1 苏黎世大学成人精神病学和心理治疗系,瑞士苏黎世。2 苏黎世大学精神病学医院儿童和青少年精神病学和心理治疗系,瑞士苏黎世。3 苏黎世大学和苏黎世联邦理工学院苏黎世神经科学中心,瑞士苏黎世。4 苏黎世大学苏黎世综合人体生理学中心,瑞士苏黎世。5 美国纽约州罗彻斯特罗彻斯特大学医学中心精神病学系。6 美国纽约州罗彻斯特罗彻斯特大学医学中心眼科系。7 美国纽约州罗彻斯特罗彻斯特大学医学中心神经科学系。8 美国纽约州罗彻斯特罗彻斯特大学视觉科学中心。9 瑞士苏黎世大学苏黎世大学医院眼科系。 10 瑞士伯尔尼大学医院眼科系。11 美国纽约州曼哈塞特范斯坦医学研究所行为科学研究所。12 美国纽约州纽约市诺斯韦尔健康中心扎克山坡医院精神病学研究部。13 美国纽约州汉普斯特德霍夫斯特拉/诺斯韦尔扎克医学院精神病学系。
因此,我们旨在通过反复进行目标AID的基本构建以及对反馈的评估和验证,以建立高度的技术。 (1)基本技术的构建:首先创建超级目标AID,为了使基因组编辑更有效,我们将创建一个改进的功能目标AID(超级目标AID)。研究主要考虑质粒方面的变化。我们旨在通过使用没有复制能力的瞬态质粒来控制温度敏感启动子和组成启动子的DCAS9和CRISPR-GRNA,使用快速降解酶(LVATAG)[参考2],以及使用抑制DNA修复机制(UGIS)的系统。接下来,我们还将考虑修改酶本身。我们还考虑使用反遗传方法的改进,例如减少CAS9非特异性结合的突变[参考3],增加辅助酶活性的突变[参考4]以及对融合酶的接头长度的修改。 (2)评估基础替代效率:基因组编辑中靶点效应的验证,关键点是如何抑制与目标序列不同的位点的意外诱变,以及如何验证这一点。意外突变包括通过类似于目标序列的靶向序列引入的突变,以及完全独立于序列的非特异性突变。为了验证脱靶,使用破坏RPOB基因的利福平抗药性菌株进行评估。在改进目标基因,培养条件和目标AID的编辑方法的同时,进行了非目标评估,并最终进行了大肠杆菌的整个基因组序列以验证测试。
研究成果の概要(英文):我们已经建立了诺贝尔角质形成细胞菌株,该细胞菌株显示出多能细胞分化。使用DNA谱和干细胞标记分析,该细胞应变与MSC相似。间充质干细胞。EGF,FGF和PDGF对该细胞菌株显示出生长刺激。 在无血清条件下,该细胞菌株显示出多能细胞分化。EGF,FGF和PDGF对该细胞菌株显示出生长刺激。在无血清条件下,该细胞菌株显示出多能细胞分化。
研究成果の概要(英文):在这项研究中,我们试图开发关键技术,以建立一种方法来通过将CRISPR-CAS9,组蛋白修饰识别域和双分子荧光互补(BIFC(BIFC)相结合,以跟踪活细胞中组蛋白修饰的时空动力学。我们测试了一个称为GFP-clamp的新分子,该分子延迟了GFP衍生的荧光蛋白的光漂白,从而增强了活细胞成像的时间分辨率。我们开发了一种使用单链DNA结合蛋白RFA1评估引导RNA的体内功能的方法,该方法可以有效评估CRISPR-CAS系统中指南RNA的功效。
研究成果の概要(英文):心房颤动(AF)是心律不齐的最常见类型,在日本是一个主要的社会问题,因为它经常导致心脏骨骼中风,约占卧床不起的患者的20%。在这项临床试验中,我们发现慢性AF患者的循环线粒体DNA(mtDNA)水平高于健康对照组和阵发性AF患者。使用培养的细胞和小鼠在体外和体内实验,我们证明高频刺激诱导线粒体DNA(mtDNA)作为潮湿,而mtDNA触发了通过TLR9触发炎症反应。这些发现表明mtDNA将代谢应激和炎症联系起来,这有助于房颤的发展和进展(AF)。
