摘要 CRISPR/Cas9 系统已用于在多种物种中通过同源定向修复生成荧光标记的融合蛋白。尽管它取得了革命性的成功,但仍然迫切需要提高研究生物中基因组编辑的简便性和效率。在这里,我们建立了一种简化、高效且精确的 CRISPR/Cas9 介导青鳉 (Oryzias latipes) 内源性蛋白质标记策略。我们使用一种无克隆方法,该方法依赖于 PCR 扩增的供体片段,该片段包含由短同源臂 (30-40 bp) 两侧的荧光报告序列、合成的单向导 RNA 和 Cas9 mRNA。我们生成了八个新的敲入系,具有高效的 F0 靶向和种系传递效率。全基因组测序结果显示仅在目标位点发生单拷贝整合事件。我们对这些融合蛋白系进行了初步表征,大大扩展了青鳉可用的遗传工具库。具体来说,我们表明 mScarlet-pcna 线具有作为增殖区的生物范围标签和内源性细胞周期报告基因的潜力。
补充图 S5。olslc38a4 (SAT) 的消除对青鳉幼虫表型、上皮 Na + 通量和蛋白质表达的影响。 (A),青鳉 Sat 与商用抗 SLC38A4 抗体免疫原肽(针对人类 SLC38A4 的合成肽;序列同源性:74%;ab58785;Abcam Cambridge,英国)的推断序列比对。Western blot 分析 SAT 消除对 Sat 变体蛋白质表达的影响。分别应用了 6 dpf 青鳉幼虫匀浆(从 FW 中的野生型、20‰ SW 中的野生型和 20‰ SW 中的 Sat 变体中收集),并表明商用抗 SLC38A4 抗体可以检测到来自不同青鳉幼虫样本的蛋白质,预期分子量大小约为 56 KDa。 (B) 野生型 (Wt) 和 1 ng SAT MO 注射青鳉胚胎在 20‰ SW 条件下的光学显微镜图像。 (C) 淡水 (FW) 环境下,与野生型和假对照青鳉幼体相比,SAT MO 注射对 6 dpf 青鳉幼体 Na + 通量的影响。值以平均值 ± SD 表示,并使用 Student's t 检验进行比较。当 p < 0.05 时,认为存在显著差异。
1 德国不来梅莱布尼茨预防研究和流行病学研究所 — BIPS,2 德国新勃兰登堡应用技术大学农业与食品科学学院营养学系,3 意大利阿韦利诺国家研究委员会食品科学研究所,4 爱沙尼亚行为与健康科学中心国家健康发展研究所,爱沙尼亚塔林,5 儿童健康研究与教育研究所,斯特罗沃洛斯,塞浦路斯,6 匈牙利佩奇大学医学院儿科系,7 瑞典哥德堡大学萨尔格伦斯卡学院医学研究所公共卫生与社区医学系流行病学和社会医学系,8 瑞典哥德堡大学萨尔格伦斯卡学院临床科学研究所儿科系,9 根特大学公共卫生系,比利时,10 GENUD(生长、运动、营养和发展)研究组,健康科学学院,萨拉戈萨大学,阿拉贡农业研究所 (IA2),阿拉贡卫生研究所 (IIS 阿拉贡),萨拉戈萨,西班牙,11 Centro de Investigacio´n Biome´dica en Red de Fisiopatologı´a de la Obesidad y Nutricion´n (CIBEROBn),马德里,西班牙,12 统计研究所,数学和计算机科学学院,不来梅大学,不来梅,德国
