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World File Search System链式反应
通过聚合酶链式反应生成单链 DNA 及其在 HLA-DQA 基因座直接测序中的应用
摘要 通过聚合酶链式反应，可以从基因组 DNA 中酶促扩增单拷贝序列。通过使用两种不同摩尔量的扩增引物，只需一个步骤即可扩增单拷贝基因并产生所选链的过量单链 DNA，用于直接测序或用作杂交探针。此外，可以使用等位基因特异性寡核苷酸在扩增反应中或作为测序引物直接测序杂合子中的单个等位基因。通过使用这些方法，我们研究了 HLA-DQA 基因座的等位基因多样性及其与血清学定义的 HLA-DR 和 -DQ 类型的关联。该分析揭示了总共八个等位基因和三个额外的单倍型。该方法在筛查人类基因突变方面具有广泛的应用，并有助于将基因的酶促扩增与自动测序联系起来。
聚合链式反应——综述
PCR 是一种分子生物学技术，可扩增单个或几个 DNA 拷贝，产生数千至数百万个拷贝。它由 Kary Mullis 于 1984 年开发，其基本原理由 Gobind Khorana 于 1971 年描述。Kary Mullis 因这项创新获得了 1993 年的诺贝尔奖和日本奖 (1)。PCR 广泛应用于医学和生物研究实验室的各种应用。它快速、廉价、简单，可从微量源 DNA 材料中扩增特定 DNA 片段。PCR 已迅速成为分子生物学中使用最广泛的技术之一。它用于医学诊断，包括分析微量遗传物质。它还用于法庭分析遗传物质，也用于动物行为和生态学的实地研究。引物合成和聚合酶纯化问题限制了进展。（2）
聚合酶链式反应 (PCR) #1 模块小时数
Boster 抗体和 ELISA 专家。（nd）PCR 原理。Boster 抗体和 ELISA 专家。https://www.bosterbio.com/protocol-and-troubleshooting/pcr-principle New England BioLabs Inc. (2021)。使用标准 Taq 缓冲液 (M0273) 的 Taq DNA 聚合酶 PCR 方案。New England BioLabs Inc. https://www.neb.com/protocols/0001/01/01/taq-dna-polymerase-with-standard -taq-buffer-m0273 Pilotte, N. (2013 年 11 月 5 日) 如何计算 PCR 反应所需的引物量？Research Gate。https://www.researchgate.net/post/How_does _one_calculate_the_required_amount_of_primers_required_for_PCR_reaction Promega。（2018 年 4 月）。 GoTaq® DNA 聚合酶 (M300) 协议。Promega。
使用快速灵敏的 SYBR® green 定量聚合酶链式反应检测法对患有胃肠炎的犬进行犬细小病毒 2 的分子检测和定量分析
1. 美洲大学（UDLA）研究总局研究实验室，安提瓜 Vía a Nayón S/N，基多 EC 170124，厄瓜多尔； 2. 美洲大学（UDLA）工程与应用科学学院生物技术工程项目，安提瓜 Vía a Nayón S/N，基多 EC 170124，厄瓜多尔； 3. 厄瓜多尔基多美洲大学（UDLA）健康科学学院兽医学项目，Antigua Vía a Nayón S/N，基多 EC 170124，厄瓜多尔； 4. 农业产业与环境科学学院。农业生涯。卡尔奇州立理工大学 (UPEC)。 Antisana S/N 和 University Avenue，图尔坎 EC 040102，厄瓜多尔； 5. 罗萨里奥国立大学（UNR）兽医学院。奥维迪奥拉各斯大道和 33 号公路卡西尔达 – 圣达菲 – 阿根廷； 6. 厄瓜多尔中央大学兽医学与畜牧学院，厄瓜多尔基多，Gatto Sobral 和 Jerónimo Leiton，基多 EC 170521，厄瓜多尔； 7. 美洲大学（UDLA）教学兽医诊所，Shuara 街 N40-55 和 De Los Granados 大道，基多，EC 170503，厄瓜多尔； 8. 美洲大学（UDLA）“一个健康研究小组”，安提瓜 Via a Nayón S/N，基多 EC 170124，厄瓜多尔。通讯作者：Luis Nuñez，电子邮件：fabiann7@yahoo.es 共同作者：ALG：a.abel.loor.giler@gmail.com，SCR：sara.castillo.reyes@udla.edu.ec，SSP：silvanahsp@yahoo.com，MC：rolando.campos@upec.edu.ec，RMP：rpmena@uce.edu.ec，SPC：sdpch2021@gmail.com 收稿日期：2024 年 5 月 8 日，接受日期：2024 年 9 月 11 日，在线发表日期：2024 年 10 月 17 日
集成杂交链式反应或催化发夹组装的 DNA 基生物传感器研发新进展
作为等温、无酶信号放大策略，杂交链式反应 (HCR) 和催化发夹组装 (CHA) 具有放大效率高、生物相容性好、反应温和、操作简便等优点。因此，它们已广泛应用于基于 DNA 的生物传感器，用于检测小分子、核酸和蛋白质。在这篇综述中，我们总结了采用典型和先进的 HCR 和 CHA 策略的基于 DNA 的传感器的最新进展，包括分支 HCR 或 CHA、局部 HCR 或 CHA 和级联反应。此外，还讨论了在生物传感应用中实现 HCR 和 CHA 的瓶颈，例如高背景信号、比酶辅助技术更低的放大效率、动力学慢、稳定性差以及细胞应用中 DNA 探针的内化。