秘鲁的持有全球人均死亡率最高。这一结果的关键是缺乏可靠,快速和准确的分子测试,无法通过RT-QPCR避免SARS-COV-2检测的成本和物流的升高。为了促进在农村和社会经济剥夺的环境中进行大规模和及时的共同测试,我们实施并验证了RCSM,这是一种快速而敏感的CRISPR-CAS12A测试,用于从唾液中对SARS-COV-2进行分子检测。rcsms使用CRISPR-CAS技术和横向流条的功能,即使在设备有限的实验室中,即使在实验室中,SARS-COV-2也很容易地可视化。我们表明,使用TCEP/EDTA进行低成本的热化学处理足以使唾液中的病毒颗粒和细胞核酸酶失活,从而消除了需要用商业试剂盒提取病毒RNA的需要,以及笨拙的鼻咽猪咽swab手术和生物液级别的需求,以及生物液级别的2级实验室。值得注意的是,在利马两家医院进行的352名患者进行的临床验证中,RCSM在40分钟内检测到每10μL反应的352例患者,其灵敏度和特异性分别为96.5%和99.0%,相对于RT-QPCR。从该字段验证获得的负和正预测值表明,RCSM可以自信地部署在高和低患病率设置中。与其他基于CRISPR-CAS的生物传感器一样,RCSM可以轻松地重新编程以检测新的SARS-COV-2变体。我们得出的结论是,RCSM是RT-QPCR的快速,高效且廉价的替代品,用于扩大秘鲁和其他低收入和中低收入国家的COVID-19测试能力,具有不稳定的医疗保健系统。
摘要:大肠癌是全球癌症死亡的第三大最常见的恶性肿瘤,也是第二个主要原因。多项研究已将患者血清中癌细胞的抗原水平与疾病预后不良联系在一起。因此,检测低水平的癌症抗原的能力在较早的疾病诊断,评估和复发监测中应用。现有的癌症抗原检测方法通常需要多种试剂,训练有素的操作员或复杂的程序。一种减轻这些问题的方法是横向流量测定,这是一个基于纸张的平台,允许在复杂混合物中检测和量化目标分析物。测试很快,是护理点,拥有较长的保质期,并且可以在环境条件下存储,使其非常适合在各种设置中使用。虽然侧向流程通常使用球形金纳米颗粒来产生经典的红色信号,但最近的文献表明,球形的替代形态可以提高检测的极限。在这项工作中,我们报告了替代金纳米颗粒形态的应用,金纳米形状(长度约为35 nm)和金纳米酮(直径约为90 nm),用于癌甲型抗原的横向流量测定法。在比较测定中,与市售的球形金纳米颗粒相比,对于相同的抗体载荷和总金含量而言,金纳米酮的检测极限约为2倍,而每种测试中金纳米酮的数量〜3.2×x降低。在全面优化的测试中,使用金纳米酮获得了14.4 pg/mL的限制,比以前报道的基于金纳米粒子基于金纳米粒子的癌细胞抗原抗原横向流动测定法相比有24倍改善。关键字:黄金,纳米颗粒,侧流测定,癌症,生物标志物,等级纳米颗粒,定量,癌症抗原
直接从痰液中直接从痰液中检测到结核病检测的流线型护理点测试。 5,6,Padmapriya Banada 2,#,Yingda L. Xie 2,#,Cameron Myhrvold 1,7,8,9,#,#,†1普林斯顿大学分子生物学系,普林斯顿新泽西州,新泽西州普林斯顿大学,08544,美国08544,美国,美国2公共卫生研究所,新吉尔特吉尔特尔医学院,新吉尔斯医学院,新泽西州,新泽西州,新泽西州。 Epidemiology of Microbial Diseases, Yale School of Public Health, New Haven, Connecticut, United States of America 4 Pulmonary, Critical Care, and Sleep Medicine Section, Yale School of Medicine, New Haven, Connecticut, United States of America 5 Centro Internacional de Entrenamiento e Investigaciones Médicas (CIDEIM), Cali, Colombia 6 Universidad Icesi, Cali, Colombia 7 Department of Chemical and Biological工程,普林斯顿大学,新泽西州普林斯顿大学,美国08544,美国8 Omenn-Darling Bio Giogineering Institute,普林斯顿大学,新泽西州普林斯顿大学,新泽西州,08544,美国9美国,普林斯顿大学,普林斯顿大学,普林斯顿大学,新泽西州,新泽西作者同样贡献#这些作者同样贡献†相应的作者:cmyhrvol@princeton.edu摘要结核分枝杆菌(MTB)是对全球健康的主要威胁,每年造成超过100万人死亡。我们试图开发一种基于CRISPR的等温测定法,再加上兼容,直接的样品处理技术,用于护理点。为了阻止病例的潮流并最大程度地提高了早期干预措施的机会,迫切需要在资源不足的地区负担得起,简单的结核病诊断手段。在这里,我们将重组酶聚合酶扩增(RPA)与CAS13A和CAS12A相结合,以创建两个并行的单锅测定,它们检测MTB的两个保守元素(IS6110和IS1081)和一个内部对照人类DNA。这些测定显示与横向流相兼容,并且很容易冻干。我们的最终测定在痰液中的各种细菌载荷(10 5至10 2 CFU/mL)上表现出敏感性。对于M. Bcg的M. Bovis bcg的M. BCG,测定法检测限为69.0(51.0 - 86.9)CFU/ML的MTB菌株H37RV为MTB菌株H37RV和80.5(59.4 - 101.6)CFU/ML。我们的测定法没有针对广泛的细菌/真菌分离株的交叉反应性。对13个盲痰样品的临床测试显示,与培养物相比,100%(6/6)的灵敏度和100%(7/7)的特异性。我们的测定法在临床样品中表现出与微生物黄金标准,结核病培养以及对核酸最先进的GenExpert MTB/RIF Ultra的敏感性。这项技术以快速且强大的格式简化了从样品提取到测定读数的诊断,这使其成为结合放大和检测的第一个测试,同时与横向流动和冻干兼容。