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cow-pea(Vigna unguiculata)是豆科植物的主食,遍布撒哈拉以南非洲和其他热带和亚热带地区。考虑到预计的气候变化和全球人口增加,Cowpea对炎热气候的适应,对干旱的抵抗力以及固氮功能使其成为面临未来挑战的特别有吸引力的农作物。尽管有这些有益的特征,但由于其对转变和较长的再生时间的重现,cow豆的有效品种的改善在cow豆方面具有挑战性。瞬态基因分析分析可以提供解决方案来减轻这些问题,因为它们允许研究人员在投资时间和资源密集型转型过程之前测试基因编辑结构。在这项研究中,我们开发了一种改进的cow豆原生质体隔离原质量,一种瞬态原生质体测定和一种农业透明测定法,用于初始测试和验证基因编辑构建体和基因表达研究。为了测试这些促销,我们评估了使用聚乙烯糖(PEG)介导的透明二糖(PEG)介导的二苯乙烯(PEG)介导的CRISPR-CAS9构建体的疗效,该序列用拟苯乙烯溶剂酶(PDS)作为靶基因,并用聚乙烯介导的透射率(PEG)介导的透射率。sanger测序从转化的原生质体和农业灌注的cow豆叶子对DNA进行了测序,在目标序列中显示出几个大的缺失。本研究中开发的原生质体系统和农业过滤协议提供了多功能工具来测试基因编辑组合,然后启动植物转化,从而提高了使用活性SGRNA并获得所需的编辑和目标表型的机会。
