，2006年。 SBN 978 92 4 156336 9。 7。 Dodart JC，Mathis C，Bales KR，Paul SM。 我的老鼠患有阿尔茨海默氏病？ 基因脑行为。 2002; 1（3）：142-155。 8。 Bolton C.药物疗效从体内模型转化为人类疾病，特别提及实验性自身免疫性脑脊髓炎和多发性硬化症。 炎症药理学。 2007; 15（5）：183-187。 9。 Lassmann H.多发性硬化症的实验模型。2016; 3（2）：171-178。3。Deuschl G，Beghi E，Fazekas F等。欧洲神经系统疾病的负担：2017年全球疾病负担研究的分析。柳叶刀公共卫生。2020; 5（10）：E551-E567。 4。 Olesen J，Gustavsson A，Svensson M等。 欧洲脑疾病的经济成本。 EUR J NEUROL。 2012; 19（1）：155-162。 5。 Wittchen Hu，Jacobi F，Rehm J等。 2010年欧洲大脑的精神障碍和其他疾病的大小和负担。 EUR神经心理药物。 2011; 21（9）：655-679。 6。 神经系统疾病：公共卫生挑战。 世界卫生组织，2006年。 SBN 978 92 4 156336 9。 7。 Dodart JC，Mathis C，Bales KR，Paul SM。 我的老鼠患有阿尔茨海默氏病？ 基因脑行为。 2002; 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1（3）：142-155。8。Bolton C.药物疗效从体内模型转化为人类疾病，特别提及实验性自身免疫性脑脊髓炎和多发性硬化症。炎症药理学。2007; 15（5）：183-187。 9。 Lassmann H.多发性硬化症的实验模型。2007; 15（5）：183-187。9。Lassmann H.多发性硬化症的实验模型。Rev Neurol（巴黎）。2007; 163（6-7）：651-655。 10。 langui D，Lachapelle F，Duyckaerts C.神经退行性疾病的动物模型。 Med Sci（巴黎）。 2007; 23（2）：180-186。 11。 Mackenzie IR，Bigio EH，Ince PG等。 病理TDP-43分裂 - 散发性肌萎缩性侧索硬化症来自肌萎缩性lateral骨硬化，并带有SOD1突变。 Ann Neurol。 2007; 61（5）：427-434。 12。 Robertson J，Sanelli T，Xiao S等。 突变SOD1转基因小鼠中缺乏TDP-43异常表现出与ALS的差异。 Neurosci Lett。 2007; 420（2）：128-132。 13。 Duyckaerts C，Potier MC，Delatour B.阿尔茨海默氏病模型和人类神经病理学：相似性和差异。 acta neuro-pathol。 2008; 115（1）：5-38。 14。 Howlett DR，Richardson JC。 App转基因小鼠的病理学：阿尔茨海默氏病的模型还是APP的过度表达？ 组醇组织性疾病。 2009; 24（1）：83-100。 15。 Slavin A，Kelly-Modis L，Labadia M，Ryan K，Brown ML。 多发性硬化症的致病机制和实验模型。 自动城市。 2010; 43（7）：504-513。 16。 Swarup V，Julien JP。 ALS发病机理：遗传学和小鼠模型的最新见解。 Prog神经心理药物精神病学。 2011; 35（2）：363-369。 17。 否认A，Johnson AJ，Bieber AJ，Warrington AE，Rodriguez M，Pirko I. 病理生理学。 18。2007; 163（6-7）：651-655。10。langui D，Lachapelle F，Duyckaerts C.神经退行性疾病的动物模型。Med Sci（巴黎）。2007; 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39（1）：3-18。 21。 Gerdes MJ，Sevinsky CJ，Sood A等。 高度多重的单细胞分析，对福尔马林固定，石蜡包裹的癌组织。 Proc Natl Acad Sci u s a。 2013; 110（29）：11982-11987。2013; 39（1）：3-18。21。Gerdes MJ，Sevinsky CJ，Sood A等。高度多重的单细胞分析，对福尔马林固定，石蜡包裹的癌组织。Proc Natl Acad Sci u s a。2013; 110（29）：11982-11987。2013; 110（29）：11982-11987。
新墨西哥州拉斯克鲁塞斯市战略规划
简介 这项战略规划工作使社区成员和市领导有机会通过确定需要改进的优先事项来确定未来成功的关键因素，这些改进优先事项与“提升拉斯克鲁塞斯”计划中包含的短期目标和举措以及市议会确认的新目标保持一致。战略计划的基础体现在愿景、使命和组织价值观中。这些要素是确定优先事项和目标的基础，并指导市政府工作人员的工作。目标和优先事项的实施应经过深思熟虑且透明地进行，市议会应定期审查以确保取得进展。管理合伙人公司 (Management Partners) 推动了这项战略计划的制定，该公司是一家专门协助美国地方政府的公司。
