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通过定向能量沉积制造的耐磨性提高的功能梯度材料
摘要 保护部件免受磨损和腐蚀是延长其使用寿命的常用方法。这可以通过在部件上涂覆硬面材料来实现。常见的涂层由碳化钨或钴铬合金（也称为司太立合金）等材料组成。硬面材料可以通过等离子焊接或激光熔覆等焊接方法沉积。基材到硬面层的离散变化会导致裂纹和碎裂。研究表明，当使用功能梯度材料在基材和硬面之间建立平滑过渡时，开裂风险会降低。文献中已经知道从奥氏体钢到钴铬合金的等级。然而，没有关于奥氏体-铁素体双相钢作为基材的知识。因此，本研究旨在证明采用新方法从双相钢到钴铬合金的功能梯度材料的可行性。通过使用基于粉末的定向能量沉积，可以增材制造具有平滑材料过渡的梯度材料。通过金相学检查开裂和孔隙率。使用显微硬度测量以及能量色散X射线光谱和X射线荧光分析化学成分来验证构建策略。
技术 - 海军研究实验室
永磁材料 声学匹配场处理 脉冲 X 射线照相术 氮化镓晶体管开发 经济性和可持续性 伽马射线照相术 断裂力学原理 分子结构分析和诺贝尔奖 合成润滑剂 海军用聚四氟乙烯 定量 X 射线荧光分析 改进的锅炉水处理 断裂试验技术 半绝缘砷化镓晶体 离子注入冶金术 氟化网络聚合物 磁性材料和半导体技术 低太阳吸光度船用涂料 快速固化防腐涂料 顶部伪装和防滑甲板涂料 高温防滑甲板 空间研究与技术 首次探测到太阳的远紫外光谱 首次探测到来自太阳的 X 射线 维京探空火箭计划 先锋计划 — 火箭先锋计划 — Minitrack 和空间监视先锋计划 — 卫星和科学 X 射线天文学太阳辐射 (SOLRAD) I 美国第一颗作战情报卫星 TIMATION 和 NAVSTAR GPS 高层大气遥感星载太阳日冕仪海事领域意识深空计划科学实验 (Clementine) 光波长干涉测量战术卫星自主系统龙眼无人系统氢燃料电池
干细胞研究-ISCIII
行为（图1 b），它们对碱性磷酸酶活性呈阳性（图1 c）。我们确定了八个培养通道后通过RT-PCR清除载体和外源重编程因子基因（图1 D）。还通过RT-PCR评估了多能相关转录因子Oct4，Sox2，Klf4，Nanog，Cripto和Rex1的内源性表达（图1 e）。免疫荧光分析表明，转录因子Oct4，Nanog，Sox2和表面标记物SSEA3，SSEA4，TRA1-60和TRA1-81多能ES细胞的特征（图1 f）。多能相关基因，Oct4和Nanog的启动子，在原始纤维细胞中重大甲基化的N44SV.5线几乎被脱甲基，这表明表观遗传重编程至多能性（图1 g）。IPSC系列已适应了无馈物培养条件，并在二十多个培养通道后显示出正常的核型（46，XY）（图1 h）。我们还通过DNA填充分析来确认，N44SV.5是源自原始细胞的（图1 I）。最后，使用基于胚胎的身体在体外测试了生成的IPSC线分化为三个胚芽层（内膜，中胚层和外胚层）的能力（图
针对嵌合G250的新型DNA疫苗可有效抑制体内肿瘤
摘要。– 目的：开发一种基于G250抗原的DNA疫苗进行肿瘤免疫治疗的有效方法，并研究其对肾细胞癌小鼠的抗肿瘤反应。材料与方法：通过PCR制备人、猴和小鼠的G250。通过整合三个物种的不同基因片段获得异源嵌合G250基因。然后将嵌合G250插入真核表达质粒pVAX1-IRES-GM/B7，获得可同时表达嵌合G250抗原和免疫佐剂的DNA疫苗（命名为pVAX1-tG250-GM/B7）。通过转染Cos7细胞，使用流式细胞术和免疫荧光分析检测嵌合G250抗原的表达。体内免疫应答及抗肿瘤保护作用评价。结果：经PCR及基因测序鉴定，重组质粒DNA疫苗构建成功，嵌合G250抗原在Cos7细胞中得到良好表达，ELISPOT及ELISA检测发现pVAX1-tG250-GM／B7能引起强烈的免疫应答，接种pVAX1-tG250-GM／B7、balb／c小鼠肿瘤抑制明显，且生存时间较对照组延长。结论：本实验结果表明，基于异源嵌合抗原的DNA疫苗能在体内产生有效的抗肿瘤作用，是一种很有前途的肿瘤免疫治疗策略。
腐蚀抗菌性能的研究......
