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在 CHO 细胞中有效 CRISPR/Cas9 介导的 BAX 基因消融可损害细胞凋亡并增强重组蛋白的产生
背景：尽管最近利用 CHO 细胞生产重组生物治疗药物取得了进展，但其生产率仍低于工业需求，主要是由于细胞凋亡。目的：本研究旨在利用 CRISPR/Cas9 技术特异性破坏 BAX 基因，以减轻产生促红细胞生成素的重组中国仓鼠卵巢细胞的细胞凋亡。材料和方法：使用 STRING 数据库识别要通过 CRISPR/Cas9 技术修饰的关键促凋亡基因。设计针对已识别基因 (BAX) 的单向导 RNA (sgRNA)，然后用载体转染 CHO 细胞。随后，研究了操纵细胞中 Bax 基因表达的变化以及随之而来的促红细胞生成素产生率，即使在存在凋亡诱导剂橄榄苦苷的情况下也是如此。结果：BAX 破坏显著延长了细胞存活率，并增加了操纵克隆的增殖率（152%，P 值 = 0.0002）。该策略将操纵细胞中的 Bax 蛋白表达水平降低了 4.3 倍以上（P 值 <0.0001）。与对照组相比，Bax-8 操纵细胞对压力和结果凋亡表现出更高的阈值耐受性。此外，在橄榄苦苷存在的情况下，它们与对照组相比表现出更高的 IC50（5095 µM.ml -1 Vs. 2505 µM.ml -1 ）。我们发现，与对照细胞系相比，即使存在 1,000 µM 橄榄苦苷，操纵细胞中的重组蛋白生产水平也显著增加（p 值 = 0.0002）。结论：CRISPR/Cas9 辅助 BAX 基因消融有望通过工程化抗凋亡基因来改善 CHO 细胞中的促红细胞生成素产生。因此，有人提出利用 CRISPR/Cas9 等基因组编辑工具来开发宿主细胞，从而实现安全、可行、稳健的制造操作，且产量满足工业要求。
针对colletotrichum物种的新物种特定的实时PCR测定
摘要：苹果的苦腐是由不同的Colletotrichum物种引起的一种经济重要的全球疾病，具体取决于许多因素，例如气候，地理，其他宿主和作物管理实践。培养，形态和基于单位液测序的方法用于识别Colletotrichum物种的有效性受到严重限制，而可用于描述物种的多核序列分型方法是昂贵，时间密集的，并且需要高专业知识。我们开发了以下九种coltotrichum物种的物种特异性水解探针实时PCR分析，在美国中大西洋中引起苦腐腐烂。来自阿司霉菌物种复合物的若虫。在搜索14个基因区域后，我们在其中5个目标物种中设计了底漆和探针。四个引物 - 探针套装对被复式。灵敏度测试显示出可检测到0.5 pg DNA。这些实时PCR分析将对这些关键的Colletotrichum物种提供快速而可靠的识别，对于旨在阐明其生物学，流行病学和管理苹果的研究至关重要，因为在美国生产和消耗的树木水果。
赢 24
过去二十年来，我们在欧洲的自由生活方式已成为过去。战争、虚假信息、对决策者的操纵以及国内外威胁都旨在破坏我们的自由与和平——无论是通过违反国际法对乌克兰发动侵略战争、试图破坏民主国家稳定，还是在网络空间或我们的贸易路线上发动攻击。日复一日，我们被提醒，和平与自由不是免费的。这就是为什么我们需要有韧性的社会和强大的武装部队，具备作战能力，以便我们能够应对各种威胁局势。我们的武装部队、安全组织和社会的领导人必须具有创造性、敏捷性和灵活性，以便在这些真正的威胁局势中比对手具有认知优势。在这种情况下，兵棋推演具有实际意义，并提供了在安全失败环境中从我们自己的感知中学习的机会，不要害怕我们自己行动的后果，而是在心理上面对它们。这增强了我们自身的韧性。此外，兵棋推演可以在安全的环境中对复杂的军事挑战进行批判性反思，同时也提供亲身体验底层指挥、控制和决策过程的机会。这些经验加速了决策过程，提高了适应性，从而有助于应对紧急情况。获得这些经验是普鲁士军官格奥尔格·冯·赖斯维茨在 200 年前开发了我们熟悉的现代普鲁士“Kriegsspiel”作为所有兵棋推演的原始原型的原因之一。这就是为什么我们也想通过今年的北约兵棋推演倡议来纪念这一重大事件 200 周年。今年的德国联邦国防军教育和培训大会也将纪念这一事件，重点是针对高度战备状态和强大民主的德国联邦国防军进行基于游戏的学习。这加强了人们的认识，即我们的社会只有共同努力才能抵御当前对我们的自由与和平的攻击。两项活动的结合为您提供了体验基于游戏的学习、严肃游戏和战争游戏各个方面的机会，以促进武装部队、学术界和社会之间的交流，并以此方式为这种创新学习方法的持续发展做出贡献。战争游戏促进了战略思维，从而加强了德国联邦国防军、伙伴国家和北约的战略文化，这与 2024 年北约战争游戏倡议的主题一致：“为北约而战：走向共同文化”。
6,7-二甲氧基二氢香豆素化合物，来自乙酸乙酯提取物
