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环境管理司令部 (CG-47) 审查了本司令部指令及其所包含的一般政策,并确定本政策属于国土安全部 (DHS) 分类排除 A3。本司令部指令不会导致现有环境条件发生任何重大变化,也不会违反任何与环境保护有关的适用联邦、州或地方法律。行动提议者有责任评估本政策产生的所有未来具体行动是否符合《国家环境政策法》(NEPA)、其他适用的环境要求和美国海岸警卫队环境规划政策 COMDTINST 5090.1(系列)。
此预印本版的版权持有人于2023年9月18日发布。 https://doi.org/10.1101/2023.09.14.557734 doi:Biorxiv Preprint
图 6. CD4 与 CD8 T 细胞比例的保持。通过流式细胞术鉴定 CD4 和 CD8 T 细胞。非电穿孔细胞(条件 0)在活细胞、单个细胞和未转染细胞(TCRαβ + )上进行门控,而电穿孔细胞在活细胞、单个细胞和敲除细胞(TCRαβ – )上进行门控。非电穿孔细胞与使用 Neon 系统(100 µL)和 CTS Xenon 系统(1 和 9 mL)电穿孔的细胞之间的 CD4(深蓝色)和 CD8(浅蓝色)T 细胞比例基本保持一致。
Gibco™ CTS™ Xenon™ 电穿孔仪器 Cat. No. A50301 建议细胞浓度 20 x 10⁶ 至 100 x 10⁶ 细胞/mL 电穿孔体积 1 mL; 5–25 mL 电穿孔室容量 1 mL 5–25 mL 电穿孔体积的运行时间 7–22 分钟 电穿孔脉冲电压范围 500–2,500 V 电穿孔脉冲宽度范围 1–30 ms 电穿孔脉冲间隔范围 500–1,000 ms 电穿孔脉冲数 1–10 支持 21 CFR 第 11 部分合规性 是,可进行软件升级(请咨询) 开放平台通信 - 统一架构 (OPC-UA) 兼容性 是 云连接实用程序 是 细胞搅拌器转速 60 rpm 预冷技术 Peltier 预冷温度设定范围 10–30°C 尺寸(高 x 宽 x 深),门完全打开时 43.1 x 26.5 x 21.2 英寸(109.5 x 67.4 x 53.9 厘米) 重量 154.3 磅(70 千克) 电气额定值 100–240 V, 1,200 VA 触摸显示屏 8 英寸电容式
* 对于不想将 FBS 与静息原代 T 细胞一起使用的用户,建议使用以下培养基成分:CTS OpTmizer T 细胞扩增 SFM(货号 A1048501)+ 2.6% CTS OpTmizer T 细胞扩增 SFM 补充剂 + 5% CTS 免疫细胞血清替代品 (SR)(货号 A2596101)+ 3% GlutaMAX 补充剂(货号 35050061)+ IL-7 和 IL-15。
创建 Connect 平台帐户 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 将仪器链接到 Connect(仅限管理员) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 将仪器连接到互联网 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 创建 PIN 码 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 从仪器生成链接代码 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ...
抽象背景胰腺癌(PC)是一个充满挑战的诊断,尚未受益于免疫肿瘤治疗的进步。不可逆的电穿孔(IRE)是一种非热消融的方法,用于治疗精选的局部可切除的不可切除的PC的患者,并增强了某些免疫疗法的作用。酵母衍生的颗粒β-葡聚糖会诱导训练有素的先天免疫,并成功减轻了鼠PC肿瘤负担。这项研究检验了以下假设:IRE可以增强β -Glucan在PC治疗中诱导训练的免疫力。方法β-葡萄糖训练的胰髓样细胞在暴露于消融和未灭绝的肿瘤调节培养基后的训练有素的反应和抗肿瘤功能。β -Glucan和IRE组合疗法在野生型和抹布 - / - 小鼠的原位鼠PC模型中测试。肿瘤免疫表型。与IRE结合使用以治疗PC。通过质量细胞仪评估IRE后PC服用口服β-葡聚糖患者的外周血。结果开发的肿瘤细胞引起了受过训练的训练反应,并增加了抗肿瘤功能。在体内,β-葡聚糖与IRE结合减少的局部和远处肿瘤负担延长了鼠的原位PC模型。这种组合增强了对PC肿瘤微环境的免疫细胞浸润,并增强了肿瘤浸润的髓样细胞的训练反应。这种双重疗法的抗肿瘤作用与适应性免疫反应无关。此外,口服的β-葡聚糖被确定为诱导鼠胰腺中训练有素的免疫力的替代途径,并与IRE结合使用了PC的长期生存。β -Glucan在体外治疗中还诱导了从接受治疗的PC患者获得的外周血单核细胞中受过训练的免疫力。最后,发现口服的β-葡聚糖会显着改变五名患有III期III期患者的外周血中的先天细胞景观。结论这些数据突出显示了在
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