目的:结直肠癌 (CRC) 是导致癌症死亡和发病率的主要原因之一。迫切需要找到对抗 CRC 的策略。APC 或 β -catenin 的驱动基因突变在 CRC 的发生和进展中起重要作用。在本研究中,我们联合应用 CRISPR/Cas9-sgRNA 系统和单链寡脱氧核苷酸 (ssODN) 作为模板来纠正结肠癌细胞系 HCT-116 中存在的 β -catenin 的杂合 Δ TCT 缺失突变。该方法为癌症的基因治疗提供了一种潜在的策略。方法:构建 Cas9/β -catenin-sgRNA-eGFP 共表达载体并与 ssODN 共转染到 HCT-116 细胞中。通过 FACS 分选突变校正的单细胞克隆,并通过 TA 克隆和 DNA 测序进行判断。通过实时定量PCR、Western印迹、CCK8、EDU染色和细胞接种克隆检测CRISPR/Cas9介导的校正效果。此外,还分析了裸鼠异种移植瘤中细胞克隆衍生肿瘤的生长情况。结果:CRISPR/Cas9介导的β-catenin突变校正导致TCT序列的存在和Ser45处磷酸化β-catenin的重新表达,从而恢复了磷酸化β-catenin的正常功能,包括减少核β-catenin的运输和下游c-myc、survivin的表达。在β-catenin突变校正的细胞中观察到细胞生长显著减少。移植了突变校正的HCT-116细胞的小鼠的肿瘤大小明显小于未校正的异种移植瘤。结论:本研究数据表明,通过 CRISPR/Cas9 和 ssODN 的组合来纠正驱动突变可以极大地改善癌细胞系的生物学行为,表明该策略在癌症基因治疗中具有潜在的应用价值。关键词:CRISPR/Cas9、ssODN、靶向基因编辑、β-catenin、结肠癌
深化和巩固学习 • 什么是燃料? 说明食物的能量含量单位。 比较食物和燃料的能量值。 将食物和燃料中的能量与不同活动所需的能量进行比较。 • 有哪些不同的能源? 描述用于发电的能源。 解释不同能源的优缺点。 描述能量如何从能源传输到家中的电器。 • 什么是能源和电力? 描述您在支付电费时支付的费用。 计算家庭能源使用成本。 比较运行不同家用设备的能源使用量和成本。 • 什么是能量守恒定律? 使用能量库之间的能量转移模型来描述工作是如何完成的。 描述物体的能量如何取决于其速度、温度、高度,或者它是被拉伸还是压缩。 在一系列现实生活中的例子中展示能量如何在能量库之间转移。 • 能量是如何耗散的? 描述耗散的含义。 根据输入和输出能量的值,计算有用能量和耗散量。解释在各种情况下能量是如何消散的。
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在这项工作中,我们使用带有X点几何形状的Full-F Gyrokinetic incelter-in-cell代码研究了磁性构件设备边缘的等离子体斑点的动力学。在模拟中,随后遵循种子斑点的演变,它接近分离杆附近的天然形成的层状剪切层,在该斑点稳定下,斑点是由自搭配的绝热电子反应引起的大型自旋稳定的,并且在交叉效率的传播过程中观察到了blob bifurcation和blob bifurcation and Trapping。在构建了区域无区域和区域剪切层中均具有新的理论解释,其中包括主要的E×B旋转运动。是由旋转斑点与纬向剪切层之间相互作用引起的传输屏障的理论条件,并通过模拟对其缩放进行了验证。新的理论框架,尤其是运输障碍,可用于解释和预测各种实验现象。特别是,用实验参数计算出的传输屏障条件表明,在实验中,H模式的斑点径向传输小于L模式。
• 海军高级士兵学院 (NAVSEA) 为高级士兵领袖提供沟通技巧、领导力和管理、国家安全事务、海军计划和身体健康方面的教育。为期 10 周的 SEA 课程包括 7 周的远程学习 (DL),随后在罗德岛州纽波特进行 3 周的驻校教育。两个阶段之间有一个非学术周,因此课程从开始到结束共计 11 周。重要提示:向学院报告的人员必须符合 OPNAVINST 6110.1(系列)中所述的美国海军体能准备计划最低标准。在驻校签到期间,工作人员将进行身体成分评估 (BCA)。学院将取消所有未达到海军最低身体成分要求的学生的入学资格。课程信息:https://www.usnwc.edu/Student-Information/Senior-Enlisted- Academy-Students
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