拜氏梭菌 (Clostridium beijerinckii) 是一种很有前途的丁醇工业生产微生物,但其丁醇产量低且缺乏高效的基因工程工具包。一些负责 Spo0A 磷酸化的组氨酸激酶 (HK) 已被证实是调控溶剂型梭菌 (如丙酮丁醇梭菌) 丁醇生物合成的重要功能组分,但尚未在拜氏梭菌中进行有关 HK 的研究。本研究通过序列比对,筛选出 6 个已注释但尚未鉴定的候选 HK 基因,这些基因与丙酮丁醇梭菌的基因具有部分同源性(不低于 30%)。利用基于 CRISPR-Cas9n 的基因组编辑技术删除这些 HK 基因的编码区。 cbei2073 和 cbei4484 的缺失导致丁醇生物合成发生显著变化,与野生型相比,丁醇产量分别增加了 40.8% 和 17.3% (13.8 g/L 和 11.5 g/L vs. 9.8 g/L)。观察到丁醇生产速率更快,丁醇生产率分别大幅提高了 40.0% 和 20.0%,表明这两个 HK 在调节 C. beijerinckii 细胞代谢中起重要作用。此外,两个 HKs 失活菌株的孢子形成频率分别降低了 96.9% 和 77.4%。与野生型相比,另外四个 HK 缺失突变菌株(包括 cbei2087、cbei2435、cbei4925 和 cbei1553)表现出的表型变化很小。本研究揭示了HKs在拜氏梭菌中孢子形成和溶剂生成中的作用,并提供了一种新的HKs工程化策略来提高代谢物的产量。本研究产生的高丁醇生产菌株在工业生物丁醇生产中具有巨大的潜力。
摘要背景:通过生物化学转化从可再生生物质中获得的生物燃料和增值生物化学品已引起广泛关注,以满足全球可持续能源和环境目标。异丁醇是一种四碳醇,具有许多优点,使其成为有吸引力的化石燃料替代品。运动发酵单胞菌是一种高效的厌氧产乙醇细菌,使其成为生物精炼厂的有前途的工业平台。结果:在本研究中,研究了异丁醇对运动发酵单胞菌的影响,并构建了各种生产异丁醇的重组菌株。结果表明,运动发酵单胞菌亲本菌株能够在低于 12 g/L 的异丁醇存在下生长,而浓度高于 16 g/L 会抑制细胞生长。运动发酵单胞菌中异丁醇生产需要整合编码 2-酮异戊酸脱羧酶的异源基因,例如来自乳酸乳球菌的 kdcA。此外,在由四环素诱导启动子 Ptet 驱动的含有 kdcA 基因的重组菌株中,异丁醇产量从接近零提高到 100–150 mg/L。另外,我们确定在表达 kdcA 的重组 Z. mobilis 菌株中过表达异源 als 基因和两个参与缬氨酸代谢的天然基因( ilvC 和 ilvD )可将丙酮酸从乙醇生产转移到异丁醇生物合成。这一工程将异丁醇产量提高到 1 g/L 以上。最后,确定了含有由 Ptet 驱动的合成操纵子 als - ilvC - ilvD 和由组成型强启动子 Pgap 驱动的 kdcA 基因的重组菌株大大提高了异丁醇产量,最高滴度约为 4.0 g/L。最后,异丁醇生产受到通气的负面影响,通气较差的烧瓶中会产生更多的异丁醇。结论:这项研究表明,kdcA 与合成异源操纵子 als - ilvC - ilvD 的过度表达对于将丙酮酸从乙醇生产中转移出来以增强异丁醇的生物合成至关重要。此外,这项研究还提供了一种利用缬氨酸代谢途径在 Z. mobilis 中生产其他丙酮酸衍生生物化学物质的策略。关键词:Zymomonas mobilis、生物燃料、异丁醇、代谢工程、丙酮酸衍生生物化学物质、2-酮异戊酸脱羧酶 (Kdc)
微生物电气合成(MES)是一种有前途的碳利用技术,但是低价值的产品(即乙酸或甲烷)和高电力需求需求阻碍其工业采用。在这项研究中,低欧姆耐药性为15.7 m u m 2的电气有效的MES细胞在喂养批处理模式下以固定态进行了galva,这是高CO 2和H 2可用性的交替时期。这促进了乙酸和乙醇的产生,最终触发了选择性(碳为基础的78%)丁酸通过链伸长产生。以1.0或1.5 mA CM 2的施加电流为14.5 g m 2 d 1,为megasphaera sp。钥匙链拉长播放器。与含有富集群落的天主解的第二个细胞接种,导致丁酸产生的速率与以前的细胞相同,但滞后相降低了82%。此外,在阴极室中打断CO 2喂食并设置一个1.7 E 1.8 ATM的常数pH 2,触发了pH低于4.8的pH,触发了溶解剂丁醇的产生。有效的细胞设计导致平均细胞电压为2.6 e 2.8 V,尽管库仑(Coulombic efiencies)限于O 2和H 2的交叉,但产生了34.6 kWh el Kg 1的电能需求,即34.6 kWh el kg 1的丁酸1。总而言之,这项研究揭示了从CO 2获得能量良好的丁酸产生的最佳工作条件,并提出了一种将其进一步升级为有价值的丁醇的策略。©2023作者。由Elsevier B.V.代表中国环境科学研究所,中国环境科学学院出版。这是CC BY-NC-ND许可证(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)下的开放访问文章。
