对于角膜缘干细胞缺乏症 (LSCD) 患者,体外扩增的人角膜缘上皮细胞 (HLEC) 移植可恢复角膜表面的结构和功能完整性。然而,HLEC 的培养和移植方案差异很大,大多数方案中都使用霍乱毒素、外源性生长因子、激素和胎牛血清等生长添加剂。本文首次比较了在含有胎牛血清的复合培养基 (COM) 中培养的人羊膜 (HAM) 上的人角膜缘上皮细胞 (HLEC) 和在仅添加人血清作为生长添加剂的培养基 (HSM) 上的培养情况,并报告了我们对在自体 HSM 中扩增并用于 LSCD 患者移植手术的 HLEC 的首次研究。利用全基因组微阵列、RT-PCR、Western印迹法对扩增的HLEC进行检测,并评估其细胞活力、形态、免疫组化标志物表达和集落形成效率。在HSM中培养HLEC可产生多层上皮,其中在基底层检测到了与LESC相关的标志物细胞。在HSM和COM中培养的细胞之间转录差异很小,细胞活力相当。与LESC相关的p63基因在HSM中的表达量是COM的3.5倍,Western印迹法证实HSM培养物中p63a带更强。角膜特异性角蛋白CK12在两种培养条件下的发现量相同,但HSM中的CK3阳性细胞明显更多。 LSCD 患者移植手术后,HAM 上皮片中残留的细胞表现出中心上皮特征,在生长停滞的成纤维细胞上低密度培养的分离细胞产生的克隆包含 21.12% 的 p63a 阳性细胞(n = 3)。综上所述,不含动物来源或动物细胞培养物来源的生长添加剂,仅以人血清作为单一生长添加剂的培养基,可以作为 HAM 上 HLEC 体外扩增常用复合培养基的等效替代品。2012 Elsevier Ltd. 保留所有权利。
1眼疾病系,I.M.Sechenov第一莫斯科州立医科大学,8-2,Trubetskaya Street,119991,俄罗斯莫斯科,俄罗斯2号病理学部,眼科培养基,克拉斯诺夫眼科疾病研究所,11a Rossolimo St.,俄罗斯莫斯科,119021,119021,俄罗斯3 R&D Dempption,3 R&D Dempption,Imtek ltd.1 15a,3rd.,3rd.俄罗斯莫斯科; spdomo@gmail.com 4科尔佐夫发育生物学研究所俄罗斯科学学院,26,Vavilova St.,Vavilova St.,119334,俄罗斯,俄罗斯5号,俄罗斯5号眼科基础研究实验室,Krasnov眼疾病研究所,Krrossolimo St.院士院士的心脏病学中心E.I.俄罗斯联邦卫生部Chazov,Academika Chazova St.,15A,121552莫斯科,俄罗斯7个细胞止血和血栓形成实验室,DMITRY ROGACHEV国家医学研究中心,儿科血液学和免疫学,癌症和免疫学eosidak@gmail.com
标准安装 3/4 英寸计量家用服务(单一设置) 供水服务安装 标准安装 1 英寸计量家用服务 预制仪表坑详图 水质入口详图 入口/雨水管安装详图 典型街道横截面,无路缘 典型街道横截面,有路缘 典型铺装路段,乡镇街道 典型铺装路段,停车场 典型沥青路面修复详图 铺装凹槽详图 路缘终点 普通水泥混凝土路缘 斜面混凝土路缘详图 路面基层排水沟 凹陷路缘详图 典型车轮挡板布局,90° 停车 _ 90° 停车详图 典型车轮挡板布局,60° 停车 预制混凝土车轮挡板 90° 残疾人停车位详图 单个残疾人停车位详图 残疾人停车位标记 沥青步行区 混凝土人行道方向箭头 树木种植和放样方法 常绿树种植和放样方法 灌木种植方法
o 标明所有需要我们审核和批准的路权和停车设施(无论是拟议的还是现有的)的尺寸。尺寸应包括长度、宽度、高度、人行道上方的垂直间隙以及与路缘线的距离 o 以每英尺 1/8 英寸或每英尺 1/10 英寸的最小比例绘制 在平面图上标明 § 14-301(9)(b)(露天停车场和停车场)或 §14-804(自行车停车场)的哪些部分需要街道部门批准。所有车道路缘切口,相对于路缘线,均标明尺寸(宽度)并标记为“拟议”或“现有”。所有无信号路缘切口将按照标准细节 SC0105(标准车道细节)进行设计和建造 为所有路缘切口提供转弯平面图,清晰显示所有行车道和停车车道。提供一份完整的 PennDOT 表格 M-950S(车道视距测量)副本,并在分区规划图上显示计算出的视距三角形,用于规划图上显示的所有路缘切口(现有或拟议,在城市或州路线上)。根据标准细节 PP0101(道路符号和缩写标准)提供道路信息
图 2:(a) 距板边缘的距离 (mm) vs 板应力 (MPa);(b) 距翼缘的距离 (mm) vs 翼缘应力 (MPa);(c) 距板与腹板连接处的距离 (mm) vs 腹板应力 (MPa)。(Hu and Jiang 1998)
进场/停车 位于 3116 SE 11th Ave 的路边。请注意,11th Ave 是一条向南的单行道。请在提前过程中与您的制作经理确认您的停车需求,他们将为您保留适当的空间。进场需要上一个路缘(路缘坡道可用),短距离、平坦地穿过舞台门,直接进入舞台左侧。没有楼梯或电梯。
骨骼发育始于未分化的间充质细胞的凝结,这些细胞为原始中的未来骨骼树立了框架。在内侧软骨途径中,凝结内的间充质细胞分化为SOX9依赖性机制中的软骨细胞和细胞细胞。然而,凝结外的间充质细胞的身份以及它们如何参与开发骨骼的身份仍然没有固定。在这里我们表明,凝结围绕的中囊细胞有助于软骨和peri骨,可稳健地产生骨细胞,成骨细胞和骨髓基质细胞,在发育中的骨骼中。E11.5处PRRX1-CRE标记的肢体间充质细胞的单细胞RNA-seq分析表明,Notch效应子HES1以相互排他性的方式表达,Sox9在前凝结中表达。分析Notch信号传导报告基因CBF1:H2B-Venus表明邻二碳的间充质细胞在缺口信号传导中活跃。使用HES1-creer确定的在E10.5时Sox9 +凝结周围的HES1 +早期间质细胞的在E13.5处有助于软骨和per骨,随后成为生长板软骨细胞的生长板和细胞的细胞,并在E13.5处有助于软骨和cor骨的细胞,并在e13.5处有助于软骨和细胞的细胞,并在e13.5处有助于,并在e13.5上有助于。骨头。 相比之下,HES1 +在E10.5时Sox9 +凝结周围的HES1 +早期间质细胞的在E13.5处有助于软骨和per骨,随后成为生长板软骨细胞的生长板和细胞的细胞,并在E13.5处有助于软骨和cor骨的细胞,并在e13.5处有助于软骨和细胞的细胞,并在e13.5处有助于,并在e13.5上有助于。骨头。 相比之下,HES1 +在E13.5处有助于软骨和per骨,随后成为生长板软骨细胞的生长板和细胞的细胞,并在E13.5处有助于软骨和cor骨的细胞,并在e13.5处有助于软骨和细胞的细胞,并在e13.5处有助于,并在e13.5上有助于。骨头。相比之下,HES1 +