CellRanger MkFastq:Illumina Bcl2fastq的包装器,将Illumina BCl文件和Exultiplex取用到FastQS,如果您已经从FastQ文件开始,则可以跳过此步骤,然后直接继续运行CellRanger Count。
使用CellRanger软件套件(v6.1.1)处理测序读数,该读数将读取与人类参考基因组(版本:refdata-Gex-Gex-Gex-Gex-Gex-Gex-grech38-2020-A)保持一致,并最终产生了基因 - barcode Matrix。为了进行质量控制,然后将矩阵导入到r软件包seurat(v4.3.0)中。12为了消除由于随机噪声而识别的基因,排除了少于三个细胞的计数的基因。为了消除次优质的细胞,使用标准(例如基因数量,独特的分子识别剂计数(UMIS),核糖体基因的比例以及线粒体基因的比例)进行过滤。表S2中提供了应用于每个样品的阈值。为了进一步去除双子体,如果通过scrublet(v0.2.3)13> .3预测的双重分数,则将细胞排除在外。
目标:为来自拉丁美洲国家的研究生和年轻研究人员提供单细胞转录组学和蛋白质组学的基础知识。在此课程中,参加者将学习如何使用可用的基于R的计算和统计方法来分析免疫细胞数据集。该课程的组织方式是在早晨,在聆听主题演讲者的工作之后,将讨论不同技术的理论方面,在下午,计算和统计方法的专家将提供个性化培训,以分析免疫细胞数据集(来自文献或早晨暴露的论文)。尽管在过去几年中已经实施了几门虚拟课程,但我们仍然认为面对面的会议允许最大程度的互动。因此,下午的会议将以一个教授/组织者将协助一组4-5名学生的方式组织。将向每个组提供一组带有相关数据集的纸张,并在课程期间分析,并将在最后一天评估结果的最终介绍。重点将放在实施常用的软件和管道上(例如Cellranger,Seurat,ArchR)。我们期望为早期研究人员和学员创造一个培养和支持的环境,从而影响我们的研究,教学和卫生系统的质量。