Dysoxylum 属具有多种次生代谢产物。对该属各种物种的研究一直在增长，并产生了具有有趣结构和活性的化合物，到目前为止，已报道了许多萜类化合物、色满生物碱、柠檬苦素类、倍半萜、黄酮类、类固醇、原柠檬苦素类和硫的化合物。这非常有趣。具有多种次生代谢产物的 Dysoxylum 属物种之一是 D. alliaceum 。本研究的目的是获得 D. alliaceum 树皮的次生代谢产物。将 D. alliaceum 树皮依次用正己烷、乙酸乙酯和甲醇浸渍。采用各种色谱技术分离和纯化乙酸乙酯提取物，并使用紫外、红外、核磁共振和质谱等光谱方法进行表征，并通过薄层色谱分析指导获得化合物 6,7-二甲氧基二氢香豆素和拟议的生物合成。根据光谱数据的解释并与先前研究的光谱数据进行比较，确定了这些化合物的化学结构。对 P-388 MTT 白血病细胞的细胞毒活性测试获得 IC 50 为 39.210 g/mL，并被宣布为无活性。
战争游戏的认识论
这些复杂性并不能免除人类做出决策的责任——这些决策是艰难的——旨在引导他们的组织在战役中取得成功，无论是在战场上还是在五角大楼的大厅里。思想必须事先做好准备，既要有一般的、受过教育的功能，也要有对他们所面临的冲突和竞争环境的具体、复杂的理解。这种准备必须以内化关于冲突环境的“有效”知识为前提。获得这种知识的方法有很多：研究历史和理论、实践经验以及接触各种研究和分析的结果。这些发展知识的方法都有自己特定的认识论——正式地说，是一种“关于知识的性质和基础的理论，特别是关于知识的局限性和有效性的理论”，或者更实际地说，是区分错误和真理的规则。兵棋推演是一种独特且具有历史意义的工具，几个世纪以来，战士们一直使用它来帮助他们了解战争的总体情况以及即将发生的具体行动的性质。兵棋推演的重要性要求我们认真审视它所产生的知识的性质。
利用环境 DNA 了解美国新墨西哥州苦湖国家野生动物保护区内四种濒危水生物种的分布情况
摘要：环境 DNA (eDNA) 有可能在稀有和濒危水生物种调查中发挥重要作用。eDNA 采样是一种非侵入性技术，对于难以调查的小型隐蔽物种，它可能是一种比传统技术更可行、更有效且更便宜的替代方法。我们使用 eDNA 调查了美国新墨西哥州查韦斯县苦湖国家野生动物保护区的 5 种濒危春季特有物种。2018 年 7 月对泉水中的 40 个水样进行了评估，以确定其中是否存在 Gambusia nobilis、Gammarus desperatus、Juturnia kosteri、Pyrgulopsis roswellensis 和 Assiminea pecos 的残留 DNA。我们在 50% 的地点检测到了 G. nobilis 的 eDNA，在 42.5% 的地点检测到了 J. kosteri 的 eDNA，在 27.5% 的地点检测到了 P. roswellensis 的 eDNA，在 20% 的地点检测到了 G. desperatus 的 eDNA，但在任何地点均未检测到 A. pecos eDNA。我们还研究了影响这些濒危物种占用模式的栖息地条件，并制定了栖息地参数阈值，以指导保护决策。盐度和溶解氧影响 G. desperatus 、 P. roswellensis 和 J. kosteri 的样本占用率，但只有溶解氧影响 G. nobilis 的样本占用率。结果强调了使用 eDNA 监测 5 种春季特有物种中的 4 种的有效性，并深入了解了每种物种的栖息地偏好，这将有助于推动保护活动。关键词：濒危物种·eDNA·占用·湿地·软体动物·鱼类
![趋势交易策略 [PDF]](/simg/a\ae177bd652284616b1e8ff51a81c5e4038126a61.webp)
趋势交易策略 [PDF]
图表形态也能让人一窥趋势，它们可以成为趋势交易的有效工具。例如，三只黑乌鸦和三只白兵蜡烛形态就是延续形态的例子，因为它们往往预示着当前趋势将继续。同样，其他图表形态，如高位紧旗形态和 ABC 相关形态，可以提示当前趋势如何，并给出如何利用这些趋势的规则。
密苏里州伦纳德伍德堡 - 美国陆军驻地
四旬斋、圣周、复活节安排 社区复活节日出礼拜将于 4 月 9 日上午 7 点在士兵纪念礼拜堂举行。 四旬斋、圣周和复活节的其他宗教仪式包括为天主教徒举办的十字架苦路，从本周五晚上 6 点开始，3 月 17 日、24 日和 31 日也在士兵纪念礼拜堂举行，随后在 590 号楼举行无肉聚餐。此外，为天主教徒举办的四旬斋忏悔仪式包括十字架苦路和忏悔仪式，3 月 10 日下午 6 点在士兵纪念礼拜堂举行；棕榈主日弥撒于 4 月 2 日上午 9 点在士兵纪念礼拜堂和下午 1 点在主哨所礼拜堂举行；圣周四弥撒于 4 月 6 日下午 6 点在士兵纪念礼拜堂举行；耶稣受难日弥撒于 4 月 7 日下午 6 点在士兵纪念礼拜堂举行； 4 月 9 日上午 9 点在士兵纪念教堂举行复活节弥撒，下午 1 点在主哨所教堂举行。新教耶稣受难日礼拜将于 4 月 7 日中午在士兵纪念教堂举行。详情请致电 573.596.2127。