[1] Soundguard Digital Plantronics拥有复杂的算法,包括:通过将声音限制为118 DBA来防止声学冲击; G616反启动保护将噪声水平限制在102 dB以下的SPL以下,因此符合澳大利亚通信行业论坛(ACIF)G616建议;每日平均噪声暴露措施和控制声音,以防止平均每日声音暴露超过80 dBA或85 dBA时间加权平均值(TWA)。
a)患者外周血(通过PBMC的流式细胞仪评估)CD4+CD25+FOXP3+T细胞瞬时升高,并且在1.3 mg/kg及以上的剂量水平上观察到的变化更大。折叠变化是根据患者匹配的基线(筛查和C1D1预剂量)样品的平均值计算得出的;虚线表示折叠变化= 2。在用BT7480治疗后,在通过Olink®测量的患者血浆中观察到SCD137(b)和CXCL9(C)的增加,在剂量水平为1.3 mg/kg及以上时观察到更大的变化。在b)和c)中,是根据患者匹配的基线样本的平均值计算出的log2折叠变化。虚线表示两个基线样品患者的log2折叠变化中基线时的1个标准偏差。
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图 5. BT7455 在体外引发强效的 EphA2 结合依赖性 CD137 激动作用。A 和 B) BT7455 在 PBMC/肿瘤细胞共培养试验中对 MC38 细胞 (黑色) 有反应,但对 EphA2 表达被敲除的 MC38 细胞 (EphA2 KO,紫色) 无反应。C 和 D) BT7455 在与 PBMC 和 A549 肿瘤细胞 (黑色圆圈) 的共培养试验中引发活性,而 BT7455 的非结合 (nb) 类似物则无活性;BCY14736 (EphA2/CD137nb,紫色)、BCY14796 (EphA2nb/CD137nb,绿色) 或 BCY14797 (EphA2nb/CD137,蓝色)。 E&F) BT7455 在 PBMC/PC3 肿瘤细胞共培养试验中显示出反应,用抗 CD3(黑色)刺激以诱导 CD137 表达的 PBMC,但未刺激的 PBMC(红色)没有反应。G&H) 当 PBMC 与 EphA2 低表达肿瘤细胞系 T-47D 共培养时,BT7455 在试验中不活跃。EH 中的蓝色虚线代表未添加 BT7455 的抗 CD3 刺激细胞培养基对照。
图 2:BT7455 同时与 CD137 和 EphA2 蛋白结合(表面等离子体共振;SPR 显示),并特异性地与 CD137 阳性 T 细胞结合,导致体外产生强大的 EphA2 依赖性活性。(AB)生物素化的 hCD137 或 hEphA2 固定在 SPR 芯片上,每个循环都设置为用固定蛋白捕获 BT7455,然后注射第二种蛋白(2-3 倍稀释系列),然后再生表面。传感图显示固定的 hCD137-BT7455 复合物 (A) 捕获 hEphA2 或固定的 hEphA2-BT7455 复合物 (B) 捕获 hCD137。 (C、D) 用抗 CD3 刺激人类 PBMC,并用 AF488 标记的 BT7455 处理,流式细胞术监测发现,BT7455 可与 CD8+CD137+ T 细胞 (C) 和 CD4+CD137+ T 细胞结合,但不与 CD137 阴性细胞结合 (n=4 +/-SD;2 个独立 PBMC 供体各 2 个重复;****p<0.0001)。虚线表示平均背景 MFI(仅培养基孔)。(E) Jurkat-CD137 报告细胞与表达 EphA2 的 A549 肿瘤细胞共培养,用 BT7455 或非结合类似物 (BCY13626) 处理,通过发光测量下游 CD137 介导的 NF-k B 活化 (n=3,+/-SD)。 (FG) 用抗 CD3 刺激 PBMCs 并与 A549 细胞共培养,用 BT7455 或非结合类似物 (BCY14736、BCY14797 和 BCY14796) 处理,并通过 Luminex 测量分泌到培养基中的 IFN g 和 IL-2 水平 (n=3,+/-SEM)。 (H) 与 (G) 相同,但 PBMCs 与表达低水平 EphA2 的 ZR75-1 或 T47D 肿瘤细胞共培养。 BT7455 活性依赖于表达高水平 EphA2 的肿瘤细胞 (即 A549) 的存在。 使用 Quantibrite 参考标准通过流式细胞术估计 EphA2 受体表达。
自行车是完全合成的约束肽,具有类似抗体的亲和力,靶向靶向,易于穿透肿瘤组织,半衰期相对较短,并且可以将化学连接在一起以产生多功能分子。BT7480是一种自行车TICA®,作为一种一流的CD137治疗性,用于治疗与Nectin-4表达相关的人类癌症,目前正在进行的I/II期临床试验中进行研究。监测给定治疗的目标参与可能是推荐II期剂量的关键因素。虽然基于流式细胞学的受体占用(RO)测定法被用于监测诊所中的目标参与,但CD137特异性RO分析提出了几个重要的挑战,这些挑战在历史上妨碍了诊所中的RO,包括在未刺激和刺激T细胞中CD137的动态表达,包括CD137+ CD137+ CD137+ CD137+ CD137+ CD137+ CD137+ CD137+ CD137+的频率。 CD137靶向药物的存在。为了应对这些挑战,开发了一个合适的,14个Plex流式细胞仪面板,其中包含了荧光标记的CD137特异性结合自行车®。这款自行车®被证明可以直接与自行车TICA®竞争,以与CD137结合,但没有与荧光标记的抗CD137抗体结合,从而使各种CD137+免疫细胞类型同时检测BT7480在单个血液样本中同时检测到Andymune+免疫细胞类型。
