摘要背景:基因设计的嵌合抗原受体(CAR)T淋巴细胞是有希望的癌症治疗工具。目前批准了四种汽车T细胞药物,包括Tisagenlecleucel(Tisa-Cel)(Tisa-Cel)和Axibabtagene-Ciloleucel(AXI-CEL),所有靶标CD19都被批准用于治疗B细胞恶性肿瘤。流式细胞仪(FC)仍然是使用重组生物素化靶蛋白的单层CAR T细胞的标准。尽管如此,需要其他工具,而挑战是开发一种简单,相关,高度敏感,可重现和廉价的检测方法。分子工具可以满足这种需求,以特别监视长期持续的汽车T细胞。方法:基于2个实验性CAR T细胞构建体IL-1RAP和CS1,我们设计了2个定量数字液滴(DDPCR)PCR分析。通过针对4.1BB/CD3Z(28BBz)或28/CD3Z(28Z)结面积,我们证明PCR分析可以应用于经过批准的CD19 CAR T药物。28Z和28BBZ DDPCR分析允许确定每个单元格的平均矢量拷贝数(VCN)。我们确认VCN取决于感染的多样性,并证实了我们的实验性或GMP样IL-1RAP CAR T细胞的VCN是否满足了临床部门的要求(<5 VCN/细胞),类似于批准的AXI-CEL或TISA-CEL药物。结果:28BBz和28Z DDPCR测定法应用于2个肿瘤(急性髓样白血病(AML)或多发性骨髓瘤(MM)异种移植物人源化NSG小鼠模型,使我们能够量化早期膨胀(到注射后的T细胞30)。最后,循环汽车T有趣的是,在初始膨胀之后,当肿瘤挑战循环的CAR T细胞时,我们注意到了第二个膨胀阶段。对骨髓,脾脏和肺的研究表明,在先前注射白血病细胞系的小鼠中,在这些组织中散布更多的CAR T细胞。
AmbientContribMaximum。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。2环境。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。5 AmbientContribsParse。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。8 Ambient -ProfileBimodal。。。。。。。。。。。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>10个环境回复融化。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>11个barcoderanks。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 14个嵌合龙。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div> 。 div>11个barcoderanks。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>14个嵌合龙。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>17个清洁量。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>19 defaultDrops。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>21个倒影器。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。23个空滴定。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。25个kenumyDropsCellranger。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。30 engodesequences。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。33 GET10xmolinFostats。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。34个hasheddrops。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。35 makecountmatrix。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>40个read10xCounts。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>42 read10xmolinfo。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>45个重新效果。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。47 removeAmbience。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。48个交换。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。50 write10xcounts。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。53
hal是一个多学科的开放访问档案,用于存款和传播科学研究文件,无论它们是否已发表。这些文件可能来自法国或国外的教学和研究机构,也可能来自公共或私人研究中心。
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Théo Liénard——市长、Myriam Taverna、Stéphanie Descroix、Thanh Duc Mai。用于样品处理、分离和定量的微尺度电泳中的液滴接口策略:综述。 Analytica Chimica Acta,2021,1143,第 281-297 页。�10.1016/j.aca.2020.09.008�。 �第 03493600 页�
人多能干细胞(HPSC)的基因组完整性对于研究和临床应用至关重要。然而,在HPSC产生和常规培养物以及基因编辑后,遗传差异可能会积累。应定期监测它们的发生,但是评估HPSC基因组完整性的当前测定法不完全适合这种常规筛查。为了解决这个问题,我们首先对100多个出版物和鉴定的738例复发遗传异常(即至少在至少有5个不同的不同科学出版物中发现的重叠异常重叠)进行了大规模荟萃分析。然后,我们基于液滴数字PCR技术开发了一项测试,该测试可能可能检测到从培养上清液样品中提取的DNA中,这些HPSC复发遗传异常的90%以上。该测试可用于常规筛选HPSC中的基因组完整性。
液滴数字PCR(DDPCR)已成为分子诊断中的一种变革性技术,在核酸定量中具有无与伦比的灵敏度和精度。通过将样品划分为数千滴,DDPCR可以实现数字方法进行DNA和RNA分析,克服传统PCR方法的局限性。这种微型审查强调了DDPCR在肿瘤学中的关键进步和应用,包括其在检测循环肿瘤DNA(CTDNA),拷贝数变化(CNV)和表观遗传生物标志物方面的效用。该技术鉴定罕见的遗传事件和Moni Tor肿瘤异质性的能力对癌症的诊断,治疗和监测产生了重大影响。此外,DDPCR在非侵入性液体活检中的作用及其在新兴领域的应用,例如CAR-T治疗监测和肿瘤微生物组分析,证明了其广泛的临床潜力。尽管诸如标准化和成本等挑战,但多重和自动化方面的持续进步有望扩大DDPCR的范围,从而进一步增强了其对个性化医学和分子肿瘤学的贡献。
图 1:t = 0 时初始模拟配置的正面和顶视图(Pb 原子为灰色;Cu 原子为黄色)。该图为 R 0 = 42 nm 液滴,其中两个 Cu 粒子与 Cu (001) 表面接触,扩散方向沿 x 轴,自由表面法线沿 z 轴,液滴和粒子的圆柱轴均沿 y 轴对齐。模拟单元的周期性重复长度设置为 L x = 300 nm 和 L y = 5 nm。
最初发表于:Saddiqi, Naeem-ul-Hasan;Seeger, Stefan (2020)。液滴辅助生长和成型氧化铝和混合氧化铝-硅一维纳米结构。胶体和界面科学杂志,560:77-84。DOI:https://doi.org/10.1016/j.jcis.2019.09.122
