仅用于研究使用。不适用于诊断程序。©2023 Thermo Fisher Scientific Inc.保留所有权利。除非另有说明,否则所有商标都是Thermo Fisher Scientific及其子公司的财产。col121894 1223
已批准。但是,DHR注册号。阿萨姆邦Bodoland University的IEC 应提交给ICMR。 外国资金应由资助机构在大学账户中的使用印度PI用于研究项目中的利用率。应提交给ICMR。外国资金应由资助机构在大学账户中的使用印度PI用于研究项目中的利用率。
仅批准仅批准班加罗尔的圣约翰医学院医院,卡纳塔克邦,阿马拉医学科学学院,喀拉拉邦,贾瓦哈拉尔研究生医学教育与研究研究所,本德迪切里和政府医学院,特里万德鲁姆。
已批准加尔各答塔塔医学中心;整个印度医学科学研究所Rishikesh;孟买D Y Patil医院和医学院博士;卡尔纳尔(Karnal)Kalpana Chawla政府医学院;圣约翰医学院医院;班加罗尔和政府医学院仅限;遵守以下内容:
人类间充质干细胞 (hMSC) 已显示出沿着不同间充质谱系自我更新和自我分化的潜力,这有助于组织的再生和维持 1。基于分化潜力,hMSC 被视为间充质组织损伤和造血障碍治疗的候选细胞 2。hMSC 已显示出通过增加组织修复、血管生成和减少炎症来促进伤口愈合的能力 3。然而,如果没有生化或生物材料的辅助,hMSC 到达目标组织并在所需位置发挥作用的效率很低 4。虽然已经利用各种工程支架来吸引 hMSC 粘附到病变上,但一些部位,例如长骨中部的生长板骨折,不易通过传统的预制支架到达,因为它们可能无法完美地贴合形状不规则的受伤部位。
摘要。增加IL-15和IFN-γ的特征是氟康唑相关的脱发(FRA)。缺氧间充质干细胞(HMSC)的分泌组具有抗炎能力,可以用作脱发治疗。因此,该研究旨在确定HMSC的局部施用对雄性Wistar大鼠的IL-15和IFN-γ基因表达和秃头的局部施用,这是FRA的模型。MSC,在缺氧下培养24小时,并产生一个无菌的分泌组,以水性凝胶软膏进行治疗。总共将24只男性Wistar大鼠分为四组:K1仅用于安慰剂给药的健康控制; K2用于阴性对照,其中包含FRA大鼠通过从第7至14天施用氟康唑,并继续安慰剂给药到第29天;对用200 mg/天的局部凝胶治疗的FRA大鼠组进行了处理,其中含有10%的HMSC Sectionome,用于K3和20%的HMSCS分泌组。观察,以使用qPCR分析头发生长以及IL-15和INF-γmRNA表达。分析显示,局部HMSCS Sertectome Gel给药后,IL-15和IFN-γmRNA表达显着降低(P≤0.001),秃头降低高达60%。显着的结果是局部凝胶含有HMSC的20%。基于研究结果,含有20%HMSC分泌组的局部凝胶剂量对改善FRA的状况具有最佳影响。这项研究可能有助于优化HMSC分泌疗法中的剂量和治疗方法。
植物病毒纳米颗粒(VNP)经过基因工程为呈现成骨的提示提供了一种有前途的方法,用于在骨组织工程中生物功能化水凝胶。柔性马铃薯病毒X(PVX)纳米颗粒通过呈现RGD基序,羟基磷灰石结合肽(HABP),OREDECTERTY PORIDGLUTAMATES(ORSECTAINS POLITGLUTAMATES(E8)依赖性依赖性依赖性依赖性依赖性的方式),从而大大增强了人间充质干细胞(HMSC)的附着和区分。因此,假设烟草病毒纳米颗粒的功能性肽是PVX的1.6倍,将产生这种影响。这项研究假设在涂有两个VNP的含有两个VNP的肽的表面上培养HMSC,用于细胞附着或矿化,可以进一步增强对骨生成的影响。通过不同的HMSC沉积的钙矿物质增加了两到三倍,而在PVX-RGD/PVX-HABP涂层上生长的HMSC的碱性磷酸酶活性显着超过任何其他VNP组合。通过使用具有不同功能的VNP的组合,在第一次观察到了上添加效应。发现,富裕的VNP几何形状比功能性肽的浓度更为关键。总而言之,各种呈肽的植物VNP表现出增强的增强作用,其显着潜力可有效地在骨组织工程中官能化富含细胞的水凝胶。
