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Doell，K。C.，Berman，M。G.，Bratman，G。N.，Knutson，B.，Kühn
发展基因组编辑体现了生物复杂性的演变：为什么某些真核生物携带额外的遗传物质，这些遗传物质是在性爱后以复杂，昂贵且时间的消耗方式进行的？纤毛是该现象的最佳研究模型之一，但是，本研究报告了一个无法检测到的广泛编辑的物种，但是尽管如此，它仍然在DNA修饰和染色质之间存在实质性差异，并在其主动转录的体细胞核和无声生殖线核之间保持了差异。这表明，广泛的基因组编辑不是纤毛核功能分化的先决条件，并挑战了有关编辑的常规理论：作为对移动元素的防御是必要的，并且由于进化棘轮而获得的编辑，就不会丢失。
DOI: 10.29261/pakvetj/2021.053 利用 CRISPR/Cas9 和 Cre/Lox 构建针对伪狂犬病毒的三基因删除活疫苗候选物
当前市场上销售的伪狂犬病毒（PRV）疫苗的免疫保护效果逐渐降低，并未能对新型PRV变种提供完全保护。本研究利用CRISPR/Cas9和Cre/LoxP基因编辑系统及低熔点琼脂糖纯化法，同时敲除三种主要毒力基因（gE/gI和TK），成功构建了三基因删除活毒株rZDΔTK-gE-gI。接种rZDΔTK-gE-gI PRV候选疫苗的3周龄仔猪在感染PRV强毒株后均存活，且未出现任何临床症状，而所有未接种疫苗的仔猪均出现PRV呼吸道和神经系统症状，感染后7天内死亡率100％。 rZDΔTK-gE-gI候选疫苗在接种仔猪后诱导出高水平的抗gB抗体，其免疫保护效果优于经典毒株Bartha-K61。因此，三基因缺失活PRV候选疫苗有望控制目前由PRV变异株引起的伪狂犬病疫情。
利用 CRISPR-Cas9 和 Cre-Lox 系统在天然启动子的控制下生成条件突变敲入
通过产生突变来调节基因活性对理解蛋白质功能做出了重大贡献。然而，突变分析通常使用过表达研究，其中蛋白质脱离了其正常的环境和化学计量。在目前的研究中，我们试图开发一种方法，同时使用 CRISPR/Cas9 和 Cre-Lox 技术来修改内源性 SAT1 基因，以引入蛋白质的突变形式，同时仍受其天然基因启动子的控制。我们通过转录终止元件克隆了野生型 (WT) SAT1 的 C 末端部分，并在关键结合位点包含点突变的相同版本 SAT1 前面与 LoxP 位点相邻。在 CRISPR/Cas9 诱导的 DNA 双链断裂后，通过非同源末端连接 (NHEJ) 将构建体插入内源性 SAT1 基因座。在确认插入事件不会改变 SAT1 的正常功能后，我们便能够通过引入 Cre 重组酶来评估点突变的影响。因此，该系统能够生成内源性 WT SAT1 可以有条件地修改的细胞，并允许在正常启动子和染色质调节的背景下研究位点特异性突变的功能后果。
手动 Loxone Air 收发器模块 - FCC 报告
重要提示：本设备已经过测试，符合 FCC 规则第 15 部分对 B 类数字设备的限制。这些限制旨在为设备在商业环境中运行时提供合理的保护，防止有害干扰。本设备会产生、使用并辐射射频能量，如果不按照说明手册安装和使用，可能会对无线电通信造成有害干扰。在住宅区操作本设备可能会造成有害干扰，在这种情况下，用户需要自行承担纠正干扰的费用（FCC 第 15.105 节）。