(发行日期)2021-03-31(资源类型)书籍部分(版本)接受手稿(权利)©2021 Springer Nature Singapore Pte Ltd.
DNA的复制始于在称为复制起源的位点放松双螺旋。在这些位点,碱基之间的氢键被损坏,并且成对底座分开。一对复制片段聚集在一起并连接非复制DNA的位置称为复制叉。在细菌染色体中,DNA复制总是从称为原点的特定位点开始。每个来源控制一个称为复制子的DNA单元的复制。细菌具有复制的单个特定起源
将打靶特定人源基因的 Cas9 和 sgRNA 转染到 HEK293 细胞。转染所用的质粒 DNA 上含有 表达带双端核定位序列 ( NLS )的 Cas9 及 sgRNA 的表达框,通过 TransIT-X2 (Mirus) 转染 试剂进行转染。转染所用的 Cas9 mRNA 进行了假尿苷和 5- 甲基胞嘧啶修饰且带有双端 核定位序列,使用 transIT-mRNA 转染试剂将 sgRNA 和 mRNA 共转染。 Cas9 RNPs 使用脂质 体 RNAiMAX ( Life Technologies ) 进行反向转染, RNP 的终浓度为 10 nmol 。 Cas9 蛋白上不含 核定位序列。 EnGen Cas9 含有双端核定位序列。编辑效率通过 T7E1 实验进行分析,结果 以修饰百分比进行统计。
将打靶特定人源基因的 Cas9 和 sgRNA 转染到 HEK293 细胞。转染所用的质粒 DNA 上含有 表达带双端核定位序列 ( NLS )的 Cas9 及 sgRNA 的表达框,通过 TransIT-X2 (Mirus) 转染 试剂进行转染。转染所用的 Cas9 mRNA 进行了假尿苷和 5- 甲基胞嘧啶修饰且带有双端 核定位序列,使用 transIT-mRNA 转染试剂将 sgRNA 和 mRNA 共转染。 Cas9 RNPs 使用脂质 体 RNAiMAX ( Life Technologies ) 进行反向转染, RNP 的终浓度为 10 nmol 。 Cas9 蛋白上不含 核定位序列。 EnGen Cas9 含有双端核定位序列。编辑效率通过 T7E1 实验进行分析,结果 以修饰百分比进行统计。
2 熊的数量会减少。可能的想法包括:缺少雪意味着熊的伪装能力会下降,因此猎物会发现它们,而它们将得不到足够的食物;缺少海冰意味着熊的生存和繁殖空间会减少,使它们相互竞争,并且/或者意味着陆地周围地区的食物供应会因熊的数量增加而更快耗尽;温度升高意味着熊会过热。
(未通过同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。该版本的版权所有此版本发布于2024年7月3日。 https://doi.org/10.1101/2024.07.03.601885 doi:Biorxiv Preprint
摘要假设丘脑下核(STN)在反应停止信号的快速停止运动中起着核心作用。单单元记录这种作用的证据很少,但仍然不确定该作用与STN解剖学细分所描述的不同功能如何相关。在这里,我们使用非人类灵长类动物解决了知识的差距,以及区分反应性和主动作用抑制,开关和骨骼运动函数的任务。我们发现,STN神经元的特定子集具有与反应性动作停止或切换中因果关系一致的活性。重要的是,这些神经元严格隔离到STN的腹侧区域。在其他细分中编码任务维度(例如运动本身和主动控制)中的神经元。我们建议,STN参与反应性控制仅限于其腹侧部分,进一步暗示了脉冲控制障碍中的这一STN细分。
由于其独特的职责——拯救美国免受大规模杀伤性武器的危害,全球打击成为后 9/11 时代五角大楼进攻规划的一个重要的新重点:它是实施 2001 年核态势评估 (NPR) 中描述的新三位一体的基础;是美国战略司令部转变为美国军事规划中心的核心;也是 9/11 之后美国对其军事力量作用的看法在理论和政治上转变的体现。全球打击是对众议院和国防部长办公室 (OSD) 自 2001 年以来发布的具体指导的回应:•核态势评估(2001 年 12 月):通过阐明对部队和规划工具的要求奠定了基础,再次强调了针对拥有大规模杀伤性武器的地区对手的行动。 • 国家安全总统令 (NSPD) 14 (2002 年 6 月):根据《核态势评估》颁布新的核武器规划指南。 • 国家安全总统令 (NSPD) 17 (2002 年 9 月):公布了新的《打击大规模杀伤性武器国家战略》,作为打击核武器和其他大规模杀伤性武器的综合方法。重申美国将使用核武器——甚至是先发制人——对付任何使用大规模杀伤性武器对付美国、其海外军队以及盟友和盟友的人。呼吁混合使用核力量和常规力量。 • 美国国家安全战略 (2002 年 9 月):公开阐述了针对大规模杀伤性武器的先发制人原则,要求转变军事力量,以迅速而准确地“在流氓国家及其恐怖分子客户威胁或使用大规模杀伤性武器对付美国及其盟友和朋友之前阻止他们。” • 联合指挥计划,变更 2(2003 年 1 月):为战略司令部分配了四项新任务:全球打击、导弹防御、信息作战和全球 C4ISR。该指令将全球打击定义为“能够快速、远程、精确地执行动能(核和常规)和非动能(太空和信息作战元素)打击,以支持战区和国家目标。” • 核态势评估实施计划(2003 年 3 月):一份 26 页的清单,列出了 2001 年核态势评估中各军种被命令实施的具体项目。 • 核武器使用政策 (NUWEP)(2004 年 4 月):美国核计划将针对的国家的详细概述,包括各个打击选项(计划)的细分及其目标类别和目标。
在其安全理念中,美国核管理委员会 (NRC) 始终认识到解决不确定性作为其决策不可或缺的一部分的重要性。概率风险评估 (PRA) 是另一种用于支持许可证持有者和监管机构决策的分析工具。因此,许可证持有者和 NRC 需要考虑与 PRA 相关的不确定性对所考虑决策的影响。一个特别重要的方面是这些不确定性对将 PRA 结果与决策所涉及的验收准则进行比较的潜在影响。此外,当涉及筛选或边界分析、建模简化或假设或其他形式的完整性不确定性时,NRC 需要了解如何在决策中解决这种形式的不确定性。最终,使用本指南应使 NRC 能够更好地理解和考虑各种类型的 PRA 相关不确定性对监管决策的影响,从而做出更好的决策。