研究成果の概要(英文):我提出了一个被动任务范式,以减少与任务相关功能MRI任务执行过程中认知负载的一种方法。我创建了一个实验范式,其任务刺激可用于诊断神经系统疾病,并进行了实际的测量,证明了其可行性。在数据分析中,使用来自队列研究的静止状态功能性MRI数据,1)我基于REM睡眠行为障碍的功能连通性生成了基于机器的疾病分类器,帕金森氏病的前途症状,2),并揭示了痴呆症,帕金森氏病和健康的老年人使用动态功能连接性的网络动态差异。
研究成果の概要(英文):我们决定使用肠道功能障碍作为平滑肌性肌发育模型,并使用CRISPR/CAS9在受精的斑马鱼卵中诱导LMOD1基因的缺失。关于幼鱼中的肠腐蚀性,我们使用了时空映射,该时空映射分析了使用视频减少的排泄物和肠蠕动,以获取有关肠腐蚀性的发现。QPCR表明,除了降低LMOD1A的表达外,其他平滑肌成分ACTA2和MYH11的表达以及参与平滑肌发育的MYOD1,也减少了,表明平滑肌本身的成分降低。已确认。另外,为了跟踪PAX7的行为,我们创建了一个模型,其中插入了GFP基因,并正在尝试跟踪PAX7表达细胞生长的行为。
研究成果の概要(英文):这项研究试图阐明35S启动子序列特异性DNA甲基化的机制,目的是开发一种抗DNA甲基化抗性启动子,从而稳定非模型植物中的外国基因表达。具有各种改良35S启动子序列的单个副本的转基因绅士和烟草植物线,并分析了DNA甲基化。结果证实了35S增强子区域内214个基座的重要性。此外,在烟草中证实了通过转录活性丧失诱导DNA甲基化的诱导,在烟草中,未修饰的35S启动子没有诱导DNA甲基化。这些发现提出了两种物种之间DNA甲基化诱导的常见机制,并为开发DNA甲基化抗药性启动子提供了重要的垫脚石。
研究成果の概要(英文):该项目通过系统的文献综述和行为实验探索了主动感与被动感知的好处。我们的系统评价确定了来自四种不同感觉方式的86项相关研究。我们提取了使我们能够将感知结果与任务细节联系起来的数据,并发现尽管主动感知通常会提高感知准确性,但结果因感觉方式和任务而差异很大。在我们的行为实验中,我们使用了由机器人臂和感觉替代设备组成的2D对象大小估计任务。结果表明,认知参与提高了感知的准确性,但是在主动探索模式和被动模式之间没有显着差异。这项研究还强调了需要改进实验界面以进行更全面的研究。
研究成果の概要(英文):这项研究的重点是在石墨烯中实现稳定的N型掺杂的创新方法,这对于几种高级应用至关重要。在早期阶段,我们使用Photobase Generator(PBG)与UV辐射相结合,提出了一种光诱导的电子掺杂技术,该技术允许精确控制石墨烯中的掺杂和图案,以创建高性能PN连接。此方法表现出高电子迁移率和稳定的掺杂,为在透明电子和温度传感中的应用铺平了道路。在后面,我们通过在紫外线下使用PBG和聚乙烯氧化物(PEO)的混合物来进一步扩展这种方法,以改善石墨烯中N型掺杂的均匀性和长期稳定性。这种混合方法被证明是具有成本效益,可扩展性和稳定性超过160天的,克服了先前的局限性,并证明了在热电设备中实用应用的潜力。