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体积 *试剂最终浓度12.5μlPPP主混合1倍PPP主混合物不含MGCL 2(75 mm Tris-HCl,pH 8.8,无MGCL 2(25 O C),20 mm,20 mm(NH 4)2 sO 4,0.01%,0.01%Tween 20,200μmDatp,200μmDctp,200μmDctp,200μmdgn,200μmdgn,theq,200μmdnumtheq,theq,200μmdnumtheq,theq,200μmdnumtheq,theq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq 200 m少量增长很高。 polymerase, stabilizers and additives) 2.5 μl 25 mM MgCl 2 2.5 mM MgCl 2 1 μl Forward primer 0.1 - 1 μM (~ 20 bases in length) 1 μl Reverse primer 0.1 - 1 μM (~ 20 bases in length 1 μl Template DNA 7 μl PCR H 2 O to a final volume 25 μl *Different volumes can be used, but PPP Master Mix without MGCL 2最终应稀释两次
16. 摘要 科罗拉多州交通部多年来一直使用 MgCl 2 进行防冰和除冰。有人担心这些化学物质可能会影响汽车和卡车的各种部件。在科罗拉多大学博尔德分校材料实验室进行的这项实验研究中,选择了汽车行业的代表性金属,以比较它们在暴露于除冰盐 NaCI 和 MgCh 时的腐蚀行为。在测试过程中使用了试剂级 MgCh 和 CDOT 使用的 MgCh(含有腐蚀抑制剂)。对选定的金属采用了两种测试方法:SAE 12334(加速循环测试);和 ASTM B 117(连续喷涂测试)。SAE 12334 的测试环境提供了循环暴露,这更好地模拟了实际使用条件。尽管 CDOT 规范规定氯化镁的腐蚀性必须比氯化钠低 70%,但 SAE J2334 获得的实验结果表明,MgCl 2 对测试的裸露金属的腐蚀性比 NaCl 更强。腐蚀程度各不相同,对于某些金属只有轻微差异,而对于 SS410 则高出 13 倍。与 SAE 12334 的结果相比,ASTM B 117 的实验结果显示出不一致,尤其是对于不锈钢 SS410,NaCI 对其的腐蚀性比 MgCI 2 更强。实验还表明,在三种情况下,MgCl 2 和 NaCl 的混合物对金属的腐蚀比单一盐(MgCl 或 NaCl)略高
钙的溶解盐,例如CaCl 2,CA(HCO 3)2,Caso 4等。和镁(如MGCL 2,Mg(HCO 3)2,MGSO 4等)的镁。和其他盐的痕迹使水很难。
图3。增加MGCL₂浓度对目标下90%的扩增的影响。富裕的s。金黄色葡萄球菌gDNA靶序列使用Phusion Plus Plus DNA聚合酶在Proflex PCR系统上进行扩增。每个20 µL反应含有10 ng的s。金黄色葡萄球菌和另外1 mm,1.5 mm,2 mm或2.5 mmmgcl₂。热循环条件:98°C的30秒;在98°C,最佳退火温度下10秒的10秒循环(表4),在64°C时为1分钟/kb;在64°C下5分钟。PCR产品以2%E-Gel 48含Sybr安全染色的琼脂糖凝胶运行。车道M:E-GEL 1 KB Plus Express DNA梯子。
化学和解决方案。氯化镁(MGCL 2),碳酸氢铵(NH 4 HCO 3),L-甘氨酸,Trizma®碱基,Tween-20,乙醇胺(EA),N-(3-二甲基氨基氨基丙基)-N'-乙基甲基二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二酰基(EDC) bovine serum albumin (BSA), sodium hydroxide, sodium chloride, 4-morpholineethanesulfonic acid monohydrate (MES), hydrochloric acid, formic acid (FA), streptavidin-alkaline phosphatase from Streptomyces avidinii conjugate (Strep-ALP) and lysozyme from chicken egg white were purchased from Merck (意大利米兰)。磷酸钾(KH 2 PO 4),二氯磷酸二硫酸氢钾(K 2 HPO 4),磷酸钠二迪巴斯二硫酸二硫代十二碳水化酸盐(Na 2 HPO 4·12H 2 O),氯化钾和无rnase含水量和无RNase水的含量是从Carlo Erba(Cornaredo Erba(Cornaredo)(Cornaredo)(Cornaredo)(Cornaredo)(Cornaredo),Milan,Milan,Milan,Milan,Milan,Italan,Italan,Italy。氢喹酮双磷酸(HQDP)由Metrohm Italiana(Origgio,意大利Varese)提供。通过Milli-Q Element A10系统(Millipore,旧金山,加利福尼亚州,美国)获得了去离子水,并用于缓冲溶液制备。缓冲溶液的组成如下。无RNase缓冲液用于所有RNA适体的实验中。单链DNA序列购自Biomers.net(德国ULM),而C80RNA序列是从代替(Carlo Erba,Carlo Erba,Milan,意大利)。所有的寡核酸均处于干燥状态,适当地等分以避免反复的冻结/解冻周期。在Milli-Q水中以DNA寡核素进行了冻干等分试样的重悬,而C80RNA的无RNase水中的水则达到了供应商建议的100μM终浓度。库存溶液存储在-20°C。MES缓冲液:25毫米ME(pH 5.0); Tris缓冲液:0.1 MTrizma®基础,5 mm MGCL 2(pH 7.4); TRIS-T缓冲液:0.1 MTrizma®基础,5 mm MGCL 2,0.05%w/vtween®20(pH 7.4); TRIS盐水缓冲液:20 mMTrizma®基础,5 mM MGCL 2,0.1 M NaCl(pH 7.4);含镁离子(PBS-MG 2+)的磷酸盐缓冲盐盐水:1.5 mm kH 2 PO 4,8 mm Na 2 HPO 4,137 mm NaCl,2.7 mm KCl,1 mm MGCL 2(pH 7.4);从Thermo Fisher Scientific(美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)购买磷酸盐缓冲盐水(PBS)作为干燥粉末,其溶解后具有以下成分:0.1 m Na 2 HPO 4,0.15 m NaCl(pH 7.2); Tris甘氨酸钾(TGK)缓冲液:25 mMTrizma®基础,192 mm L-甘氨酸,5 mm K 2 HPO 4(pH 8.3)。
16.摘要 该项目包括两个阶段。在第一阶段的研究中,通过 SAE J2334 试验和 ASTM B117 试验检查了两种盐的相对腐蚀性。在第二阶段的研究中,应用了 SAE J2334 试验和 NACE TM -01-69 试验(经太平洋北部各州修改)。该项目检查的代表性金属包括 410 和 304L 不锈钢、2024 和 5086 铝、涂层汽车车身板、铜线和低碳钢。SAE J2334 试验的实验结果表明,MgCl 2 对测试的裸露金属的腐蚀性比 NaCl 更强。然而,ASTM B117 试验的实验结果却得出了相反的结论。由于结论相矛盾,进一步使用 NACE TM -01- 69(经太平洋西北雪地战士修改)进行了试验。SAE J2334 和 NACE TM-01-69 试验再次得出了相反的结论。为了调查造成不一致的原因,修改了 SAE J2334 和 NACE TM-01-69 试验的实验条件,并对两种试验进行了各种修改模式。发现试验结果不一致不是由于氯化物溶液的化学浓度不同、浸泡时间不同、试验时间不同或试验温度不同造成的。不一致是由于高湿度环境下两种盐的湿度条件不同和性质不同造成的。该项目所采用的三种测试方法,有三种基本湿度条件:干、湿(饱和湿度)、浸(浸没)。17.由于MgCl 2溶液比NaCl溶液具有更高的粘度和更强的亲水性,MgCl 2溶液在干燥条件下更容易粘附并结晶在金属表面,然后在潮湿条件下变成金属表面的溶液。这种干湿效应导致MgCl 2在不同测试条件下的腐蚀行为不同。因此,根据汽车部件所经历的使用条件,在潮湿环境下MgCl 2比NaCl更具腐蚀性,而在浸泡和干旱环境下NaCl更具腐蚀性。该结论是基于对科罗拉多州使用的除冰盐的实验得出的。实施研究的结果导致CDOT使用的除冰化学品的规格发生变化。新的腐蚀性规范要求 CDOT 使用的氯化镁对铝和不锈钢的腐蚀性不大于氯化钠,经 NACE TM -01-69 方法测试。关键词 环境、冬季维护、除冰、氯化镁、氯化钠、腐蚀
注意:可以通过将RNTP浓度提高到4 mm,可以获得更高的RNA产量。MGCL浓度也应提高到20mm(高于16毫米的总RNTP浓度4 mm)。
ID号 5200100帽颜色红色含量2 x 1.25 ml密钥特征TAQ DNA聚合酶2X主混合物是一种现成的2X反应混合物,与AmpliQON TAQ DNA聚合酶,NH 4 +缓冲液系统,DNTPS,DNTPS和氯化镁存在。 每个反应需要25 µL 2倍主混合物。 只需将底漆,模板和水添加到50 µL的总反应量中,即可成功执行底漆延伸和其他分子生物学应用。 TAQ DNA聚合酶2X主混合物提供了几个优点。 设置时间大大减少。 消除了污染组件股票的机会。 减少试剂处理步骤可更好地可重复性。 可以信心设置标准测试,即结果每次都会保持一致。 TAQ DNA聚合酶2x主混合物(1.5 mm MGCL 2最终浓度)的组成Tris-HCl pH 8.5,(NH 4)2 S0 4,3 mm mgcl 2,0.2%tween。ID号5200100帽颜色红色含量2 x 1.25 ml密钥特征TAQ DNA聚合酶2X主混合物是一种现成的2X反应混合物,与AmpliQON TAQ DNA聚合酶,NH 4 +缓冲液系统,DNTPS,DNTPS和氯化镁存在。每个反应需要25 µL 2倍主混合物。只需将底漆,模板和水添加到50 µL的总反应量中,即可成功执行底漆延伸和其他分子生物学应用。TAQ DNA聚合酶2X主混合物提供了几个优点。设置时间大大减少。消除了污染组件股票的机会。减少试剂处理步骤可更好地可重复性。可以信心设置标准测试,即结果每次都会保持一致。TAQ DNA聚合酶2x主混合物(1.5 mm MGCL 2最终浓度)的组成Tris-HCl pH 8.5,(NH 4)2 S0 4,3 mm mgcl 2,0.2%tween。
注意:通过将 rNTP 浓度分别提高至 4 mM,可以获得更高的 RNA 产量。MgCl 浓度也应提高至 20mM(比总 rNTP 浓度 16 mM 高 4 mM)。