许多离子通道参与控制胰岛β细胞的胰岛素合成和分泌。上皮钠通道(ENAC),但是ENAC在胰腺β细胞中的生物学作用尚不清楚。在这里,我们将CRISPR/ CAS9基因编辑技术应用于鼠胰腺β-细胞系(MIN6 Cell)中的敲除α -ENAC基因。为α -ENAC的外显子设计了四个单个指定RNA(SGRNA)位点。具有较高活性的SGRNA1和SGRNA3并共转染到MIN6细胞中。通过处理一系列实验流,包括药物筛选,克隆和测序,获得了MIN6细胞中的α -ENAC基因敲除(α -enac - / - )。与野生型MIN6细胞相比,细胞活力和胰岛素含量在α -ENAC - / - MIN6细胞中显着增加。因此,由CRISPR/CAS9技术产生的α-ENAC - / - MIN6细胞增加了研究胰腺β细胞中α -ENAC的生物学功能的有效工具。
已在Katholieke Universiteit Leuven的大学存储库Lirias(https://lirias.kuleuven.be/)上存档。内容与已发表论文的内容相同,但没有发布者的最终排版。参考这项工作时,请引用完整的书目信息:Tonti,M.,Verheyen,D.,Kozak,D.,Skåra,T.,Van Impe,J.F.M。(2024)。在脱脂和全牛奶粉中,鼠伤寒沙门氏菌和单核细胞增生的射频失活。国际食品微生物学杂志,413,110556。期刊和原始发表的论文可在以下网址找到:https://www.sciencecendirect.com/science/article/pii/s0168160523004737可以联系相应的作者以获取其他信息。开放访问条件可在以下网址提供:http://www.sherpa.ac.uk/romeo/
催乳素(PRL)受体(PRLR)基因在各个大脑区域表达,最高水平存在于脉络丛中,这是受体介导的PRL从血液到脑脊液流动的转运的位点。我们研究了PRL在鼠脉络丛中PRL基因表达的调节机制。我们首先研究了鼠Prlr基因中替代的第一个外显子的组织。除了三个已知的第一个外显子ME1 1,ME1 2和ME1 3,两个第一个外显子ME1 4和ME1 5还被cDNA克隆新近识别。PRLR mRNA的每个第一个外显子变体都表现出组织或通用表达。在小鼠的脉络丛中,与二肌小鼠中的小鼠相比,泌乳小鼠中ME1 3-,ME1 4-和ME1 5 -PRLR mRNA的表达水平增加。此外,与PRL差异(PRL c / c和prl c / k)小鼠相比,PRL(PRL K / K)小鼠的ME1 4-PRLR mRNA的表达水平降低。在卵巢切除的PRL K / K小鼠中,PRL给药的ME1 4 -PRLR mRNA的表达水平显着增加,但通过17 B-雌二醇给药。PRLR mRNA的最后两个外显子变体的表达水平,编码PRLR的长和短细胞质区域,在泌乳小鼠中也升高,并在PRL K / K小鼠中降低。这些发现表明,PRL通过ME1 4前外显子的转录激活刺激PRLR基因的表达,从而导致鼠脉络膜丛中PRLR mRNA的长形和短形式变体的增加。
背景信息CD44是一种I型跨膜糖蛋白,该糖蛋白在胚胎干细胞上表达,并在其他细胞类型的各种水平上表达,包括结缔组织和骨髓。CD44表达在癌细胞的亚群中也被上调,并被公认为是癌症干细胞的分子标记(PMID:29747682)。它是一种细胞表面受体,通过其对透明质酸(HA)的亲和力以及可能通过其对其他配体的亲和力(PMID:10694938)介导细胞细胞和细胞矩阵相互作用。与HA的粘附在细胞迁移,肿瘤生长和进展中起重要作用。 CD44还参与淋巴细胞的激活,再循环和归巢,以及造血。与HA的粘附在细胞迁移,肿瘤生长和进展中起重要作用。CD44还参与淋巴细胞的激活,再循环和归巢,以及造血。
背景信息CD44是一种I型跨膜糖蛋白,该糖蛋白在胚胎干细胞上表达,并在其他细胞类型的各种水平上表达,包括结缔组织和骨髓。CD44表达在癌细胞的亚群中也被上调,并被公认为是癌症干细胞的分子标记(PMID:29747682)。它是一种细胞表面受体,通过其对透明质酸(HA)的亲和力以及可能通过其对其他配体的亲和力(PMID:10694938)介导细胞细胞和细胞矩阵相互作用。与HA的粘附在细胞迁移,肿瘤生长和进展中起重要作用。 CD44还参与淋巴细胞的激活,再循环和归巢,以及造血。与HA的粘附在细胞迁移,肿瘤生长和进展中起重要作用。CD44还参与淋巴细胞的激活,再循环和归巢,以及造血。
