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World File Search System加温
P-2030-S 毛毯加温柜手册 - Universal Medical
单隔间加温柜由 22 号不锈钢外壳和门构成，手柄和铰链设计用于承受高强度使用。柜子由 Halo Heat® 系统加热，该系统包含安装在隔间壁上的低瓦特密度电缆。该系统提供均匀分布的热量，无需热循环风扇。柜子由可调节的电子恒温器控制，其中包括热量指示灯 LED、温度设置按钮、温度升高和降低按钮以及用于监控隔间温度的数字显示屏。恒温器的温度范围为最低 90°F (32°C) 至最高 200°F (93°C)。该室配备一 (1) 个带搁板的白色环氧涂层毯式支撑组件，并配有一 (1) 套 5 英寸 (127 毫米) 重型脚轮 — 两个刚性脚轮和两个带刹车的旋转脚轮。
实验动物
摘要：电穿孔动物基因敲除系统技术（TAKE）是一种简单有效的方法，利用成簇的规律间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR 相关蛋白 9（Cas9）系统生成转基因小鼠。为了增强电穿孔在小鼠基因编辑中的多功能性，针对玻璃化冷冻小鼠胚胎优化了电条件，并将其应用于广泛使用的近交系（C57BL/6NCr、BALB/cCrSlc、FVB/NJcl 和 C3H/HeJJcl）的新鲜胚胎。电脉冲设置（穿孔脉冲：电压，150 V；脉冲宽度，1.0 ms；脉冲间隔，50 ms；脉冲数，+4；转移脉冲：电压，20 V；脉冲宽度，50 ms；脉冲间隔，50 ms；脉冲数，±5）对于玻璃化冷冻加温的小鼠胚胎是最佳的，其可以有效地将 gRNA/Cas9 复合物递送到受精卵中而无需透明带变薄过程并编辑目标位点。这些电条件在广泛使用的近交系小鼠中有效地产生了转基因小鼠。此外，使用间隙为 5 mm 的电极进行电穿孔可以在 5 分钟内引入超过 100 个胚胎，而无需特殊的预处理和复杂的技术技能，例如显微注射，并且在产生的后代中表现出较高的胚胎发育率和基因组编辑效率，从而快速高效地产生基因组编辑小鼠。本研究中使用的电条件用途广泛，可以更轻松高效地生成转基因小鼠，有助于了解人类疾病和基因功能。关键词：CRISPR/Cas9、电穿孔、冻融胚胎、基因组编辑
使用重组DNA技术的食物的检查方法尚未检查安全
0.5 g称重为聚丙烯离心管（50 mL体积），并使用离子 - 脱位树脂类型的DNA提取和纯化试剂盒（Qiagen Genomic-TIP）提取DNA并纯化DNA。在样品中加入7.5 ml的G2缓冲液 *1和20μL-淀粉酶 *2，与涡旋混合器剧烈混合，并在37°C下孵育1小时。加入7.5 mL的G2缓冲液，200μl蛋白酶K*3和20μlRNASEA*4，搅拌直至样品保持在管的底部，并在50°C下孵育1小时。同时，将离心管反转2-3次以混合样品。接下来，在4°C下在5,000 x g处离心15分钟，然后将所得的上清液（在2 mL部分中）转移到五个2 ml管（总计10毫升） *5中，在4°C下在20,000 x g处离心15分钟。从每2毫升管中收集1 ml上清液，以提前用1 mL qBT缓冲液 *1平衡的Qiagen Genomic-TIP 20/g，并提前加载（总计5 mL）。然后用QC缓冲液 *1洗涤尖端3次，然后转移到新的离心管和预热的QF缓冲液