由青枯病菌引起的青枯病是辣椒 (Capsicum annuum) 植物的一种难以控制的疾病。预防青枯病的一种技术是使用拮抗细菌(如荧光假单胞菌和蕈状芽孢杆菌)联合使用。本研究旨在确定荧光假单胞菌 pf-142 和蕈状芽孢杆菌联合使用是否比体外单一使用效果更好。本研究采用完全随机设计 (CRD),共进行四种处理(荧光假单胞菌 pf-142、蕈状芽孢杆菌、荧光假单胞菌 pf-142 + 蕈状芽孢杆菌和对照),重复六次,共计 24 个实验单元。观察指标为青枯病菌的发病症状、致病力、荧光假单胞菌pf-142与蕈状芽孢杆菌复合体对青枯病菌的配伍性及抑菌率。研究发现,青枯病菌对辣椒植株有较高的致病力,可引起辣椒植株萎蔫。荧光假单胞菌pf-142与蕈状芽孢杆菌复合体不产生抑菌圈,说明二者配伍性较好。荧光假单胞菌pf-142与蕈状芽孢杆菌复合体产生的抑菌圈最宽,说明对青枯病菌具有较强的拮抗能力。
摘要:某些次级类胡萝卜素,如虾青素和角黄素,在人类营养、食品、健康和化妆品以及饲料和水产养殖领域具有越来越大的经济价值,特别是因为它们具有多种生物活性,例如其显著的抗氧化特性。本研究致力于评估在光生物反应器中培养从留尼汪岛生物多样性中新分离的 Dysmorphococcus 菌株以生产这些有价值的叶黄素的可行性。结果表明,所有这些菌株都能够在环境压力下产生和积累角黄素和虾青素。其中,一株与其他 Dysmorphococcus 菌株相比,其形态、遗传和生化特性非常有趣,在 3 L 台式光生物反应器中进一步培养,发现其产生的富含类胡萝卜素的生物质浓度最高,产量分别约为 4 g L − 1 dw 和 0.055 g L − 1 d − 1 dw。我们还发现,生物质中含有高达 1.2 mg g − 1 dw 的角黄素和 0.7 mg g − 1 dw 的不同形式的虾青素,主要是虾青素单酯。我们发现这些类胡萝卜素的生产率低于之前报道的其他微藻物种的生产率,我们建议需要进一步优化培养和胡萝卜素生成诱导过程,以提高生产率,并使这种局部分离的 Dysmorphococcus 菌株可用于未来商业化生产天然角黄素和虾青素。
人乳头瘤病毒 (HPV) 疫苗已被证明可有效预防高危 HPV 类型感染,高危 HPV 类型感染可导致六种 HPV 相关癌症的发展。波多黎各 (PR) 采用了强制性 HPV 疫苗接种入学政策,该政策于 2018 年 8 月生效。虽然入学要求被普遍认为是提高疫苗接种率的有效方法,但很少有研究记录其对提高 HPV 疫苗接种率的影响。本研究的目的是评估波多黎各的 HPV 入学政策对 HPV 疫苗覆盖率的影响。我们使用了事前自然实验。研究对象包括 2008-2019 年期间在波多黎各免疫登记处登记的青少年。我们计算了 HPV 疫苗接种率和最新 (UTD) 疫苗覆盖率。我们估计了年龄标准化率 (ASR) 和标准化率比 (95% 可信区间)。共分析了 495,327 名青少年的疫苗数据,其中男性 50.9%,女性 49.1%。政策实施后,2017 年(政策实施前一年)、2018 年和 2019 年 11 至 12 岁青少年的 HPV 疫苗接种率显著增加(分别为 58.3%、76.3% 和 89.8%)。政策实施后,11 至 12 岁青少年的 UTD 覆盖率也有所增加。随着时间的推移,疫苗接种和 UTD 覆盖率的性别差距缩小了;2019 年的 ASR 显示,与 2017 年相比,男性和女性的接种率增加了 19%,UTD 增加了 7%(均显著,p < 0.05)。这项研究表明,在实施入学政策后,PR 的 HPV 疫苗接种率有所提高,并且疫苗接种率的性别差距随着时间的推移而缩小。未来的分析应评估政策如何
