我们国家军人及其家人面临的最大挑战之一是每隔几年就要在全国各地,有时甚至世界各地之间迁移。陆军在军营内建造设施时采用标准设计,以帮助减少军人及其家人在永久调动驻地期间可能遇到的压力和不确定性。这有助于在军营内建立一种熟悉感。儿童发展中心可能是军营内最重要的设施之一,也不例外。莱文沃斯堡目前正面临空间短缺的问题,无法满足军人家庭的儿童保育需求。该军营已委托美国陆军工程兵团堪萨斯城地区分部建造一座新的 37,000 平方英尺的儿童发展中心,可容纳 300 多名儿童,年龄从婴儿到 5 岁不等。堪萨斯城地区建筑和室内设计主管 Carissa Brown 说:“莱文沃斯堡需要(一个新的儿童发展中心)已经有一段时间了。” “我们帮助他们为儿童保育需求提供了解决方案。”尽管该设施采用标准设计,但堪萨斯城地区的团队面临着几个独特的挑战。该设施的所在地位于堪萨斯大道和爱荷华大道之间汉考克大道东侧的两条小溪和一条主干道附近。这导致了一些岩土和土木工程方面的挑战,团队渴望提供解决方案。此外,专门用于儿童保育的设施需要独特的安全和保障考虑。“设计中有很多非常独特的挑战,超出了我们通常看到的范围,”该项目的室内设计师兼技术负责人克里斯蒂娜·盖特伍德 (Christina Gatewood) 表示。“我们一直在考虑孩子们可能会做什么,他们将如何在设施周围活动。你真的需要那些保护措施。”尽管在严格的规定范围内工作,团队还是能够将一些设计元素融入最终设计中,希望为使用该设施的儿童和家庭创造更好的体验。“我们的建筑师为门厅设计了一个非常漂亮的入口,”布朗说。 “我们还请一位景观设计师设计了一些非常有趣的彩色铺路,一直铺到入口处……为孩子和家庭在走进设施时创造一些兴趣。”由于新设施是陆军的首要任务,设计团队在整个设计过程中与利文沃斯堡密切合作,以确保满足预期和时间表。每两周举行一次团队会议,让每个人都能聚在一起讨论项目状态并解决任何挑战。在内部,该项目不仅为陆军致力于提高
1. 简介 出血性败血症 (HS) 是经济上最重要的细菌性疾病之一,主要发生在牛和水牛身上。该病是由属于巴斯德氏菌科的革兰氏阴性球杆菌多杀性巴氏杆菌亚种引起的 [1,2]。在印度和非洲,血清型 B:2 和 E:2 分别导致大型反刍动物患上 HS [3],尽管血清型 A:1 和 A:3 也与此有关。感染 HS 的水牛会出现呼吸音、大量流涎、呼吸困难、粘液鼻涕、高烧、食欲不振、烦躁不安、下颌和颈部水肿和发红 [4]。根据第 19 次牲畜普查(2012 年),印度的牛群总数为 2.999 亿头 (http://dahd.nic.in/sites/default/filess/Livestock%20%205_0.pdf)。其中,相当一部分(约 36%,1.087 亿头)是水牛,这使印度成为世界上水牛数量最多的国家。其中近一半(5105 万头)是奶牛,占牛奶总产量的 50% 左右。印度是最大的水牛奶生产国,占世界牛奶总产量的 68% [5]。根据中央邦政府畜牧业部的数据,该邦牛奶产量在全国排名第四(2014-2015 年为 1078 万吨),
高遗传负荷会对种群生存力产生负面影响,并增加对疾病和其他环境压力源的易感性。之前对南非两个非洲水牛 (Syncerus caffer) 种群进行的微卫星研究表明,由于有害等位基因的高频率出现,全基因组遗传负荷很大。本研究评估了这些等位基因在大部分水牛分布范围内的出现情况,它们对雄性身体状况和牛结核病抗性产生负面影响。利用来自 34 个地方(从南纬 25 度到北纬 5 度)1,676 头动物的现有微卫星数据(2-17 个微卫星位点),我们发现了与上述雄性特征相关的整个大陆的微卫星等位基因频率梯度。频率在从南到北的纬度范围内下降(每个位点的平均 Pearson r = -0.22)。频率变化与多位点杂合性变化相一致(调整后的 R 2 = 0.84),与东非相比,南部非洲的杂合性下降幅度高达 16%。此外,在五个连锁位点对上检测到了大陆范围的连锁不平衡 (LD),其特点是雄性有害性状相关等位基因之间存在较高的正位点间关联比例(0.66,95% CI:0.53,0.77)。我们的研究结果表明,早期观察到的性染色体减数分裂驱动系统驱动了大陆范围和基因组范围内的雄性有害等位基因选择,导致频率变化、搭便车效应导致的杂合性降低以及由于雄性有害等位基因在单倍型中同时出现而导致的广泛 LD。所涉及的选择压力必须很高,以防止等位基因频率谱系和单倍型因 LD 衰减而遭到破坏。由于大多数水牛种群是稳定的,这些结果表明,自然哺乳动物种群(取决于其遗传背景)可以承受较高的遗传负荷。
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摘要背景:PGF2α 对于诱导黄体退化至关重要,而黄体退化又会降低孕酮的产生。早期生长反应 (EGR) 蛋白是 Cys2-His2 型锌指转录因子,与细胞增殖、存活和凋亡密切相关。在给予黄体溶解剂量的 PGF2α 后,观察到 EGR1 的快速升高。EGR1 参与许多基因的转录激活,包括 TGFβ1,它在黄体退化过程中起着重要作用。方法:本研究在水牛黄体细胞中进行,旨在更好地了解 EGR1 在 PGF2α 诱导的黄体退化过程中对 TGFβ1 转录激活的作用。培养水牛中期黄体的黄体细胞,并用不同剂量的 PGF2α 处理不同时间。分析了编码孕酮生物合成途径内酶 (3βHSD、CYP11A1 和 StAR)、Caspase 3、AKT 的 mRNA 相对表达以确认黄体溶解事件的发生。为了确定 EGR1 是否通过诱导 TGFβ1 表达参与 PGF2α 诱导的黄体退化,我们使用 CRISPR/Cas9 敲除了 EGR1 基因。结果:本实验确定了黄体细胞中的 EGR1 蛋白表达是否对 PGF2α 治疗有反应。对 EGR1 和 TGFβ1 mRNA 的定量分析显示在 PGF2α 诱导后 12 小时水牛黄体细胞中显著上调。为了验证 PGF2α 通过 EGR1 依赖机制刺激 TGFβ1 表达的作用,我们敲除了 EGR1。用 PGF2α 刺激 EGR1 切除的黄体细胞,观察到 EGR1 KO 不调节 PGF2α 诱导的 TGFβ1 表达。在 PGF2α 处理的 EGR1 KO 黄体细胞中,与维持 12 小时的 PGF2α 处理的野生型黄体细胞相比,Caspase 3 的 mRNA 表达显着增加。我们还研究了 EGR1 对类固醇生成的影响。用 PGF2α 处理的 EGR1 KO 黄体细胞与用 PGF2α 处理的野生型黄体细胞相比,孕酮浓度或 StAR mRNA 表达均无显着差异。结论:这些结果表明,EGR1 信号传导并不是在调节 PGF2α 诱导的 TGFβ1 信号传导以进行黄体溶解中发挥作用的唯一因素。关键词:水牛,黄体,EGR,CRISPR/Cas9,黄体溶解
性别控制技术在家畜生产中具有重要意义,尤其对于快速繁殖的水牛(bubalus bubalis)具有重要意义,本研究以水牛为研究模型。我们已证实整合到小鼠Y染色体上的荧光蛋白可用于小鼠植入前胚胎的性别鉴定。首先,我们优化了增强型绿色荧光蛋白(eGFP)和mCherry外源基因在Neuro-2a细胞、小鼠胚胎干细胞、小鼠胚胎细胞(NIH3T3)、水牛胎儿成纤维细胞(BFF)中的靶向整合效率。结果表明,靶标两侧同源臂长度为800 bp比300 bp或300 bp/800 bp更有效。当细胞补充了 pifithrin-µ(一种抑制 p53 与线粒体结合的小分子)时,BFF 细胞中同源定向修复 (HDR) 介导的敲入也得到了显著改善。250 V 的三个脉冲在 BFF 细胞中产生最有效的电穿孔,并且发现 1.5 µ g/mL 嘌呤霉素是筛选的最佳浓度。此外,利用 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑结合体细胞核移植 (SCNT) 技术成功生成了 Y-Chr-eGFP 转基因 BFF 细胞和克隆水牛胚胎。在第 6-8 代时,Y-Chr-eGFP 转基因 BFF 细胞的生长率和细胞增殖率明显低于非转基因 BFF 细胞;甲基化相关基因 DNMT1 和 DNMT3a 的表达水平相似;然而,与非转基因细胞相比,Y-Chr-eGFP 转基因 BFF 细胞中乙酰化相关基因 HDAC1 、 HDAC2 和 HDAC3 的表达水平显著较高(p < 0.05)。Y-Chr-eGFP 转基因 BFF 被用作 SCNT 的供体,结果表明 eGFP 报告基因适用于胚胎性别的可视化。克隆水牛胚胎的囊胚率相似;然而,与对照相比,转基因克隆胚胎的卵裂率明显较低。总之,我们优化了产生转基因 BFF 细胞的方案,并使用这些细胞作为供体成功产生了 Y-Chr-eGFP 转基因胚胎。