结果表明,与自由采食组相比,蛋鸡饲喂制度显著(P<0.05 和 P<0.01)提高了霍氏单位和蛋壳重量百分比以及受精率,并显著(P<0.01)降低了蛋白指数。而蛋重、形状指数、蛋黄稠度、蛋黄指数、蛋黄重量百分比、蛋白重量百分比以及蛋孵化率和受精蛋百分比没有显著影响。然而,饲喂量差异的影响表明,在 110g 饲料/鸡/天时,净收入 (NR) 和经济效率比自由采食组有所增加。关于微生物芽孢杆菌菌株在蛋鸡饲喂中添加的影响,显著提高了(P≤0.01)蛋黄指数、霍氏单位、蛋黄重量和蛋白重量百分比、精子活力、死精子、精子畸形、精子细胞浓度和受精率
通过研究生活方式和环境因素对精液质量和生育率的影响,人工智能可以帮助预测男性不育症。计算机辅助精液分析 (CASA) 不再是实验性的,而是越来越多地应用于临床实践,以减少人为错误,并在更短的时间内分析更多样本。这种基于智能手机的新型应用程序可用于评估精子活力以及 DNA 完整性。目前,正在进行研究,以选择用于卵胞浆内单精子注射 (ICSI) 的最佳精子。正在提出一种新系统,该系统将 ICSI 屏幕实时连接到互联网,然后连接到人工智能服务器,从而指导胚胎学家确定最佳精子以固定并注射到卵母细胞中。人工智能的这种应用有望提高受精率、高质量胚胎,从而获得更好的 IVF 结果。
超排卵和体外受精 (IVF) 等生殖技术已广泛用于产生转基因动物。目前小鼠超排卵的黄金标准是使用马绒毛膜促性腺激素 (eCG) 和人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 的一致治疗。最近报道了一种使用抑制素抗血清 (IAS) 代替 eCG 的替代方法。在这里,我们评估了 C57BL/6J 和 B6D2F1 小鼠中的不同超排卵策略。首先,我们发现使用 5 周大的 C57BL/6J 和 4 周大的 B6D2F1 捐赠者可以获得更好的超排卵结果。然后,我们比较了两种小鼠品系中不同剂量的 eCG - hCG、IAS - hCG 和 eCG - IAS - hCG。使用 IAS - hCG 和 eCG - IAS - hCG 方法获得的卵母细胞数量显著增加。然而,自然交配时受精率较低(36.3 – 38.8%)。我们随后证实,IVF 可以显著提高受精率,最高可达 89.1%。最后,我们进行了 CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑,以 Scn11a 和 Kcnh1 基因座为目标,并成功使用 eCG – hCG 和 IAS – hCG 诱导的受精卵获得了突变幼崽,这些幼崽通过自然交配或 IVF 受精。我们的结果表明,IAS 是一种很有前途的超排卵试剂,使用 IAS 诱导的受精卵不太可能影响基因组编辑的效率。
不孕不育是一个日益严重的全球公共卫生问题,影响着全球超过 4800 万对夫妇。1 男性和女性对不孕不育率的贡献相同,各自占不孕不育病例的约 40%,2 其余病例的原因尚不清楚。基本精液分析以评估精子的浓度、活力、运动能力和形态是诊断男性不育的主要步骤。3 然而,这一步骤不足以做出决定性的诊断决定,因为这些精液参数对于可育和不育男性来说有很大的重叠。4 相反,精子 DNA 完整性分析在男性不育诊断和辅助生殖中变得越来越重要,因为它与受精率、胚胎发育和后代健康密切相关。5 在辅助生殖和胞浆内精子注射的背景下,精子样本的 DNA 分析对于指导治疗和防止受损 DNA 中的遗传疾病传播给后代至关重要。6 DNA 损伤包括 DNA 碎片、异常 DNA 包装和鱼精蛋白缺乏。7a