加州大学圣克鲁斯分校
曲率影响多个长度尺度的物理特性，从形状和尺寸随曲率而急剧变化的宏观尺度，到具有结构、化学、电子和磁性短程有序的材料中的界面和不均匀性的纳米尺度。在关联、纠缠和拓扑占主导地位的量子材料中，曲率开辟了新特性和新现象的道路，这些特性和现象最近出现，可能对未来材料的基础和应用研究产生巨大影响。特别是，具有非共线和拓扑状态的磁性系统和 3D 磁性纳米结构可以从将曲率作为新的设计参数中受益匪浅，以探索在磁场和应力传感、微型机器人以及信息处理和存储中的潜在应用。本文概述了合成、理论和特性研究的最新进展，并讨论了利用曲率实现 3D 纳米磁性的未来方向、挑战和应用潜力。
第五届CDT储能及其应用会议，安德鲁·克鲁登（Andrew Cruden）教授，2021，01-21，实际上持有用于运输的燃料电池：to mee
有必要减少国际运输部门的有害排放。板载能源需求可以归类为：推进或辅助服务。辅助服务贡献了很大比例的能源需求，其中包括：压缩机，泵和HVAC（加热，通风和空调）。通常，使用与主推进相同的燃料源来满足此需求（即化石燃料）。这项研究已经分析了使用LNG油轮的数据来开发案例研究，通过安装氢燃料电池来满足辅助需求，是否可以通过满足辅助需求来降低大规模船只的排放。模拟表明，对于压缩氢的10 x 40英尺容器的容量，最佳燃料电池尺寸将为3兆瓦，这可以节省10600 MWH的化石燃料使用，相当于CO 2的2343吨。因此，这可能会使运输能源需求的很大一部分脱碳。尽管有一些显着的技术和商业考虑，例如燃料电池寿命和资本支出要求。结果暗示，如果可以管理辅助负载以避免需求达到高峰，这可能会进一步提高该概念的有效性。c⃝2021作者。由Elsevier Ltd.这是CC下的开放访问文章（http://creativecommons.org/licenses/4.0/）。
加州大学圣克鲁斯分校
生长素诱导降解 (AID) 系统已成为一种强大的工具，可有条件地消耗多种生物体和细胞类型的蛋白质。在这里，我们描述了一种工具包，用于增强秀丽隐杆线虫中 AID 系统的使用。我们已经生成了一组单拷贝、组织特异性（生殖系、肠道、神经元、肌肉、咽喉、皮下组织、接缝细胞、锚细胞）和全体细胞 TIR1 表达菌株，这些菌株携带共表达的蓝色荧光报告基因，以便在实验中使用红色和绿色通道。这些转基因被插入常用的、特征明确的基因座中。我们证实，我们的 TIR1 表达菌株对几种核和细胞质 AID 标记的内源性底物产生了预期的消耗表型。我们还构建了一组质粒，用于构建修复模板，以通过 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑生成荧光蛋白::AID 融合。这些质粒与秀丽隐杆线虫群体中常用的基因组编辑方法（Gibson 或 SapTrap 组装质粒修复模板或 PCR 衍生的线性修复模板）兼容。这些试剂将共同补充现有的 TIR1 菌株，并促进快速和高通量的基因荧光蛋白::AID 标记。这组新的 TIR1 表达菌株和模块化、高效的克隆载体可作为直接组装 CRISPR/Cas9 修复模板的平台，用于条件性蛋白质消耗。
超级克鲁斯特人倡议：加强创新生态系统的机会
在审查了几个主要的绩效指标之后，该政府将用于跟踪超级克洛德（Beaudry）和太阳能赛车的进度的几个关键绩效指标，这些指标主要由通用指标组成，这些指标主要涵盖了该计划的主要目标，但过度强调的是基本的指标，例如参与公司和组织的数量以及创建的新产品以及创建的新产品。正如他们指出的那样，尽管这些指标可能相对容易量化，但它们充其量是创新及其影响的代理。他们忽略了重要的关键要素，这些要素与了解创新成果有关，例如生态系统成分之间的联系和关系的本质，所涉及的人员的创新能力以及知识转移和技术采用的程度。
新墨西哥州拉斯克鲁塞斯市公民参与计划
拉斯克鲁塞斯市 (City) 认识到公众参与在定义和了解当前住房和社区发展需求以及优先安排资源以满足这些需求方面的重要性。该市的公民参与计划旨在为所有年龄、性别、经济水平、种族、民族和特殊需求的公民提供平等的机会参与其中。本文件是 2021 年综合计划计划年度以及所有后续计划年度（直至 2025 年）的城市公民参与计划。本公民参与计划是根据 HUD 综合计划法规的 24 CFR 第 91.100 和 91.105 条起草的。为了确保所有人群和需求群体最大限度地参与综合规划过程，并确保充分解决他们的问题和担忧，市政府将在制定综合规划、年度行动计划、综合年度绩效评估报告 (CAPER) 和重大修订时遵循其通过的公民参与计划中规定的标准。参与过程将由市社区发展部制定和监督。市五年公民参与计划的主要目标是：
对维度诅咒与邓宁 - 克鲁格效应之间的关系的调查
本研究介绍了分析对人类行为的信心来源的新颖观点。通过在机器学习和心理学领域的两个现象之间的关系，即dunning-kruger的效果和维度的诅咒，对信心的概念进行了研究。根据神经科学研究了这两种现象之间的关系。这项研究声称，信心与获取特定信息所需的总时间高度相关，并且这种关系成反比。图像性别分类算法用于分析这项研究的这种关系，并将由于该分析而获得的曲线与Dunning-Kruger效应的曲线和维度的诅咒进行了比较。通过了解人类解决问题的能力和记忆的数学模型的知识来解释这种关系。