布鲁克莱恩镇议会已经存在了三百多年,其目标是为布鲁克莱恩居民提供明确的权利,让他们能够参与市政事务,并融入其中。今天,我们认识到,1638 年,欧洲殖民者强行夺取了马萨诸塞州庞卡波格部落的土地,并将其作为殖民地定居,后来将其命名为布鲁克莱恩。布鲁克莱恩于 1638 年定居,并于 1705 年成立,即第一次镇议会召开的第二年。在那次会议上,只有男性业主才有资格参加。1919 年,马萨诸塞州批准了宪法第 19 条修正案,赋予妇女在布鲁克莱恩选举中投票的权利。1910 年,根据州法规成立了镇财政委员会。在布鲁克莱恩,财政委员会被称为咨询委员会。1915 年,布鲁克莱恩成为马萨诸塞州第一个采用代表镇议会的城镇,每个选区的公民选举镇议会成员来代表他们的利益。所有公民在主持人认可的情况下都可以发言,但只有当选的镇议会成员才允许投票。镇议会的进行由主持人管理。在这样做时,主持人根据州法律、镇规章制度和镇议会投票和传统行使自由裁量权。“镇议会民主概念背后有着抱负,必须将其视为民主信条不可磨灭的一部分。镇议会民主概念是一种理想化的方式,表达了民主的希望,即被统治者能够接触到统治者,他们能够在重要的地方发出自己的声音,并被视为人,而不是高效机器中无名的齿轮。它代表了一种信念,即当大多数公民理解政府选择的计划和目标,并且当他们因为这些计划和目标在公开场合进行了诚实的辩论而获得这种理解时,社会就会更安全、更自由。” - 《美国民主:民主理念的力量》,洛克菲勒小组报告 (1960)
我们服务:波士顿的所有青年,成人和家庭(Allston,Brighton,Dorchester,Hyde Park,Hyde Park,Jamaica Plain,Mattapan,North End,Roslindale,Roxbury,Roxbury,South Boston,South End,South End和West Roxbury)和Brookline)和Brookline。我们的团队包括:精神病医生硕士危机危机临床医生护士从业人员注册护士医疗助理病例经理家庭合作伙伴资源专家认证的同伴专家精神卫生专家我们有多种语言和访问人员的员工,包括对班级和访问的服务,包括对班级和访问服务。我们提供评估和通过远程医疗进行的评估和后续行动。
1土壤与景观科学,分子与生命科学学院,科学与工程学院,科廷大学,GPO盒U1987,珀斯WA 6845,澳大利亚。2分子与生命科学学院,科廷大学,GPO盒U1987,珀斯WA 6845,澳大利亚。 3 Ecohealth Network,1330 Beacon St,Suite 355a,Brookline,MA 02446,美国4土壤科学,荷兰瓦格宁根大学。2分子与生命科学学院,科廷大学,GPO盒U1987,珀斯WA 6845,澳大利亚。3 Ecohealth Network,1330 Beacon St,Suite 355a,Brookline,MA 02446,美国4土壤科学,荷兰瓦格宁根大学。
美国路易斯安那州什里夫波特,美国邮政局,B雷吉斯大学药学系,丹佛市雷吉斯大学药学院,美国C雷吉斯大学丹佛市80221,美国丹佛市丹佛市丹佛市,d div>,美国丹佛市,丹佛市,d div>麻醉学,LSU Health Shreveport,1501 Kings Highway,Shreveport,LA 71103,美国f麻醉和药理学和药理学和药理学,毒理学,毒理学和神经科学部Brookline Ave,马萨诸塞州波士顿,美国H 02215,美国H谷麻醉学和疼痛顾问 - 设想医师服务,凤凰城,亚利桑那州,亚利桑那大学医学院 - 凤凰医学学院 - 麻醉学,凤凰城,亚利桑那州,亚利桑那州,亚利桑那州,亚利桑那州,克雷顿大学医学院美国路易斯安那州什里夫波特,美国邮政局,B雷吉斯大学药学系,丹佛市雷吉斯大学药学院,美国C雷吉斯大学丹佛市80221,美国丹佛市丹佛市丹佛市,d div>,美国丹佛市,丹佛市,d div>麻醉学,LSU Health Shreveport,1501 Kings Highway,Shreveport,LA 71103,美国f麻醉和药理学和药理学和药理学,毒理学,毒理学和神经科学部Brookline Ave,马萨诸塞州波士顿,美国H 02215,美国H谷麻醉学和疼痛顾问 - 设想医师服务,凤凰城,亚利桑那州,亚利桑那大学医学院 - 凤凰医学学院 - 麻醉学,凤凰城,亚利桑那州,亚利桑那州,亚利桑那州,亚利桑那州,克雷顿大学医学院