最近在梨状皮层(皮质不成熟神经元,CINS)的第二层中鉴定出了非出生的,产前产生的“未成熟”神经元,这提出了有关其维持或消耗的问题。大多数形式的大脑结构可塑性随着年龄的增长而逐渐下降,这是由于干细胞耗竭而在成人神经发生中特别突出的特征。在胚胎发生过程中产生了CIN的整个种群。然后,这些细胞只是在产后和成人阶段保留不成熟,直到它们“醒着”才能完成成熟并最终整合到神经回路中。因此,问题仍然是开放的,如果不依赖干细胞分裂的CIN是否可能遵循类似的与年龄相关的还原模式,或者在替代方面可能会留下成人和衰老大脑中的年轻,未分化的细胞的储层。在这里,通过使用免疫细胞化学用于细胞骨架标记doublecortin,在小鼠梨状皮层中分析了CIN的数量和特征。研究了CIN的丰度和成熟阶段,以及其他成熟/不成熟的标志物的表达。尽管在少年阶段,这种神经元种群显着下降,但让人联想到海马神经发生中观察到的神经元,但少量高度不成熟的CIN持续了高级年龄。总体而言,尽管随着年龄的增长而减少数量,但我们报告说,CIN存在于整个动物寿命中。
异鼠李素(ISO)(3'-甲氧基-3,4',5,7-四羟基黄酮)是一种黄酮醇苷配基,富含于水果、蔬菜和茶叶中,以及沙棘、驱虫斑鸠和黄芪等传统药物中(3,4)。多种研究表明,ISO具有显著的免疫调节、抗炎、心脑血管保护作用(5-7)。此外,其抗癌作用已在结肠癌(8)、乳腺癌(9)和肺癌(10)中得到证实。在这些肿瘤中,ISO通过抑制细胞增殖和迁移以及激活细胞凋亡(10,11)表现出全面的抗肿瘤活性。尽管ISO对癌细胞的抑制作用已被广泛研究,但其在OC治疗中的潜在作用和分子机制仍不清楚。
图 1 Peromyscus maniculatus 和 Peromyscus polionotus 小鼠大脑中的基因表达。 (a) 两种焦点 Peromyscus 物种(粗体)与家鼠 (Mus)、大鼠 (Rattus) 和人类 (Homo) 的系统发育关系。 (b) 脑矢状切面示意图,突出显示了本研究中使用的 10 个(子)区域解剖位置(彩色)以及整个大脑(灰色)。 有关解剖的详细信息,请参见第 2 节和附表 S2。 (c) 基因表达整体变化的 t 分布随机邻域嵌入 (t-SNE) 图。 P. maniculatus 样本表示为朝下的三角形,P. polionotus 样本表示为朝上的三角形。 (d) 在一个或多个大脑区域中表达的基因数量(n = 16,078)。 (e)10 个(子)区域中私人表达基因的分布;511 个基因在整个大脑样本中表达,但在 10 个采样(子)区域中均未表达。
平均值±SEM显示; n =每组2-11。b)从2.8毫米基线的16.7 mm葡萄糖刺激,c)从0 mm基线刺激11毫米的葡萄糖刺激。Rajagopalan等。 ADA 2023口头表现。 抽象号。 181-or。 ex9 = exendin-9,GFP =绿色荧光蛋白,GLP-1 =胰高血糖素样肽1,GLP-1R = GLP-1受体,GLP- 1RA = GLP-1R激动剂,GLU =葡萄糖,GSIS,GSIS,GSIS,GSIS =葡萄糖刺激的胰岛素抑制剂胰岛素分泌,PGTX = PCANCREATIC GENEC GENEC TERPAIPE THERIC THERIC THERIC THERIC TREAPY THERIC THERIC THERIC TERAPTIC THERIC TERAPY THERIPRajagopalan等。ADA 2023口头表现。抽象号。181-or。ex9 = exendin-9,GFP =绿色荧光蛋白,GLP-1 =胰高血糖素样肽1,GLP-1R = GLP-1受体,GLP- 1RA = GLP-1R激动剂,GLU =葡萄糖,GSIS,GSIS,GSIS,GSIS =葡萄糖刺激的胰岛素抑制剂胰岛素分泌,PGTX = PCANCREATIC GENEC GENEC TERPAIPE THERIC THERIC THERIC THERIC TREAPY THERIC THERIC THERIC TERAPTIC THERIC TERAPY THERIP
预印本(未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此版本的版权所有者于 2025 年 1 月 15 日发布。;https://doi.org/10.1101/2025.01.10.632342 doi:bioRxiv 预印本