摘要：本文致力于研究熔炼的锭、由其轧制的板材以及由此产生的由耐腐蚀316L钢制成的球形粉末，其中添加了0.2wt.％和0.5wt.％的Ag。研究了抗菌性能、微观结构和银浓度分布，并对银含量进行了定性分析。锭的最佳均匀化退火方式为1050 ◦C，持续9小时，从而形成奥氏体组织。结果表明，添加少量银不会影响奥氏体组织的形成，银均匀分布在锭的整个体积中。轧制后的板材也以奥氏体结构为主。银均匀分布在板材的整个体积中。值得注意的是，添加 0.2 wt.% 的银不会影响钢的强度、伸长率和显微硬度，而添加 0.5 wt.% 的银不会显著降低钢的强度，但所有样品均符合 ASTM A240 标准的机械特性。通过 X 射线荧光分析方法确认了耐腐蚀钢样品的定性化学成分。通过能量色散分析法，确定了银在整个粉末颗粒体积上的均匀分布。颗粒呈球形，缺陷数量最少。平板和粉末的抗菌活性研究表明，在添加0.2wt.％和0.5wt.％Ag的2号和3号样品中存在明显的抗菌效果（对野油菜黄单胞菌属细菌、胡萝卜软腐欧文氏菌、边缘假单胞菌、密歇根棒状杆菌）。
基于 CRISPR/Cas9 核糖开关的克氏锥虫基因表达下调方法
在最近引入 CRISPR/Cas9 技术进行基因敲除、基因敲入、基因补充和内源基因标记之前，很少有基因工具可用于研究克氏锥虫。核糖开关是天然存在的自裂解 RNA（核酶），可被配体激活。我们实验室最近的研究结果证明了枯草芽孢杆菌中的 glmS 核酶可用于布氏锥虫的基因沉默，该核酶已被证明可控制响应外源葡萄糖胺的报告基因表达。在这项工作中，我们使用 CRISPR/Cas9 系统用活性（glmS）或非活性（M9）核酶对克氏锥虫糖蛋白 72（TcGP72）和液泡质子焦磷酸酶（TcVP1）进行内源性标记。通过 PCR 确认基因标记，并通过蛋白质印迹分析验证蛋白质下调。通过免疫荧光分析和体外生长定量进行进一步的表型表征。我们的结果表明，该方法成功地抑制了两种基因的表达，而无需培养基中的葡萄糖胺，这表明克氏锥虫在正常生长条件下产生足够水平的内源性葡萄糖胺 6-磷酸来刺激 glmS 核酶活性。该方法可用于敲除克氏锥虫中的必需基因并验证这种寄生虫中的潜在药物靶点。
FA靶向磁性纳米复合材料的制备及应用
大部分鼻咽癌患者确诊时已为晚期，同步放化疗是该类患者的主要治疗方法，但该方法具有多种副作用。为了提高鼻咽癌放化疗的疗效并减少其副作用，我们构建了一种多功能叶酸（FA）靶向磁性纳米复合材料，该复合材料同时载有组织因子通路抑制剂-2（TFPI-2）和顺铂（CDDP）。这种新型纳米复合材料（FA-MNP/CDDP/TFPI-2）是由含有TFPI-2质粒的FA-甲氧基聚乙二醇-聚乙烯亚胺（FA-MPEG-PEI）与负载CDDP的醛基海藻酸钠修饰的磁性纳米粒子经酰胺化和静电吸附得到的。透射电子显微镜（TEM）图像显示单个磁铁矿粒子核心的尺寸约为11.5纳米。利用核磁共振(NMR)光谱和紫外(UV)分光光度法对纳米复合材料的结构和组成进行鉴定和分析。荧光分析、普鲁士蓝铁染色、磁共振(MR)成像和全身荧光成像结果表明，FA-MNP/CDDP/TFPI-2具有较高的基因转染效率，并能通过叶酸受体(FR)介导的递送靶向肿瘤细胞。共递送分析表明，所得的FA-MNP/CDDP/TFPI-2复合材料比单独使用CDDP或TFPI-2可引起更多的细胞凋亡。结果表明，FA-MNP/CDDP/TFPI-2复合材料合成成功，并表明它是FR的特异性分子靶点，对HNE-1细胞的生长有明显的抑制作用。
组蛋白去甲基化酶GASC1抑制剂靶向GASC1基因通过NOTCH-MAPK信号通路抑制食管癌恶性转化