使用体内测定法,我们选择了11个基因,这些基因在斑马鱼中使用微阵列分析和RNA测序时在排卵期间高度上调。Starmaker基因(STM)是这些基因之一。尽管以前据报道在斑马鱼的早期发育期间据报道STM参与耳石形成,但我们在卵中检测到了其在卵中的表达,表明STM通过使用CRISPR/CAS9系统建立STM基因敲除菌株与受精有关。在本研究中对STM敲除鱼进行了进一步的表型分析。具有较高的非施肥率,STM突变菌株的存活率极低。纯合突变斑马鱼的耳石表现出异常的胚胎和成年鱼类形态。但是,鱼在胚胎或成年人中没有显示出游泳行为的任何异常。STM蛋白。纤维支持的旋钮样结构(Fe)也显示出STM突变体中的异常结构。STM蛋白对于耳石形成是必需的,缺乏STM会导致耳石形成异常。耳石形成的部分缺陷不会导致游泳行为的缺陷。STM蛋白在绒毛膜中表达,并负责Fe上纤维支撑的旋钮样结构的形成。建议缺乏STM由于FE的形成不足而导致较低的受精率。
摘要 — 微小扇头蜱(Boophilus)蜱是牛的专性吸血性外寄生虫,是致病微生物的载体。传统的蜱虫控制基于化学杀螨剂的应用;然而,不加控制地使用它们会增加抗性蜱虫种群,以及食品和环境污染。替代免疫蜱虫控制已被证明是部分有效的。因此,需要鉴定新抗原以提高免疫保护。这项工作的目的是评估 Cys 环受体作为疫苗候选物的效果。在大肠杆菌中重组产生谷氨酸受体和甘氨酸样受体的 N 端结构域。用弗氏佐剂乳化的四剂重组蛋白分别对 BALB/c 小鼠组进行免疫。经蛋白质印迹分析证明,两种候选疫苗在小鼠中均具有免疫原性。接下来,用佐剂 Montanide ISA 50 V2 单独配制重组蛋白,并在感染微小扇头蜱幼虫的牛身上进行评估。用每种佐剂蛋白的三剂对三组欧洲杂交小牛进行免疫。使用 ELISA 测试评估针对重组蛋白引起的 IgG 免疫反应。结果表明,候选疫苗在接种疫苗的牛身上产生了中等体液反应。疫苗接种显著影响了成年雌性蜱的吸血数量,但对蜱的重量、卵重和卵的受精率没有显著影响。谷氨酸受体和甘氨酸样受体的疫苗效力分别为 33% 和 25%。
种公鸡精液质量对配产蛋母鸡数量和家禽业的经济效益影响巨大。家禽营养的充足性和平衡性,尤其是能量供应,对种公鸡的生殖潜力有至关重要的影响,但其潜在机制尚不清楚。为了进行这项研究,我们选择了 90 只 13 周龄、日龄相同、体重相近(1,437 ± 44.3 克)的黄羽公鸡,并将其随机分为低能量饮食 (LE)、中等能量饮食 (ME) 和高能量饮食 (HE) 处理组。与繁殖性能相关的表型参数包括精液质量、受精率和孵化率,以及睾丸形态参数,包括生精上皮长度(SEL)、生精小管周长(STP)、生精小管面积(STA)和Johnsen评分,以研究不同能量饮食对繁殖性能的调控作用。此外,还测量了精子发生和精子运动相关基因,包括sry相关的高迁移率族蛋白框(SOX)基因家族和精子相关抗原(SPAG)基因家族,以及线粒体凋亡相关基因,例如Cyt-C、Bcl-2和Bax,以确定能量对繁殖性能的潜在机制。结果表明,与LE处理相比,ME处理的生殖腺指数和精子活力显著增加。与低热量和高热量处理相比,ME 处理组的鸡睾丸发育表现更佳,尤其是 SEL 和 Johnsen 评分显著增加。最后,ME 处理组精子发生相关基因(包括 SPAG6、SPAG16、SOX5、SOX6 和 SOX13)和线粒体凋亡相关基因(如 Cyt-C 和 Bcl-2)显著上调。这项研究得出结论,适当的能量供应刺激了精子发生和精子获能的规律能量代谢,最终提高了种公鸡的精液质量和繁殖性能。