1美国乔治敦大学艺术与科学研究生院,美国华盛顿特区,美国美国2 Smidt Heart Institute,Cedars-Sinai Medical Center,Cedars-Sinai Medical Center,洛杉矶,加利福尼亚州,美国,美国,美国医学和公共卫生学院3 ATENEO医学院,Pasig City,PASIG CITY,PHIPIPPINES 4 MANIPINY of MEDICAL,CENBOIMPENIPPENIPPENIPPENIPPENIPPEN,CEBOIPLINES CENBIENS CENTIPLINES 5美国明尼苏达州罗切斯特市梅奥诊所7贝丝以色列执事医疗中心,美国马萨诸塞州波士顿,美国美国,美国公认:无利益冲突:无资助:无资助:无通讯作者:雅克·克波多诺(Jacques Kpodonu):雅克·克波多努(Jacques Kpodonu电子邮件:jkpodonu@bidmc.harvard.edu1美国乔治敦大学艺术与科学研究生院,美国华盛顿特区,美国美国2 Smidt Heart Institute,Cedars-Sinai Medical Center,Cedars-Sinai Medical Center,洛杉矶,加利福尼亚州,美国,美国,美国医学和公共卫生学院3 ATENEO医学院,Pasig City,PASIG CITY,PHIPIPPINES 4 MANIPINY of MEDICAL,CENBOIMPENIPPENIPPENIPPENIPPENIPPEN,CEBOIPLINES CENBIENS CENTIPLINES 5美国明尼苏达州罗切斯特市梅奥诊所7贝丝以色列执事医疗中心,美国马萨诸塞州波士顿,美国美国,美国公认:无利益冲突:无资助:无资助:无通讯作者:雅克·克波多诺(Jacques Kpodonu):雅克·克波多努(Jacques Kpodonu电子邮件:jkpodonu@bidmc.harvard.edu
1 美国马萨诸塞州波士顿丹娜法伯癌症研究所 2 美国宾夕法尼亚州费城福克斯蔡斯癌症中心 3 智利圣地亚哥布拉德福德希尔临床研究中心 4 巴里大学“A. Moro” 和 Azienda Ospedaliero-Universitaria Consorziale Policlinico di Bari,意大利巴里 5 Vall d´Hebron 肿瘤研究所 (VHIO),Hospital Universitari Vall d´Hebron,Vall d´Hebron Barcelona Hospital Campus,西班牙巴塞罗那 6 Instituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición Salvador Zubirán,墨西哥城 7 Bristol Myers Squibb,美国新泽西州普林斯顿 8 Analysis Group,Inc.,美国加利福尼亚州洛杉矶 * 通讯作者:Bradley McGregor,医学博士,Dana-Farber 癌症研究所 Lank 泌尿生殖肿瘤中心,450 Brookline Avenue,波士顿,马萨诸塞州 02215,美国。电话:+1 617 632 6328;传真:+1 617 632 2165;电子邮件:bradley_mcgregor@dfci.harvard.edu。
* 通讯作者:Kimberly Stegmaier 博士(Kimberly_stegmaier@dfci.harvard.edu),丹娜法伯癌症研究所,450 Brookline Avenue,波士顿,MA 02215,电话 617-632-4438。^ 这些作者对这项工作做出了同等贡献。# 当前地址:默克研究实验室,33 Avenue Louis Pasteur,波士顿,MA 02115 作者贡献 SL 和 CL 构思了这项研究,设计和进行了实验,分析了数据,解释了结果并撰写了手稿。NKS 和 BKAS 设计并进行了实验,分析了数据并解释了结果。AR 和 AC 进行了体内研究,分析了数据并解释了结果。NVD、GK 和 STY 设计了 CRISPR 库。NVD 协助进行 DepMap 数据分析。STY 协助进行条形码实验并解释结果。 MK、CW、SM 和 BA 提供技术协助、分析数据并解释结果。TNM 和 JR 协助进行 BH3 分析实验、分析数据并解释结果。JDM 和 AL 提供资源支持和智力投入。FP 协助进行筛选数据分析。LL 和 MW 提供 PDX 资源并协助开发 PDX-Cas9 模型。JT 和 KS 构思了这项研究、设计了实验、解释了结果、监督并资助了这项研究。所有作者都阅读、编辑并批准了最终稿件。