酒精毒性会显著影响工业生产的生物燃料的滴度和生产力。为了克服这一限制,我们必须找到并使用策略来提高生产菌株的抗压性。之前,我们开发了一个多重导航全局调控网络 (MINR) 库,该库针对 25 个调控基因,这些基因预计会在不同压力条件下改变酵母的全局调控。在本研究中,我们扩展了这一概念,使用饱和诱变库针对 47 个转录调节因子的活性位点。这 47 个目标调节因子与一半以上的酵母基因相互作用。然后,我们筛选并选择了 C3-C4 酒精耐受性。我们确定了对异丙醇和异丁醇具有抗性的特定突变体。值得注意的是,WAR1_K110N 变体提高了对异丙醇和异丁醇的耐受性。此外,我们研究了提高异丙醇和异丁醇胁迫耐受性的机制,发现与糖酵解相关的基因在对异丁醇的耐受性中发挥作用,而 ATP 合成和线粒体呼吸的变化在对异丁醇和异丙醇的耐受性中发挥作用。总的来说,这项研究揭示了异丙醇和异丁醇毒性的基本机制,并展示了一种通过扰乱转录调控网络来提高对 C3-C4 醇耐受性的有前途的策略。
在室温下,在磷掺杂的N型钻石中实现了氮呈(NV)中心的最长自旋相干时间。然而,难以控制杂质掺入和化学蒸气沉积(CVD)技术在N型钻石的生长中的问题。在本研究中,使用TERT-叔丁基氨基的N-型钻石样品由CVD合成,叔丁基磷酸的毒性比磷酸少得多。发现氮的无意掺入被逐渐增加H 2和CH 4的气体流速抑制。发现自旋相干时间(t 2)随氮浓度的降低而增加,这表明氮浓度限制了T 2的长度。在氮浓度最低的样品中,t 2增加到1.62±0.10 ms。光学检测到的磁共振光谱表明,所有隔离的NV中心都沿[111]方向对齐。HALL测量结果证实了在不同生长条件下预先处理的三个测量样品中的N型传导。室温下最高测量的霍尔移动性为422 cm 2 /(v s)。这项研究提供了适当的CVD条件,可用于生长掺杂磷的N型钻石,并具有完美比对的NV中心,表现出长旋转相干时间,这对于生产量子钻石设备很重要。
载体选择性ETL和HTL对于提取和运输电荷至关重要,同时最大程度地减少了界面电荷重组。在配置的钙钛矿太阳能电池中,钙钛矿层沉积在ETL层的顶部。9因此,ETL层的质量和特性直接影响光吸收钙钛矿层的性质。因此,开发和优化ETL层已成为研究的热门话题。最初,由于其合适的光电特性,TIO 2被广泛用作钙钛矿太阳能电池中的电子传输层。然而,它具有卵形照明下的光催化特性,需要大约500 1 c的高温退火以实现适当的结晶度,从而使该材料不适合用于PSC的升级和商业化。3,10–12为了克服这些缺点,已经研究了替代的N型金属氧化物,应允许低温处理,成本较低,应提高稳定性。13–17
ODEFSEY TAB 4 NDS NM PREZCOBIX TAB 800-150 4 NDS NM STRIBILD TAB 4 NDS NM SYMTUZA TAB 4 NDS NM TRIUMEQ PD TAB 4 NDS NM TRIUMEQ TAB 4 NDS NM TRIZIVIR TAB 4 NDS NM 抗结核药物 环丝氨酸 CAPS 250mg 4 NDS 乙胺丁醇盐酸盐 TABS 100mg 1 乙胺丁醇盐酸盐(MYAMBUTOL 的仿制药)TABS 400mg
主要基于 NDoH 利福平耐药结核病管理指南,2023 年 9 月。可根据要求提供其他参考资料。E = 乙胺丁醇;H = 异烟肼;RHZE = 利福平、异烟肼、吡嗪酰胺和乙胺丁醇的固定剂量组合;RH = 利福平和异烟肼的固定剂量组合;R = 利福平;Z = 吡嗪酰胺 * 如果患者正在接受血液透析,则可以使用
摘要 生物丁醇是一种有价值的生化药品,也是最有前途的生物燃料之一。糖丁酸梭菌 N1-4 是一种高丁醇生产菌株。然而,其强烈的自溶行为导致细胞稳定性差,尤其是在连续发酵过程中,从而限制了该菌株在长期和工业规模过程中的适用性。在本研究中,我们旨在评估糖丁酸梭菌基因组中自溶素基因与细胞自溶相关的作用,并进一步开发更稳定的菌株以增强丁醇产量。首先,通过与其他菌株中的同源基因的氨基酸序列比较,在该菌株中鉴定了推定的自溶素编码基因。然后,通过单独过表达所有这些推定的自溶素基因并表征相应的重组菌株,确定了四个负责显著细胞自溶活性的关键基因。此外,使用 CRISPR-Cas9 删除这些关键基因。发酵特性表明所得突变体的性能有所提高。本研究的结果揭示了自溶素对细胞稳定性和溶剂生产的作用的宝贵见解,并为开发用于增强生物燃料和生物化学品生产的强效菌株提供了重要参考。