成功使用了形态学调节基因,ZM-BABY BOOM(ZMBBM)和ZM-WUSCHEL2(ZMWUS2),用于农杆菌介导的玉米(Zea Mays L.)和高粱(Sorghum Bicolor L.)的玉米转化(Zea Mays L.在这里,我们报告了两种形态学基因介导的小麦转化方法,无论是否有或没有形态学和标记基因切除。这些方法分别产生高达58%和75%的独立转化效率。在这两种情况下,用于产生转基因植物的组织培养时间从80天显着降低到近50天。此外,通过消除了消除胚胎轴切除的需求,绕开了延长愈伤组织形成的双重选择步骤的必要性,从而使该过程减少了劳动密集型,更高的劳动力,更高的劳动力,更高的劳动力,更高的劳动力,更具成本效益。此外,我们证明了这些方法的灵活性,并使用除草剂(磷酸素,乙酰硫磺磺酮)和抗生素(G418)选择了多种基因型的高质量转基因事件。
(未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2023 年 1 月 26 日发布。;https://doi.org/10.1101/2023.01.25.525570 doi:bioRxiv preprint
种子油可用作食用油,也越来越多地用于工业用途。尽管高油酸种子油更适合工业用途,但大多数种子油富含多不饱和脂肪酸 (PUFA),而油酸等单不饱和脂肪酸 (MUFA) 含量较低。亚麻荠油是一种新兴的油籽作物,种子含油量高,且能抵抗环境压力,其含有 60% 的 PUFA 和 30% 的 MUFA。六倍体亚麻荠携带三种 FAD2 同源物,编码脂肪酸去饱和酶 2 (FAD2),负责从油酸合成亚油酸。在本研究中,为了增加亚麻荠籽油中的 MUFA 含量,我们通过 CRISPR-Cas9 介导的基因编辑生成了 CsFAD2 敲除植物,使用包含 DsRed 作为选择标记的 pRedU6fad2EcCas9 载体、用于驱动覆盖三个 CsFAD2 同源物共同区域的单个向导 RNA (sgRNA) 的 U6 启动子以及用于驱动 Cas9 表达的卵细胞特异性启动子。我们使用来自转化亚麻荠叶片的基因组 DNA 通过 PCR 分析了 CsFAD2 同源物特异性序列。三对 FAD2 同源物的敲除导致矮小的丛生表型,但大大提高了种子中的 MUFA 水平(提高了 80%)。然而,具有两对 CsFAD2 同源物的转化子被敲除,但另一对野生型杂合子显示正常生长,种子 MUFA 产量增加了 60%。这些结果为通过基因组编辑影响多倍体作物生长的基因代谢工程提供了基础。