警告/注意事项/不良事件:该系统尚未针对孕妇、18 岁以下患者或 70 岁以上患者进行评估。该系统可能会受到心脏设备的影响或产生不利影响。强电磁干扰 (EMI) 源(例如来自电灼术、除颤/心脏复律、治疗性超声、射频 (RF)/微波消融或 MRI)可能会导致严重伤害、系统损坏或系统运行变化。EMI、姿势变化或其他活动可能会引起电击或震动感。接受抗凝治疗的患者术后并发症风险可能更大。将非美敦力组件与该系统一起使用可能会导致美敦力组件损坏、治疗失败或患者受伤。植入材料可能会引起过敏或免疫系统反应。如果可能,医生应在手术前识别和治疗任何感染。植入部位的感染几乎总是需要手术切除植入系统。导线可能会缠绕肠道或刺穿胃部,造成危及生命的阻塞或感染,需要立即就医,也可能需要手术。患者应避免进行可能对植入系统组件造成过度压力的活动(包括突然、过度或反复弯曲、扭曲、弹跳或拉伸,这些活动可能会导致组件断裂或移位)。与治疗、设备或程序相关的不良事件可能包括:感染、手术部位疼痛、设备组件可能磨损皮肤、神经刺激器部位淤青、出血、治疗效果丧失、刺激出现不良变化(描述为颠簸、电击或灼热感)、胃肠道症状和胃肠道并发症(导线可能会刺穿胃部,或者设备组件可能会缠绕或阻塞其他内脏器官,需要手术)。系统可能会因电池耗尽或机械或电气问题而停止运行。任何这些情况都可能需要额外的手术或导致您的症状复发。
接种 Fluzone 疫苗前,请阅读本信息表。本摘要并非旨在取代与您的医疗保健提供者的交谈。如果您有疑问或想要了解更多信息,请与您的医疗保健提供者交谈。什么是 Fluzone 疫苗?Fluzone 是一种有助于预防流感疾病 (flu) 的疫苗。Fluzone 疫苗适用于 6 个月及以上的人群。接种 Fluzone 疫苗可能无法保护所有接种疫苗的人。哪些人不应接种 Fluzone 疫苗?如果您符合以下情况,则不应接种 Fluzone 疫苗:• 曾对鸡蛋或鸡蛋制品产生严重过敏反应。• 接种任何流感疫苗后曾产生严重过敏反应。• 年龄小于 6 个月。如果您或您的孩子在接种流感疫苗后出现或曾经出现过以下情况,请告知您的医疗保健提供者:• 接种流感疫苗后出现格林-巴利综合征(严重肌肉无力)。• 免疫系统出现问题,因为免疫反应可能会减弱。如何接种 Fluzone 疫苗?Fluzone 疫苗以肌肉注射方式给药。 Fluzone 疫苗可能产生哪些副作用?Fluzone 疫苗最常见的副作用是:• 注射部位疼痛、发红、肿胀、淤青和变硬• 肌肉酸痛• 疲倦• 头痛• 发烧这些并不是 Fluzone 疫苗可能产生的所有副作用。请向您的医疗保健提供者咨询其他副作用。如果您担心任何副作用,请致电您的医疗保健提供者寻求建议。您可以拨打 1-800-822-7967 或 http://vaers.hhs.gov 向疫苗不良事件报告系统 (VAERS) 报告副作用。赛诺菲巴斯德公司正在收集怀孕期间接种 Fluzone 疫苗后妊娠结果和新生儿健康信息。鼓励怀孕期间接种 Fluzone 疫苗的女性直接联系赛诺菲巴斯德公司,或让其医疗保健提供者通过 sanofipasteurpregnancyregistry.com 或拨打 1-800-822-2463 (1-800-VACCINE) 联系赛诺菲巴斯德公司。 Fluzone 疫苗的成分是什么?Fluzone 疫苗含有 3 种灭活流感病毒株。其他成分包括甲醛和辛基酚聚氧乙烯醚。防腐剂硫柳汞只存在于 Fluzone 疫苗的多剂量瓶中。
公司C 检测结节、肿块阴影、浸润阴影和气胸,并以从蓝色(低)到红色(高)的渐变颜色显示存在异常区域的可能性(确定性)。检测到的区域的置信度也显示为分数。