1美国北卡罗来纳州89512的沙漠研究所基因组医学中心; riccardop@dcm.aau.dk(R.P.)2 Cancer Research Institute, Beth Israel Deaconess Cancer Center, Departments of Medicine and Pathology, Beth Israel Deaconess Medical Center, Harvard Medical School, Boston, MA 02215, USA 3 Center for RNA Medicine, Department of Clinical Medicine, Aalborg University, DK-2450 Copenhagen SV, Denmark 4 Division of Endocrinology and Metabolism, Beth Israel Deaconess Medical Center, 330 Brookline Ave, Center for Life Sciences, Boston, MA 02215, USA 5 Institute of Biostructure and Bioimaging (CNR) c/o Molecular Biotechnology Center, 10126 Turin, Italy 6 Massachusetts General Hospital Cancer Center, Department of Cell Biology, Harvard Medical School, Boston, MA 02215, USA 7 Boston Children's Hospital, Boston, MA 02215,美国8美国8癌症研究所,哈佛医学院RNA医学倡议,病理学系,贝丝·贝丝·迪克森斯医学中心,哈佛医学院,马萨诸塞州波士顿,美国马萨诸塞州波士顿02115,美国9美国麻省理工学院和哈佛大学,剑桥大学,马萨诸塞州坎布里奇,美国马萨诸塞州02142,美国10分子生物学史科,分子科学102142意大利都灵11名著名癌症研究所,内华达州高等教育系统,里诺,北美洲89502,美国 *通讯:ska@dcm.aau.dk(S.K.); pierpaolo.pandolfininaldis@renown.org(p.p.p.)†目前的地址:美国沃特敦,马萨诸塞州02472,美国。•目前的地址:美国加利福尼亚州伯克利分校的营养科学与毒理学系,美国加利福尼亚州94720,美国。
机构 ID 机构名称 地址 FA0085051 Invicro Llc 1 Enterprise Ste 1F Aliso Viejo, Ca 92656-2606 FA0024093 Southern California Gas Company 1 Liberty Aliso Viejo, Ca 92656-3830 FA0071196 Rxsight Inc 100 Columbia Aliso Viejo, Ca 92656-4114 FA0059577 Nuvasive Specialized Orthopedics 101 Enterprise Ste 100 Aliso Viejo, Ca 92656-2604 FA0028609 Ace Tube Bending 14 Journey Aliso Viejo, Ca 92656-3317 FA0085601 Soka University Marie And Pierre Curie Hall 160 University Cir Aliso Viejo, Ca 92656 FA0054577 Astronic 2 Orion 加利福尼亚州 Aliso Viejo 92656-4200 FA0024106 Ups Laguna 22 Brookline 加利福尼亚州 Aliso Viejo 92656-1461 FA0042604 Aliso Viejo Auto Care Inc 22952 Pacific Park Dr 加利福尼亚州 Aliso Viejo 92656-3389 FA0058112 Aliso Niguel Autocare 22972 Pacific