摘要 动机:CRISPR/Cas9 技术已被开发为最有效和最广泛使用的基因组编辑工具,用于修改众多植物的基因组,其中双链 DNA 中的 cas9 切割由单个向导 RNA(sgRNA)中包含的 20 个核苷酸序列驱动。然而,使用 CRISPR/Cas9 同时编辑多个目标仍然是该领域的技术挑战(Ma 等人,2014 年)。方法:在本研究中,使用 Golden Gate Assembly 克隆策略生成多个 CRISPR/cas9 编辑结构以用于蓖麻植物。模块化克隆系统使用 IIS 型酶在其识别位点外切割,从而允许有效组装具有兼容突出端的 DNA 片段,从而同时促进多个序列的正确取向(Engler 等人,2014 年)。我们的主要目标是获得一种遗传构建体,允许在同一个质粒载体中表达两个 sgRNA 和 cas9 核酸酶,以便通过农杆菌感染转化蓖麻。选择了两个针对 FAH12 蓖麻羟化酶的 CRISPR 靶标以避免可能的脱靶。这些靶标包含在 sgRNA 中并克隆到 0 级质粒中,每个质粒两侧都有 BsaI 酶的限制位点。Golden Gate 1 级反应包括几个 BsaI 消化和连接循环,将 U6 启动子与两个 sgRNA 分别组装到 1 级质粒中,两侧都有 BpiI 限制位点。同时,cas9 酶在双强 35S 启动子的控制下克隆,随后是来自 0 级质粒的胭脂碱合酶 (nosT) 终止子,包括这些元素,克隆到另一个 1 级质粒中,两侧也有 BpiI 限制位点。然后,用 BpiI 消化所有 1 级元件(U6-sgRNA1、U6-sgRNA2、2x35S-cas9-nosT)时,会出现兼容的突出端,这些突出端可以以正确的顺序和方向组装成 2 级结构。最终结果是 2 级质粒,其中包括 FAH12 羟化酶的 CRISPR/cas9 多重基因组编辑所需的所有元件。该构建体将转移到农杆菌中,以便以后进行蓖麻胚转化。
蓖麻是一种重要的工业不可用的油料种子,印度是世界上最大的蓖麻种子生产国,占全球总施法种子生产的85.02%。印度在国际蓖麻子石油贸易中也占主导地位,因为印度是蓖麻油及其衍生品的领先出口国。中国从印度进口蓖麻油,将其转换为衍生品,并将其作为高增值产品出售。通过将蓖麻油转换为各种衍生物,有很大的范围来提高印度的收入。随着世界变得更加环保,随着自然衍生产品的替代合成产品的替代,蓖麻油基衍生物可能会在全球范围内发现越来越有吸引力的市场。主要的蓖麻产生国家是安得拉邦,古吉拉特邦,卡纳塔克邦,奥里萨邦,拉贾斯坦邦和泰米尔纳德邦。古吉拉特邦是印度最大的印度蓖麻生产国,该国蓖麻总生产总量约为85.09%(2019-20)。古吉拉特邦蓖麻的生产力不仅在印度而且在世界上都是最高的。不仅面积和蓖麻的生产,而且其出口也是不断增加的趋势。但是,蓖麻农业人士面临着农作物种植的问题。农民一直在报告生产和营销限制。据报道,投入成本也增加了,主要是在肥料,农药和水上。因此,有必要对古吉拉特邦的问题,前景和出口潜力有所了解。印度政府农业与农民福利部经济和统计局委托我们中心对“古吉拉特邦的蓖麻耕作:问题,前景和出口潜力”进行一项针对州的特定研究。
基于证据的策略:关系首先 - 第2/3级预期的输出(链接到EP Look fors)监视/评估 - 成人学生和学生 - 学生的互动是积极的,关怀的和尊重的。- 为发展和维持RF实践提供了持续的专业发展。- 纪律程序与支持学生学习和尊重所有个人的目标保持一致。- 利益相关者认为学校是温暖,诱人和安全的。
目的在其他研究中,FAH12 变异导致蓖麻油酸积累减少,表现出高油酸表型(Venegas-Calerón 等人,2016 年)或亚油酸增加(Sánchez Álvarez,2019 年)。在此背景下,继续研究这种酶的作用以更好地了解其在脂肪酸积累中的重要性具有重要意义。我们的主要目标是通过 Golden Gate Assembly(Engler 等人,2014 年)获得独特的遗传结构,该结构允许在同一质粒载体中表达两个 sgRNA 和 cas9 核酸酶,从而导致 FAH12 序列的大缺失,从而改变其在蓖麻植物中的功能。
F.No. 1(2)/2024-25/Estt 日期:2024 年 8 月 7 日 “向日葵和蓖麻基因组编辑项目”下 SRF(4 个职位)和 YP-I(2 个职位)选拔面试日期。 2024 年 8 月 6 日进行了筛选测试(针对那些希望从事向日葵和蓖麻工作的申请人),以筛选出参加面试的候选人。 如前所述,候选人入围的比例为 1:10(职位数:面试候选人数)。 根据在线测试获得的分数,选择了 40 分的分数线。 所有得分为 40 分或以上的候选人都已入围(入围候选人见附件一)。 根据候选人在申请时提交的谷歌表单中提到的偏好,候选人已被选中进行在线和面对面面试。由于许多申请人没有提交附件 II(连同申请书一起提交——提供资格和资质证明),因此对于此类候选人,将进行一次现场面试,在此期间他们需要出示证书供办公室人员核实。此外,为了给无法参加在线考试的候选人或任何已提交谷歌表格的申请人提供机会,将于 2024 年 8 月 14 日安排一次现场面试。他们还需要携带所有证书进行核实。附件 V 提供了参加现场面试的候选人指南
Orion 发动机系列 Orion 32 Vectorable 32.5 119.6 4,429 4,908 0.90 1,231,750 53.6 经过部件认证的 Orion 32 XL Vectorable 32.5 179.5 6,953 7,756 0.90 1,838,200 52.4 经过部件认证的 Orion 38 Vectorable 38 52.6 1,698 1,924 0.88 491,140 66.8 经过飞行验证的 Orion 50 Vectorable 50.2 103.2 6,669 7,395 0.90 1,949,000 75.1 经过飞行验证的 Orion 50 XL Vectorable 50.2 120.9 8,631 9,494 0.91 2,521,900 71.0 经过飞行验证的 Orion 50S 固定式 50.2 350.1 26,801 29,529 0.91 7,873,000 74.9 经过飞行验证的 Orion 50ST 矢量型 50.2 335.4 26,801 29,103 0.92 7,676,500 74.2 经过飞行验证的 Orion 50S XL 固定式 50.2 404.3 33,145 36,153 0.92 9,744,300 69.7 经过飞行验证的 Orion 50S XLT 矢量型 50.2 390.8 33,145 35,763 0.93 9,472,400 69.0 经过飞行验证的 Orion 50S XLG 矢量发动机 50.2 344.0 33,145 35,525 0.93 9,061,400 69.0 经过飞行验证的 CASTOR 发动机系列 CASTOR IVA 固定发动机 40.1 363.4 22,286 25,737 0.87 5,967,840 55.2 经过飞行验证的 CASTOR IVA-XL 固定发动机 40.1 457.0 28,906 33,031 0.88 8,140,170 58.0 经过飞行验证的 CASTOR IVB 矢量发动机 40.1 353.7 21,990 25,441 0.86 5,880,600 63.6 经过飞行验证的 CASTOR 30 Vectorable 92 144.2 28,098 30,590 0.92 8,239,110 149.8 经过飞行验证的 CASTOR 30B Vectorable 92 169.9 28,405 30,800 0.92 8,539,320 126.7 经过飞行验证的 CASTOR 30XL Vectorable 92 235.8 54,949 58,217 0.94 16,174,800 155.0 经过飞行验证的 CASTOR 120 Vectorable 92 355 107,914 116,993 0.92 30,000,000 79.4经过飞行验证的 CASTOR 120XL Vectorable 92.1 378.3 114,194 123,383 0.93 31,872,000 83.5 合格石墨环氧树脂发动机 (GEM) 系列 GEM 40 固定(空气点火)
Canine parvovirosis vaccine (live)........................................ 1149 Cape aloes................................................................................ 1370 Cape jasmine fruit .................................................................. 1440 Capecitabine............................................................................ 2192 Capillary electrophoresis (2.2.47。)............................................................................96毛细管粘度计方法(2.2.9。)33 Caprylate,钠............................................................................. oleoresin, refined and standardised ................... 1443 Capsicum soft extract, standardised .................................... 