InvivoGen 的可定制 PRR 筛选服务使用经过改造的 HEK293、THP-1 或 A549 报告细胞来检测关键免疫通路的激活剂或抑制剂。我们的定制检测采用 SEAP 和/或 Lucia® 荧光素酶报告基因来评估 NF-κB 和 IRF 通路活性,可提供精确的数据,加速先导化合物的发现。
炎性症是在感测各种外源和内源性刺激的情况下形成的多蛋白平台,并触发了IL-1β和IL-18的释放以及凋亡细胞死亡。Intivogen提供了一系列细胞系,可研究NLRP1,NLRP3,NLRC4或caspase-4炎症体。可以使用荧光或在培养上清液中使用IL-1β和IL-18报告基细胞在原位监测这些炎症体的激活(请参阅第8页)。
NF-κB报告基因测定。根据THP-1-蓝色NF-κB细胞和Quanti-Blue试剂制造方案(Invivogen)进行。菌落成型单元(CFU)。主要的AML患者样品是从发现生命科学(DLS)获得的,并在甲基纤维素测定中进行了测试。生化和基于细胞的激酶抑制测定。激酶抑制数据和基于细胞的激酶测定是使用RBCHotSpot®激酶和Nanobret®分析获得的,分别在Rectionbio(Malvern,PA)上进行。结合动力学测定。使用KineticFinder®TR-FRET分析在酶logic上进行。异种移植。生存分析在用Molm14 Flt3-ITD(D835Y)细胞的NSG-SGM3小鼠中进行。药代动力学筛查和离子通道面板。测试是在Pharmaron进行的。rnaseq。THP-1细胞在液体培养中进行24小时。 提取总RNA,并以每个样品的30m读取进行RNASEQ。 统计分析。 使用GraphPad Prism绘制了所有数据,并使用t检验确定统计显着性。THP-1细胞在液体培养中进行24小时。总RNA,并以每个样品的30m读取进行RNASEQ。统计分析。使用GraphPad Prism绘制了所有数据,并使用t检验确定统计显着性。