Park Dr Ste A 加利福尼亚州 Aliso Viejo 92656-5357 FA0054733 Pacific Automotive 22972 Pacific Park Dr Ste B 加利福尼亚州 Aliso Viejo 92656-5357 FA0024729 Chevron # 0200913 23022 Aliso Creek Rd 加利福尼亚州 Aliso Viejo 92656-1540 FA0067488 Press Tige Cleaners 23411 Aliso Viejo Pkwy Ste E Aliso Viejo, Ca 92656-1533 FA0058464 Circle K Stores Inc Site #2709430 23431 Aliso Viejo Pkwy Aliso Viejo, Ca 92656-1531 FA0066626 K & R Services #5946 24281 Pacific Park Dr Aliso Viejo, Ca 92656-3048 FA0053113 Walgreens #11241 26531 Aliso Creek Rd Aliso Viejo, Ca 92656-2882 FA0075879 Trader Joes #195 26541 Aliso Creek Rd Aliso Viejo, Ca 92656-4828 FA0026319 Glaukos Corporation 26600 Aliso Viejo Pkwy Aliso Viejo, CA 92656-2616 FA0085050 Hoag Health Center Aliso Viejo 26671 Aliso Creek Rd Ste 106 Aliso Viejo, Ca 92656-4807 FA0083828 One Medical Group Aliso Viejo Town Center 26741 Aliso Creek Rd Aliso Viejo, Ca 92656-4804 FA0069364 Petsmart #0102 26761 Aliso Creek Rd Aliso Viejo, Ca 92656-2887 FA0075201 Banfield 宠物医院 #0102 26761 Aliso Creek Rd 亚里索维耶荷, CA 92656-2887 FA0085044 Dollar Tree #08702 26775 Aliso Creek Rd Aliso Viejo, Ca 92656-2887 FA0064135 Tj Maxx #689 26781 Aliso Creek Rd Aliso Viejo, Ca 92656-2887 FA0081910 Five Below 1302 26791B Aliso Creek Rd Aliso Viejo, Ca 92656-2887 FA0085052 Optics Medical 26800 Aliso Viejo Pkwy Ste 160 Aliso Viejo, Ca 92656-2625
用高吞吐量测量单细胞密度可以使免疫细胞和药物1的动态分析2 Weida Wu 1,2,Sarah H. Ishamuddin 1,Thomas W. Quinn 3,4 3,4,Smitha Yerrum 3,4,Smitha Yerum 3,4,Ye Zhang 1,Ye Ye Zhang 1,Ye Ye Ye Zhang 1,Yedie L. DeBaiz 5,3 pei-lun karie arie karie 3,4,du un kao 3,4,4,4,4,4 ,4,; Murakami 5 , Morvarid Mohseni 6 , Kin-Hoe Chow 3,4 , Teemu P. 4 Miettinen 1 , Keith L. Ligon 3,4,7,8,9,* , Scott R. Manalis 1,2,7,10,* 5 6 1 Koch Institute for Integrative Cancer Research, Massachusetts Institute of Technology, 500 Main St building 76, Cambridge, MA 02139, USA.7 2马萨诸塞州理工学院生物工程系,21 Ames ST#56-651,剑桥,马萨诸塞州02139,美国。然而,现有的密度测量缺乏21个精度或吞吐量,无法量化细胞状态的细微差异,尤其是在主要样本中。22在这里,我们提出了一种方法,可以通过将荧光排除显微镜与悬浮的24个微通道谐振器进行整合,以0.03%(0.0003 g/ml)的精度为0.03%(0.0003 g/ml)的密度。将这种方法应用于人淋巴细胞时,我们发现细胞25密度及其变化随着细胞从静止状态过渡到增殖状态而降低,26表明分子拥挤的水平会降低,并在进入细胞周期时受到更高的调节。使用胰腺癌患者衍生的异种移植模型,我们发现原发性肿瘤细胞对药物治疗的EX 28体内密度反应可以预测体内肿瘤生长29反应。45 46测量细胞密度的主要挑战是获得高采样吞吐量以及高47精度。8 3患者衍生模型中心,达纳 - 法伯癌症研究所,美国马萨诸塞州波士顿伯灵顿大街21号,美国马萨诸塞州02215,美国9 4病理学系,达纳 - 法伯癌症研究所,哈佛大学450 Brookline Avenue,波士顿,波士顿,波士顿,马萨诸塞州马萨诸塞州02215 02215, USA 11 6 Oncology Discovery, Bristol-Myers Squibb, 250 Water St, Cambridge, MA 02141, USA 12 7 Broad Institute of Harvard and MIT, 415 Main St, Cambridge, MA 02142, USA 13 8 Department of Pathology, Brigham & Women's Hospital, Harvard Medical School, 75 Francis St, Boston, MA 02215, USA 14 9 Department of Pathology,波士顿儿童医院,哈佛医学院,马萨诸塞州波士顿朗伍德大街300号,美国马萨诸塞州02115,美国15 10 Massachusetts理工学院机械工程系,马萨诸塞州33 Massachusetts Ave,Masbridge,MA 02139,USA,美国16 17 *通讯作者Keith_ligon@dfci.harvard.eduuuse; srm@mit.edu 18 19细胞密度,细胞质量与体积的比率是分子拥挤的指标,因此是细胞态和功能的20个基本决定因素。我们的方法揭示了细胞状态过渡30期间分子拥挤的意外行为,并将密度作为功能精确药物的新生物标志物。31 32 33细胞密度取决于细胞的干质量组成和水的细胞体积的比例,34反映其分子拥挤水平。尽管细胞质量和体积在增殖的35个细胞中可能会变化高达50%,但细胞密度受到严格调节,以保持最佳的分子拥挤水平1,2,3。使用流线型的音量传感单元,可以实现63环境36提示,例如养分耗竭和渗透压变化会改变分子拥挤,37个通过改变扩散率和蛋白质构象1,4,5来影响细胞生物化学。38个拥挤水平和细胞生理学之间的耦合使细胞密度成为表征基本细胞39过程的关键,例如增殖,凋亡,代谢转移和分化1,3,指出了其潜在的40个生物标记物,用于细胞适应性和药物反应。对细菌和酵母41等单细胞生物的研究报告说,在42种增殖和休眠之间的细胞状态过渡过程中,分子拥挤水平显着变化,并且人们认为密度被认为急性地反映了这些过渡5-8。在原发性哺乳动物细胞中是否存在密度和增殖之间的这种43连接尚不清楚,部分原因是44归因于现有密度测量方法的局限性。传统的梯度离心方法在人口水平上评估细胞密度,但速度为48,需要大量样本量,这限制了它们用于研究瞬态生物学过程的使用。单49个细胞测量结果揭示了人群内细胞密度的异质性,从而深入了解了密度50调节。磁悬浮方法通过平衡细胞的重力来确定单细胞的密度,而51浮力培养基9,10施加的浮力。方法检测干质密度(总数超过52体积的干质量),例如定量相显微镜(QPM)或与细胞体积53测量相结合的拉曼成像,提供替代密度测量值11,12,13,14,15,16。尽管这些方法提供了54个亚细胞分辨率和单细胞跟踪,但在测量细胞密度时,迄今为止使用哺乳动物细胞发表的实验含有55米至数百个单细胞。悬浮的微通道谐振器(SMR)56是一种微流体质量传感器,已用于通过测量两种类型的流体中的57个细胞的57个质量来测量单细胞密度,具有不同的密度为17,18-20。但是,这种方法的吞吐量为58限制为每个实验几百个单元,因为它要求细胞在两种类型的59种流体中进行顺序测量。60 61 SMR和QPM设备已经达到了每62个实验21-23的数十万个单元的吞吐量。