成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制,古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可以重新用于其他功能,包括哺乳动物系统的基因组工程,例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列,能够识别和切割特定基因 (3,5)。
背景:将细菌疫苗用作潜在的基于细菌的癌症治疗(BBCT)提出了一种创新的方法,将这些疫苗转化为能够在医学中发挥双重作用的多功能工具。材料和方法:这项研究旨在进行体外,免疫独立的实验,以研究疫苗衍生的细菌毒素在各种癌细胞系上的抗癌特性。在两个癌细胞系(SKG和HCG和HCG)和一个正常的大鼠胚胎纤维纤维分布(Ref)细胞系(SKG和HCG)(SKG和HCG)上测试了六个浓度的DTP疫苗(5 x 10 -4,25 x 10 -4,25 x 10 -4,25 x 10 -4,125 x 10 -6,625 x 10 -7,312 x 10 -7,312 x 10 -7和15 x 10 -6 µg/ml)。使用晶体紫色测定法对细胞毒性作用进行了评估,以确定每种毒素浓度的细胞死亡百分比,从而导致IC 50值的计算。凋亡作用和其他细胞病理学变化。结果:发现细菌毒素对SKG和HCAM癌细胞系的显着毒性作用(P <0.001)。相比之下,对正常REF细胞系的毒性作用仅在最高的毒素浓度下才有明显。显微镜分析显示,用毒素处理的癌细胞的细胞学变化明显,对正常细胞的影响最小。