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单平台流式细胞术对 CD34 细胞的体积计数和基于珠子的计数比较
1 英国国家生物标准与控制研究所 (NIBSC) 生物治疗组，Blanche Lane, South Mimms, Potters Bar, Hertfordshire, EN6 3QG，英国 2 美国国家标准与技术研究所 (NIST) 生物系统与生物材料部，马里兰州盖瑟斯堡，20899，美国 3 德国联邦物理技术研究院 (PTB) 医学物理与计量信息技术部，柏林，10587，德国 4 英国国家生物标准与控制研究所 (NIBSC) 生物统计学部，Blanche Lane, South Mimms, Potters Bar, Hertfordshire, EN6 3QG，英国 5 韩国标准与科学研究院 (KRISS) 长度中心，大田，韩国 6 土耳其国家计量研究院 (TUBITAK UME)，盖布泽，土耳其 7 国立医院输血医学系卡尔斯鲁厄，弗莱堡大学附属医院，德国弗莱堡 8 Becton Dickinson，BD Life Sciences，Tullastrasse 8-12, 69126，海德堡，德国 9 蛋白质和细胞分析，赛默飞世尔科技，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆 10 英国干细胞库，英国 11 意大利都灵国家计量研究所 (INRIM) 12 健康科学与创新。LGC Ltd. Queens Road, Teddington, Middlesex, TN11 0LY，英国 13 中国北京市国家计量研究院 (NIM)
流式细胞仪和GMP下的QPCR
我们引入了流式细胞仪和QPCR，以分析细胞疗法和基因治疗产物。在准备监管提交时，我们正在根据良好的制造实践（GMP）运营这些工具。在这里，我们显示了这些分析的一些示例。
用于评估 PD-1 受体占有率的高通量流式细胞术检测：配备高通量采样器 (HTS) 选项的 BD FACSCelesta™ 流式细胞仪的药物发现应用
PMBCs 用 10 µg/mL 固定化 BD Pharmingen™ 纯化 NA/LE 小鼠抗人 CD3 刺激过夜或单独在培养基中培养（未刺激细胞）。未刺激和抗 CD3 刺激的细胞与 BD Pharmingen™ 人 BD Fc Block™ 预孵育，并用 BD Horizon™ BV421 抗人 CD3、BD Horizon™ BUV395 抗人 CD4 和连续两倍稀释液（范围从 0.15 µg/mL 到 10 µg/mL）的 BD Pharmingen™ PE 小鼠抗人 CD279 (PD-1)、克隆 EH12.1 (PE-EH12.1) 染色。结果：A. 来自一位供体的代表性数据显示淋巴细胞上 PD-1 和 CD3 的表达（使用前向和侧向散射进行门控，未显示）。 B. 条形图表示来自六名供体的样本中 CD4⁺（橙色）和 CD8⁺（蓝色）T 细胞亚群中 PD-1⁺ T 细胞的百分比，这些样本用抗 CD3 刺激或未刺激。C. 滴定曲线显示 PE-EH12.1（1.25 µg/mL）的最佳浓度在不同培养条件下对 CD4⁺ 和 CD8⁺ T 细胞亚群产生最高的染色指数。总体而言，结果表明抗 CD3 刺激增加了 CD4⁺ T 和 CD8⁺ T 细胞亚群中表达 PD-1 的 T 细胞百分比，且 CD8⁺ T 细胞上的 PD-1 表达更高。
BD FACSAria 流式细胞仪
比色皿流动池通过凝胶耦合到荧光物镜，以将最大量的光传输到收集光学器件（见图 2）。荧光物镜收集并将三个激光焦点发射的荧光聚焦到各个收集光纤上。然后，收集光纤将发射的光传输到收集光学器件上。收集光学器件经过精心设计，可从每个激光器实现最大量的信号检测。这是通过将最高波长传输到第一个 PMT 并通过一系列长通二向色镜将较低波长反射到下一个 PMT 来实现的。每个 PMT 前面的带通滤光片允许对收集的信号进行微调。由于反射比透射更有效，因此这种设计大大提高了仪器的多色检测能力（见图 3）。
BD FACSCanto II 流式细胞仪参考手册
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