有效功能

近端小管缩短对Lowe综合征模型中蛋白质排泄的影响

底物是内吞作用的主要调节剂，预计LS LS患者的LMW蛋白尿是由于PT顶端内吞途径沿PT的某些有效功能所致。3与此相一致，培养细胞模型中的一部分研究表明，OCRL在内吞回收中起作用，这是通过防止在内吞囊泡上积累的肌动蛋白涂层的解聚和/或回收箱的作用。4,5但是，OCRL在细胞稳态中也具有许多其他角色，包括睫状生物发生，6-8细胞极性和自噬。6,9,10此外，OCRL在细胞因子期间被招募到脱落部位。11 ptdins（4,5）p 2累积稳定在细胞因子过程中的细胞内桥，并且其通过OCRL的水解对于脱落是必要的。11尚不清楚这些功能如何促进LS病理学。另一个未解决的问题是，OCRL的损失如何损害LS患者的Ca 2+，HCO 3 2和氨基酸的PT恢复。近年来已经开发了LS的小鼠和斑马鱼模型，但是在细胞培养中观察到的分子和细胞缺陷与患者和动物模型的表型之​​间的联系仍然难以捉摸。缺乏OCRL的转基因斑马鱼表现出降低的巨蛋白水平，降低了流体相位标记物的上升水平，除了与LS患者观察到的患者一致的眼睛和面部缺陷外，促脑肾脏PT中的亚皮囊泡较少。8,12小鼠LS模型的开发更为复杂。 这些8,12小鼠LS模型的开发更为复杂。这些OCRL敲除（KO）小鼠没有明显的表型，因为它们表达了高水平的Inpp5b，这是另一种磷脂酰肌醇5 9-磷酸酶，显然可以对某些OCRL功能进行操作。13 - 15小鼠PT中的inpp5b在较高水平和与人类相比的剪接变体中表达不同。16由于小鼠中的OCRL和INPP5B的全局KO是致命的，因此通过跨越OCRL KO小鼠的OCRL KO小鼠产生了17,18 LS小鼠模型，该小鼠过表达人Inpp5b与小鼠INPP5B KO：由此产生的雄性小鼠在年龄的8周时表现出适中的蛋白尿和氨基尿症。19,20已描述了一个最近的小鼠模型，其中在OCRL KO小鼠的肾脏中有条件地灭活了INPP5B。这些小鼠中的21个PT细胞表达了巨蛋白水平降低，并且表现出严重受损的内吞作用。令人惊讶的是，在KO之后没有立即观察到蛋白尿，而是需要几个月的发展。此时间滞后与OCRL对内吞途径功能的直接影响不一致，并表明在更长的时间段内发生的其他变化与LS表型相关。此外，需要靶向OCRL和INPP5B以观察任何肾脏表型，这是努力确定OCRL在Pt功能中的特定作用的努力。为了研究OCRL的损失如何影响PT功能，我们产生了PT细胞中LS的慢性CRISPR/CAS9 OCRL KO和LS的急性siRNA敲低模型。引人注目的是，在我们的所有模型中以及在患者纤维细胞中，我们观察到功能性OCRL的损失延长了细胞分裂的持续时间，并导致了多核细胞的积累。