摘要:纳秒电磁脉冲对人类健康,尤其是在人类细胞中形成自由基的影响,是持续研究和正在进行的讨论的主题。这项工作介绍了对人间充质干细胞中单个高能电磁脉冲对形态,生存能力和自由基产生的影响的初步研究(HMSC)。将细胞暴露于单个电磁脉冲中,电场幅度为〜1 mV/m,脉冲持续时间约为〜120 ns,由600 kV的马克思发生器产生。分别使用共聚焦荧光显微镜和扫描电子显微镜(SEM)检查暴露后2小时和24小时的细胞活力和形态。用电子顺磁共振(EPR)研究了自由基的数量。显微镜观测和EPR测量表明,与对照样品相比,对高能电磁脉冲的暴露均未影响产生的自由基的数量,也没有在体外的HMSC形态。
ssouth@uoregon.edu 披露:Sanique South (N)、Yan Carlos Pacheco (N)、Levi Wood (N)、Nicholas Hannebut (N)、Cindy Brawner (N)、Matlock Jeffries (N)、Nick Willett (N) 简介:全球有数百万人患有创伤后骨关节炎 (PTOA),它是美国导致残疾的主要原因之一。此外,目前尚无已知的治愈方法或疾病改良疗法来阻止 PTOA 进展。细胞疗法在临床前研究中通常显示出巨大的潜力;然而,临床试验显示结果差异很大。这种差异被认为部分来自供体之间细胞效力的高度异质性以及宿主环境的多变性。了解供体人类间充质细胞 (hMSCs) 的可靠性和效力是确保 PTOA 获得一致和优化的治疗结果的关键步骤。 DNA 甲基化和去甲基化在调节 MSC 再生和免疫调节中发挥作用。然而,甲基化在 MSC 调节中的确切作用,以及基线表观遗传模式是否有助于预测关键治疗特性尚不完全清楚。为了弥补这些知识空白,本研究旨在基于基线表观遗传特征和结构结果建立供体 hMSC 治疗效力的预测模型,以研究可修改的细胞靶点,确保细胞治疗获得更好且一致的治疗结果。我们假设,与预测的治疗效果较差的 hMSC 相比,预测的治疗性 hMSC 将表现出独特的表观遗传特征。方法:体外研究:从 RoosterBio 和 Lonza 购买骨髓衍生的 hMSC。将来自 12 位供体的 hMSC 培养 24 小时(RoosterNourish TM -MSC 培养基,RoosterBio;MSCGM™ 间充质干细胞生长培养基,Lonza)。收获细胞并使用 Qiagen DNEasy 试剂盒提取 DNA。DNA 经过亚硫酸盐转化(每个样本 500ng,Zymo EZ DNA 甲基化试剂盒),然后加载到 Illumina Infinium HumanMethylation EPIC 阵列上,该阵列可以量化整个基因组中的 >850,000 个 CpG 位点,包括外显子、内含子和基因间区域。使用 R(v. 4.4.0)进行统计分析。使用 ChAMP 包(v.3.14)加载和处理原始 .IDAT 文件。首先加载原始阵列数据,并将 CpG 位点甲基化数据转换为 beta 值(0-1 甲基化值估计值表示给定 CpG 位点甲基化与未甲基化探针强度之比)。然后使用默认选项的 champ.norm 函数使用 beta 混合分位数归一化程序对 beta 值进行归一化。排除以下情况:(1)检测 P ≥0.01 的探针、针对非 CpG 位点的探针、位于性染色体上的探针,以及在CpG 探针 3' 端 5bp 范围内具有已知单核苷酸多态性的探针,其次要等位基因频率≥1% [1] (N=158,841)。对于模型开发,使用具有自动特征选择的 glmnet 包 (v. 2.0-16) 开发了弹性网络正则化广义逻辑模型。通过 3 倍内部交叉验证调整模型,并记录性能特征。