1444 Capsicum tincture, standardised.......................................... 1445 Capsules..................................................................................... 966 Capsules and tablets, disintegration of (2.9.1.)................................................................ 186 Carbon monoxide................................................................... 2209 Carbon monoxide ( 15 O)......................................................... 1249 Carbon monoxide in gases (2.5.25.).......................................345胶囊,抗胃抗性.......................................................................................................................................................................................................................................................... 967胶囊,硬......................................................................................... 967胶囊,口面包.......................................................................................................................................................................................................................................................................... 987胶囊,直肠........................................................................................................................... Captopril.................................................................................. 2196 Caraway fruit........................................................................... 1446 Caraway oil.............................................................................. 1447 Carbachol................................................................................. 2198 Carbamazepine ............................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................. Carbocisteine........................................................................... 2205 Carbomers ............................................................................... 2206 Carbon dioxide ....................................................................... 2207 Carbon dioxide in gases (2.5.24.)187 Carbon monoxide intermix (5 per cent) in nitrogen......... 2210 Carboplatin.............................................................................. 2210 Carboprost trometamol ......................................................... 2211 Carboxymethylcellulose......................................................... 2212 Carboxymethylcellulose钙...................................................................... 2213羧甲基纤维素钠........................................... Carmellose calcium ................................................................ 2213 Carmellose sodium................................................................. 2213 Carmellose sodium and microcrystalline cellulose............ 3415 Carmellose sodium, low-substituted.................................... 2214卡莫斯汀.................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................用于人使用的多糖疫苗(5.2.11。)307 Cefaclor........................................................................... 11.3 -5179 Cefadroxil monohydrate........................................................ 2226............... 711 Carteolol hydrochloride......................................................... 2219 Carvedilol ................................................................................ 2221 Cascara..................................................................................... 1448 Cascara dry extract, standardised......................................... 1450 Cassia oil.................................................................................. 1451 Castor oil, hydrogenated........................................................ 2222 Castor oil, polyoxyl................................................................. 3289 Castor oil, polyoxyl hydrogenated........................................ 3288 Castor oil, refined ............................................................................................................................................................................................................ 2223 CASTOR OIL,VIRGIAN ............................................................................................................. (2.7.23。)