合成的八倍体油菜籽 Y3380 在用作花粉供体为植物授粉时可诱导母本双单倍体。但双单倍体形成的潜在机制仍不清楚。我们推测双单倍体诱导发生在诱导系的染色体传递到母本卵细胞,并通过受精形成合子时。在合子有丝分裂过程中,父本染色体被特异性地消除。在消除过程中,部分父本基因可能通过同源交换渗入母本基因组。然后,合子单倍体基因组加倍(早期单倍体加倍,EH 现象),加倍的合子继续发育成完整的胚胎,最终形成双单倍体后代。为了验证假设,本研究以八倍体Y3380品系为标记,将4122-cp4-EPSPS外源基因回交,得到六倍体Y3380-cp4-EPSPS作为父本材料,对3个不同的母本材料进行授粉。在授粉后48 h观察诱导品系与母本杂交的受精过程,受精率分别达到97.92%和98.72%。授粉12 d后,用原位PCR检测胚中存在cp4-EPSPS,授粉后13 — 23 d,F 1 胚含有cp4-EPSPS基因的概率高达97.27%,而后逐渐下降,在23 — 33 d时为0%。同时免疫荧光观察了3~29天胚胎中cp4-EPSPS的表达情况。随着胚胎的发育,cp4-EPSPS标记基因不断丢失,伴随胚胎死亡,30天后在存活的胚胎中检测不到cp4-EPSPS的存在。同时对诱导后代的SNP检测证实了双单倍体的存在,进一步表明诱导过程是由于父本染色体特异性的丧失引起的。四倍体诱导后代表现出诱导系基因位点的筛选,有杂合性,也有纯合性。结果表明,在诱导过程中,诱导系染色体被消除。
抑制素是一种二聚体糖蛋白,由𝛼和两个亚基组成。针对二聚体抑制素的免疫主要用于辅助生殖技术中以诱导超排卵。但免疫反应性的游离抑制素𝛼亚基的具体功能仍不清楚。在本研究中,使用针对游离抑制素𝛼亚基(Pro-𝛼 N-𝛼 C)的新型单克隆抗体进行了两项主要研究(第一项研究排卵,另一项研究受精)。排卵研究重复进行了 6 次,共涉及 48 只 4-6 周龄雌性 CD1 小鼠。在每个重复中,4 只对照小鼠接受 PMSG/hCG 治疗,4 只治疗小鼠接受含有 mAb-游离𝛼亚基的 PMSG/hCG。受精研究重复进行了 3 次,共涉及 22 只雌性 CD1 小鼠。在每个重复实验中,对照组和治疗组分别有 4、3 和 4 只小鼠。在这两项研究中,雌性小鼠腹膜内注射 50 单位/毫升孕马血清促性腺激素 (PMSG),单独注射或与 400ug mAb-Free 𝛼 亚单位联合注射,然后在 48 小时后注射 50 单位/毫升人绒毛膜促性腺激素 (hCG)。注射后 17 小时,所有组的雌性小鼠都被处死,并从输卵管中收集排卵的卵母细胞。对于受精研究,使用雄性 CD1 小鼠的新鲜精子进行体外受精。结果表明,与对照组相比,游离抑制素 𝛼 亚基的中和显著降低了排卵率 47.29%,而与对照组相比,免疫中和显著提高了受精率 55.68%,囊胚发育率 43.85%。这项研究表明,与二聚体抑制素的免疫中和效果相反,针对游离抑制素 𝛼 亚基的免疫会减少排卵。作者假设游离 𝛼 亚基可能起到抑制素拮抗剂的作用,与抑制素竞争与其共受体的结合。关键词:激活素、β-聚糖、受精、免疫中和、抑制素、排卵