摘要 .目的 .食管癌是我国常见的消化道肿瘤，发病率较高。组蛋白去甲基化酶4在染色体结构修饰和基因表达调控中起重要作用，成为肿瘤治疗的新靶点。GASC1是KDM4家族的重要成员，与肿瘤的恶性程度密切相关。方法 .构建KDM4C基因（又称GASC1）的短发夹状干扰RNA质粒和空白对照质粒，分别转染人食管鳞状细胞癌细胞株（KYSE-150和KYSE-30），根据细胞活力筛选最佳治疗浓度。细胞克隆实验分析各组细胞的增殖特性。细胞迁移和划痕愈合实验分析肿瘤的恶性转移和侵袭能力。免疫荧光分析检测蛋白GASC1的表达特性。采用Western blot方法分析各组细胞株中蛋白Notch1、HIF1A、Flt-1、c-myc、c-fos的表达情况。结果.本实验通过加入咖啡酸及干扰RNA质粒调控各组GASC1蛋白的表达水平，之后通过一系列表征方法确定食管癌细胞的转移和增殖能力与GASC1蛋白表达水平呈正相关。通过测定各癌相关蛋白的表达情况，进一步证明GASC1蛋白的调控作用。结论.GASC1基因在食管癌的进展中起着至关重要的作用，通过抑制GASC1基因的表达，与癌症发展密切相关的NOTCH、MAPK等通路也会受到抑制，最终可能控制恶性发展。
尿路上皮癌类器官：膀胱癌研究的工具
背景：膀胱癌是全球十大最常见肿瘤类型之一，是日益严重的医疗保健问题，占医疗保健总成本的很大一部分。化疗对部分患者有效，但会导致严重的副作用。肿瘤发病机制和耐药机制在很大程度上尚不清楚。精准医疗在膀胱癌领域失败了，因为膀胱肿瘤在基因和分子上非常异质性。目前，治疗决策取决于对手术获得的单个肿瘤组织的评估。目标：膀胱癌的新型临床前模型系统对于制定针对个体患者和肿瘤特征的治疗策略是必不可少的。类器官是小型 3D 组织培养物，可“在培养皿中”模拟小尺寸器官，而类肿瘤是一种特殊类型的癌症类器官（即恶性组织）。材料和方法：自 2016 年以来，我们一直与著名的 Hubrecht 研究所合作，提供模仿亲本肿瘤的组织型膀胱类肿瘤的概念验证。我们开发了一个活体生物库，其中包含从 50 多个患者样本中培养的膀胱类器官和肿瘤类，这些肿瘤类反映了膀胱癌发病机制的关键方面。结果：组织学和免疫荧光分析表明，肿瘤类的异质性和亚分类与相应的亲本肿瘤样本相似。因此，尿路上皮肿瘤类模仿了膀胱癌发病机制的关键方面。结论：尿路上皮肿瘤类的研究将为膀胱癌发病机制和耐药性研究以及精准医疗方法开辟新途径。
Syndesmos玩双游戏：DNA伤害响应...
乳腺癌是最常见的癌症，也是女性的第二大死亡原因[Fahad Ullah M.（2019）.Adv Exp Med Biol，1152，51-64]。遗传分析允许鉴定两个主要的乳腺癌基因BRCA1和BRCA2，可以利用这些基因进行治疗，因为BRCA突变是通过PARP抑制剂治疗合成致死的。蛋白syndesmos/nudt16l1/tirr最近被确定为53BP1介导的DNA损伤响应的关键调节剂：其过表达可预防53BP1的功能，从而导致BRCA1肿瘤中的PARP抑制剂抗性[DranéP等。（2017）自然543（7644）：211–6]。然而，Syndesmos也是一种rnabinding蛋白，它与主动翻译核糖体相关联，导致蛋白质合成速率降低[Avolio，R。等。（2018）。核酸研究，46（22），12067–12086]。测试了两个syndesmos函数相互交织的假设，我们在存在或不存在遗传毒性应激（依托泊苷）的情况下测量了Syndesmos敲低细胞的翻译。多核体分析分析显示，与对照组相比，综合细胞没有显着变化，这表明全局翻译没有改变。然而，免疫荧光分析表明，syndesmos沉默会导致Pbodies的增加，并进一步积累了Pbodies对依托泊苷的响应。因此，我们发现依托泊苷处理后，在Syndesmos敲低细胞中降低了编码DNAREPAIR蛋白的转录本的翻译效率。这些初步数据表明Syndesmos在涉及DNA损伤反应的“ mRNA循环”中起作用。根据该模型，Syndesmos可以通过“按需”释放翻译性mRNA来帮助DNA损伤响应，以允许及时合成DNA修复蛋白。