由于发现几个 CpG 位点是再生能力的完美预测因子,我们随后执行了逐步减少数据集的方法,其中,在每一轮开发之后,从数据集中删除最终模型中包含的特征并重新进行开发,总共 50 轮开发周期。所有 50 轮中的所有模型都表现完美(AUC=1.0),可能是因为样本量相对较小而过度拟合。使用在 MATLAB(Mathworks)中生成的 PLSDA 和 PLSR 模型来识别治疗性 hMSC,并使用分泌的细胞因子水平读数作为独立变量,以不同的 hMSC 供体/治疗作为二元结果变量,对来自初始体外研究的 z 分数数据进行训练。使用已建立的内侧半月板横断面 (MMT) 临床前大鼠模型,在 PTOA 的体内临床前模型中验证了预测的治疗性 hMSC(图 1A)。结果:初步研究的数据用于训练 PLSR 预测统计模型。预测模型预测前瞻性地揭示了沿 LV 轴 1 分离的大约六个供体的 hMSC,预测与治疗效果相关,从而预测治疗效果较差和治疗效果较强的供体;因此,6 个样本被指定为可能的“反应者”,6 个被指定为可能的“无反应者”(图 1B)。在甲基化分析中,我们发现在 50 轮开发周期中选定了 119 个 CpG 位点。所有位点均存在显著差异甲基化(P 值 7.5E-8 至 4.1E-4)。与无反应者相比,应答者中大约一半的 CpG 为高甲基化(n=45),其余为低甲基化(n=43)。应答者与无反应者之间平均甲基化值差异最大(Δβ 最高)的 CpG 位点包括 cg14705220(Δβ=0.25 应答者-无反应者 [应答者高甲基化],P =4E-4)和 cg09382002(Δβ=-0.23,P =3E-4 [应答者低甲基化]),图 2。然后,我们对与这些差异甲基化位置相关的基因进行了通路分析。 119 个 CpG 定位到 88 个已知基因。这些基因在 T 细胞信号转导(IL-7 信号转导通路,P =2.27E-3)、吞噬细胞:NK 细胞相互作用(IL-15 产生,P =8.13E-3)和 B 细胞信号转导(April 介导信号转导 P =8.69E-3、B 细胞活化因子信号转导 P =9.09E-3)中的重要通路中富集。有趣的是,差异甲基化基因组位置中富集程度最高的基因网络集中在几个已知的 OA 效应物周围,包括 NFkB 复合物、组蛋白去乙酰化酶 (HDAC) 和机械感受器 (TRPV1) 等 (图 3)。讨论:甲基化数据结果支持了我们的假设,即预测的治疗性 hMSC 将表现出独特的表观遗传特征。我们的数据表明,基于来自 hMSC 的混合细胞 DNA 甲基化数据的模型可以很容易地区分可提供治疗益处的细胞产品和不会提供治疗益处的细胞产品。这些差异甲基化模式中涉及的基因在先前在 OA 中描述的途径中富集。意义/临床意义:DNA 甲基化分析可能有助于在膝关节 OA 关节内注射前筛选 hMSC 供体,以最大限度地提高临床益处。此外,进一步研究我们发现的驱动表观遗传差异的个体细胞亚群可能会揭示出可用于开发未来膝关节 OA 疗法的新途径。致谢:本研究得到了俄勒冈州吴仔人类表现联盟的支持。
简介:在LN2蒸气环境中,通常将细胞治疗产物在-150°C下进行或以下储存。最佳实践通常建议在水的玻璃过渡(TG)下方存储约-135°C。在常规样品访问期间,这是产品正常生命周期的一部分,成千上万的相邻(无辜)样品在各种不受监视的持续时间内暴露于环境温度。这种暴露可以代表冰柜和环境环境之间的 +200°C梯度。有限的实验研究监测这些温度偏移的影响以及TG的穿越对治疗细胞的恢复和生存能力。温度循环被认为会降低细胞活力,因为它诱导了细胞上的热循环应力。本文的目标是测试并证明储存温度和热循环对人类间充质干细胞(HMSC)(HMSC)在15个月内的融化恢复和生存能力的影响。为了进行这些实验,使用封闭系统的低温小瓶评估了系统,即-190°C低温自动储存系统,-80°C Ult Freezer和低温载体。在ISCT 2016 1显示了储存前三个月后的该实验的结果。材料: