4。(Enem 2011)如今,我们可以说,几乎所有人类都听过DNA及其在大多数生物的遗传中的作用。但是,直到1952年,沃森和克里克的双螺旋桨DNA模型描述的前一年,毫无疑问,这是DNA是遗传物质。在Watson和Crick描述DNA分子的文章中,他们提出了该分子应如何复制的模型。在1958年,梅塞尔森(Meselson)和斯塔尔(Stahl)使用沉重的氮同位素进行了实验,这些同位素被纳入氮基碱基,以评估分子复制的发生方式。从结果来看,他们证实了沃森和克里克所建议的模型,沃森和克里克的基本前提是氮碱基之间的氢桥的破裂。
4。(Enem 2011)如今,我们可以说,几乎所有人类都听过DNA及其在大多数生物的遗传中的作用。但是,直到1952年,沃森和克里克的双螺旋桨DNA模型描述的前一年,毫无疑问,这是DNA是遗传物质。在Watson和Crick描述DNA分子的文章中,他们提出了该分子应如何复制的模型。在1958年,梅塞尔森(Meselson)和斯塔尔(Stahl)使用沉重的氮同位素进行了实验,这些同位素被纳入氮基碱基,以评估分子复制的发生方式。从结果来看,他们证实了沃森和克里克所建议的模型,沃森和克里克的基本前提是氮碱基之间的氢桥的破裂。
基本所有者程序。分子生物学研究领域。<生物学的女主角教条。分子生物学中最常用的测量单元。c ristalloghich to x -rays和分子建模。x体晶体学。van der waals基于射线的模型。溶剂表面和浅表静电电位。氢桥线的结构几何形状。c核酸的结构射流。核苷和核苷酸。 磷酸化的脑结合和主要结构。 DNA二级结构。 DNA B和DNA A. RNA的二级和三级结构的结构参数。 基因组对DNA的 r恢复。 Meselson和Stahl实验。 冈崎的碎片。 大肠杆菌中的复制:首先,DNA聚合酶III,DNA聚合酶I,DNA Ligasi。 真核染色体DNA的复制:DNA Polimerasi alfa,DNA Polimerasi Delta,ribonucleasi H,Endonucleasi fen1。 人性线粒体DNA的复制。 端粒的作用。 的移动RNA的理解和成熟。 操纵子。 促进mRNA的结构。 RNA均值聚合酶和相对启动子。 cappuccio组。核苷和核苷酸。磷酸化的脑结合和主要结构。DNA二级结构。DNA B和DNA A. RNA的二级和三级结构的结构参数。 基因组对DNA的 r恢复。 Meselson和Stahl实验。 冈崎的碎片。 大肠杆菌中的复制:首先,DNA聚合酶III,DNA聚合酶I,DNA Ligasi。 真核染色体DNA的复制:DNA Polimerasi alfa,DNA Polimerasi Delta,ribonucleasi H,Endonucleasi fen1。 人性线粒体DNA的复制。 端粒的作用。 的移动RNA的理解和成熟。 操纵子。 促进mRNA的结构。 RNA均值聚合酶和相对启动子。 cappuccio组。DNA B和DNA A. RNA的二级和三级结构的结构参数。基因组对DNA的 r恢复。 Meselson和Stahl实验。 冈崎的碎片。 大肠杆菌中的复制:首先,DNA聚合酶III,DNA聚合酶I,DNA Ligasi。 真核染色体DNA的复制:DNA Polimerasi alfa,DNA Polimerasi Delta,ribonucleasi H,Endonucleasi fen1。 人性线粒体DNA的复制。 端粒的作用。 的移动RNA的理解和成熟。 操纵子。 促进mRNA的结构。 RNA均值聚合酶和相对启动子。 cappuccio组。r恢复。Meselson和Stahl实验。冈崎的碎片。大肠杆菌中的复制:首先,DNA聚合酶III,DNA聚合酶I,DNA Ligasi。真核染色体DNA的复制:DNA Polimerasi alfa,DNA Polimerasi Delta,ribonucleasi H,Endonucleasi fen1。人性线粒体DNA的复制。端粒的作用。的移动RNA的理解和成熟。操纵子。促进mRNA的结构。RNA均值聚合酶和相对启动子。cappuccio组。转录和多掺杂终止。内含物和剪接。RNA编辑。 Matui真核mRNA结构。 遗传密码。 RNA中基因组的 r。 pury-极性RNA复制机制(黄病毒,picornavirus,逆转录病毒),阴性极性RNA病毒,双丝细丝RNA病毒。 肝病病毒的特殊性。 的理解蛋白质。 运输RNA的结构和功能。 tRNA氨基acancezion。 <核糖体的分裂结构和功能特征。 将转化为过程和真核生物的开始。 <分配扩展翻译的阶段。 翻译的终止。 发射。 阅读阶段的滑动。 基因组序列的Nterpotation。 原核生物和真核编码基因的典型结构。 鉴定开放阅读方案(ORF),基因表达控制的内含子和元素。 基因表达的 r抑制。 调整了Procarials中转录开始的开始:组成型控制和调节控制。 真核生物中转录开始的开始。 家政和特定于织物的基因。 <结合DNA的蛋白质的分裂结构基序:螺旋螺旋螺旋,锌指,亮氨铰链。RNA编辑。Matui真核mRNA结构。遗传密码。RNA中基因组的 r。 pury-极性RNA复制机制(黄病毒,picornavirus,逆转录病毒),阴性极性RNA病毒,双丝细丝RNA病毒。 肝病病毒的特殊性。 的理解蛋白质。 运输RNA的结构和功能。 tRNA氨基acancezion。 <核糖体的分裂结构和功能特征。 将转化为过程和真核生物的开始。 <分配扩展翻译的阶段。 翻译的终止。 发射。 阅读阶段的滑动。 基因组序列的Nterpotation。 原核生物和真核编码基因的典型结构。 鉴定开放阅读方案(ORF),基因表达控制的内含子和元素。 基因表达的 r抑制。 调整了Procarials中转录开始的开始:组成型控制和调节控制。 真核生物中转录开始的开始。 家政和特定于织物的基因。 <结合DNA的蛋白质的分裂结构基序:螺旋螺旋螺旋,锌指,亮氨铰链。r。pury-极性RNA复制机制(黄病毒,picornavirus,逆转录病毒),阴性极性RNA病毒,双丝细丝RNA病毒。肝病病毒的特殊性。的理解蛋白质。运输RNA的结构和功能。tRNA氨基acancezion。<核糖体的分裂结构和功能特征。将转化为过程和真核生物的开始。<分配扩展翻译的阶段。翻译的终止。发射。阅读阶段的滑动。基因组序列的Nterpotation。原核生物和真核编码基因的典型结构。鉴定开放阅读方案(ORF),基因表达控制的内含子和元素。r抑制。调整了Procarials中转录开始的开始:组成型控制和调节控制。真核生物中转录开始的开始。家政和特定于织物的基因。<结合DNA的蛋白质的分裂结构基序:螺旋螺旋螺旋,锌指,亮氨铰链。染色质结构对基因表达的影响:组蛋白的乙酰化和扩展; DNA甲基化。由microRNA介导的天才沉默。<用于分析核酸的Diva Basic etohs。紫外光谱和量化
理学硕士 I 期 MM:75 分子生物学单元 1:基因组的结构和组织(8 小时)染色质组织 - 组蛋白和 DNA 相互作用组、染色质结构、核小体、染色质组织和重塑、染色体、异染色质和真染色质、扭转应力、DNA 拓扑结构 - 链接数、扭曲、扭动、超螺旋、拓扑异构体。第二单元:DNA复制、修复和重组(8 小时)DNA复制模型,Meselson 和 Stahl 实验,DNA聚合酶,病毒、细菌和真核生物中的 DNA 复制,复制叉,复制的校对和保真度,末端复制问题和端粒酶,复制抑制药物,DNA损伤剂,DNA修复机制(核苷酸切除修复、碱基切除修复、错配修复、重组修复、双链断裂修复、转录偶联修复、重组——同源、非同源和位点特异性重组)第三单元:基因表达和调控(8 小时)原核和真核基因的结构、调控区域、转录因子、转录机制、RNA聚合酶、RNA加工结构和不同 RNA 类型的功能、起始复合物的形成、延长、终止;操纵子概念-乳糖操纵子、色氨酸操纵子、arb操纵子、𝜆-阻遏物、lexA阻遏物、噬菌体的溶源性和溶解性循环、核糖开关、转录抑制剂。
1。Bertani,G。和Weigle,J.J。 (1953)J。细菌。 65,113–121。 2。 Luria,S.E。 和人类,M.L。 (1952)J。细菌。 64,557–569。 3。 Clouds,G.,Shichi,M.L。 和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国,47,869–878。 4。 Meselson,M。和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国47,857–868。 5。 课程,N.R。等。 al。 (1967)生物化学。 生物。 res。 公社。 28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。Bertani,G。和Weigle,J.J。 (1953)J。细菌。65,113–121。2。Luria,S.E。 和人类,M.L。 (1952)J。细菌。 64,557–569。 3。 Clouds,G.,Shichi,M.L。 和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国,47,869–878。 4。 Meselson,M。和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国47,857–868。 5。 课程,N.R。等。 al。 (1967)生物化学。 生物。 res。 公社。 28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。Luria,S.E。和人类,M.L。(1952)J。细菌。64,557–569。3。Clouds,G.,Shichi,M.L。 和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国,47,869–878。 4。 Meselson,M。和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国47,857–868。 5。 课程,N.R。等。 al。 (1967)生物化学。 生物。 res。 公社。 28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。Clouds,G.,Shichi,M.L。和Weigle,J.J。 (1961)natl。学院。SCI。 美国,47,869–878。 4。 Meselson,M。和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国47,857–868。 5。 课程,N.R。等。 al。 (1967)生物化学。 生物。 res。 公社。 28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。SCI。美国,47,869–878。 4。 Meselson,M。和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国47,857–868。 5。 课程,N.R。等。 al。 (1967)生物化学。 生物。 res。 公社。 28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。美国,47,869–878。4。Meselson,M。和Weigle,J.J。 (1961) natl。 学院。 SCI。 美国47,857–868。 5。 课程,N.R。等。 al。 (1967)生物化学。 生物。 res。 公社。 28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。Meselson,M。和Weigle,J.J。 (1961)natl。学院。SCI。 美国47,857–868。 5。 课程,N.R。等。 al。 (1967)生物化学。 生物。 res。 公社。 28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。SCI。美国47,857–868。 5。 课程,N.R。等。 al。 (1967)生物化学。 生物。 res。 公社。 28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。美国47,857–868。5。课程,N.R。等。al。(1967)生物化学。生物。res。公社。28,578–586 6。 公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。28,578–586 6。公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。公司,M.L.,Becker,A。和Hurwitz,J。(1967)Proc。natl。学院。SCI。 美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。SCI。美国58,240-247。 7。 代表,M。(1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。美国58,240-247。7。代表,M。(1967)Proc。natl。学院。SCI。 美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。SCI。美国57,148–155。 8。 Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。美国57,148–155。8。Olive,B.M。 和Lehman,I.R。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。Olive,B.M。和Lehman,I.R。(1967)Proc。natl。学院。SCI。 美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。SCI。美国57,1426–1433。 9。 Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国57,1021–1028。 10。 Line,S。和Arbre,W。(1968)Proc。 natl。 学院。 SCI。 美国59,1300–1306。 11。 史密斯,H.O。 和Wilcox,K.W。 (1970)J。Mol。 大。 51,379–391。 12。 Danna,K。和Nathans,D。(1971)Proc。美国57,1426–1433。9。Weiss,B。和Richardson,C.C。 (1967)Proc。 natl。 学院。 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DNA提取自1869年弗里德里希·米舍(Friedrich Miescher)首次试图隔离它以来,它已经走了很长一段路,意外地发明了一种核酸隔离方法,后来其他人会完善。该过程涉及分解细胞膜和核信封以获得DNA,这对于PCR,DNA克隆,测序和电泳等各种分子生物学应用至关重要。取决于样本类型 - 需要植物,血液,细菌或其他 - 需要不同的提取方法,每种方法都有自己的手术,以确保DNA的所需纯度和数量。从苯酚 - 氯仿等醇到蛋白酶K,CTAB,自旋柱,磁珠等等,存在各种技术,每个技术都基于样品的特定要求选择。DNA提取的故事是连续的创新和精致之一,像Meselson和Stahl这样的先驱在1958年建立了全功能程序,而其他人则随着时间的推移贡献了他们的方法。从细胞中提取DNA的过程涉及三个主要步骤:细胞裂解,沉淀和溶解DNA。所使用的化学或组合的类型可能会根据目标和细胞类型而有所不同。对于柔软的细胞壁,如在结核分枝杆菌中发现的,用简单的裂解缓冲液加热是有效的。然而,较硬的细胞壁需要机械,化学和酶促方法来提取DNA。基于化学的DNA提取方法是基于溶液的,涉及各种有机和无机溶液。这些包括SDS,CTAB,苯酚,氯仿和硫氰酸鸟酯。所有程序的主要步骤是细胞裂解,降水和洗脱。基于溶液的(化学)DNA提取进一步分为基于有机溶剂的和基于无机溶剂的方法。有机溶剂(如苯酚和氯仿)以前已被使用,但由于危险而灰心。相反,采用了更安全的替代方案,例如Triton X100和EDTA。不同的化学物质有特定目的;蛋白酶K等酶分解蛋白质直接靶向氨基酸连接。DNA提取过程的有效性可能受细胞类型的影响以及某些化合物或化学物质组合的使用。在冷链中,尽管有一些缺点,但基于蛋白酶K的DNA分离方法还是有效的方法。此过程的一个问题是酶的稳定性降低,随着时间的流逝而降低。使用无机溶液(例如氯化钠和乙酸钾)与蛋白酶K结合使用的盐溶液。但是,提取的DNA的纯度可能是一个问题,因为尽管获得了足够的质量,但收益率可能不会令人满意。苯酚 - 氯仿 - 异氧化酒精法(PCI)是提取DNA的另一种流行技术。它使用液化缓冲液,苯酚和氯仿对蛋白质和破坏细胞,从而产生出色的产率和纯度。可以通过使用现成的DNA提取缓冲区来修改此方法,从而快速而简单。高质量的DNA产量和简单操作系统对于准确的DNA分析至关重要。相反,基于二氧化硅的DNA提取方法提供了一种独特的方法,依赖于二氧化硅和DNA相互作用的独特化学。带正电荷的二氧化硅颗粒在离心过程中与带负电荷的DNA结合,从而允许高质量的DNA产量和易于操作。由于其简单性和有效性,该市售技术已在诊断实验室中被广泛接受。为了验证提取的DNA,可以使用溴化乙锭或其他与DNA在UV光下反应的荧光染料在琼脂糖凝胶上电泳。通过计算260 nm和280 nm波长的吸光度来测量DNA的纯度。确定DNA纯度的最常见方法是A260/A280比率,对于优质DNA,应在1.7-2.0之间。较低的比率表明存在更多的污染物。荧光测量是确定DNA产量和浓度的另一种流行方法,它由于其广泛的可用性和比吸光度方法更高的灵敏度。也可以使用二苯胺(DPA)指示器确认DNA的存在,该指标涉及DNA化学水解。与分光光度计在600 nm处的吸光度强度也可以通过将DNA浓度与已知DNA浓度的标准曲线进行比较来确定DNA浓度。已开发和应用多种用于DNA提取的方法,包括用于传染病的护理核酸测试和人类DNA提取方法。方法的选择取决于DNA的特定应用和所需的质量。