1拉贾斯坦邦中央大学NH-8微生物学系,班达·辛德里(Bandar Sindri),Dist-ajmer 305817,印度拉贾斯坦邦(Rajasthan); raimanu1998@gmail.com(M.R.); inshad@curaj.ac.in(I.A.K。)2 AMRIT校园化学系科学技术研究所,Tribhuvan University,Lainchaur,加德满都44600,尼泊尔; namunapaudel7@gmail.com 3印度印度大学印度理工学院生物医学工程学院,兰卡 - 瓦拉纳西221005,印度北方邦; sesesak@yahoo.com 4 Ferrara大学转化医学系,意大利Ferrara 44121; cet@unife.it(D.G. ); veronica.tisato@unife.it(v.t。) 5中心止血和血栓形成,费拉拉大学,44121 Ferrara,意大利6 Opentrons Labworks Inc.,布鲁克林,美国纽约,11201,美国; Anurag.kanase@opentrons.com 7 Max Planck固态研究所,德国斯图加特70569; a.schulz@fkf.mpg.de 8德国联邦风险评估研究所(BFR),化学与产品安全部,Max-Dohrn-Straße8-10,10589柏林,德国 *通信:ajay-vikram.singh@bfr.bfr.bfr.bund.bund.de†这些作者对这些工作贡献了这些作品。2 AMRIT校园化学系科学技术研究所,Tribhuvan University,Lainchaur,加德满都44600,尼泊尔; namunapaudel7@gmail.com 3印度印度大学印度理工学院生物医学工程学院,兰卡 - 瓦拉纳西221005,印度北方邦; sesesak@yahoo.com 4 Ferrara大学转化医学系,意大利Ferrara 44121; cet@unife.it(D.G.); veronica.tisato@unife.it(v.t。)5中心止血和血栓形成,费拉拉大学,44121 Ferrara,意大利6 Opentrons Labworks Inc.,布鲁克林,美国纽约,11201,美国; Anurag.kanase@opentrons.com 7 Max Planck固态研究所,德国斯图加特70569; a.schulz@fkf.mpg.de 8德国联邦风险评估研究所(BFR),化学与产品安全部,Max-Dohrn-Straße8-10,10589柏林,德国 *通信:ajay-vikram.singh@bfr.bfr.bfr.bund.bund.de†这些作者对这些工作贡献了这些作品。
组合片段的序列和所得的吸光度光谱用于开发计算模型,以预测片段的进一步组合,从而导致其他新型颜色。用适配器(TwistBioscience®,South San Francisco,CA)重新排序基因片段,以进行扩增,并使用Q5®热启动High Fidelity 2X Master Mix(NEB#M0494)在50 µL反应中放大了PCR,并使用Spri®Beads清洁,并在100 µL水中洗净。使用Opentrons OT-2,将包含目的地矢量的主混合物和15 µL Nebridge Golden Gate组件套件(BSAI-HFV2)的组件组件组装在4°C温度模块上,然后通过涡旋将其混合在甲板上。然后,液体处理程序在没有温度控制的情况下将主混合物分布在96孔板上。使用OT-2,在3小时以上(总计576个零件)的过程中,将每个组件的6个零件移动。然后将板密封,并进行37°C的30个循环1分钟16°C 1分钟,然后在60°C的最终持有5分钟。2 µL转化为20 µL T7 Express Compation E.Coli。5 µL的稀释或浓缩转化铺在LB KAN上,并在37°C下生长过夜。菌落生长后,将它们从孵化器中取出,并允许在台式上开发颜色过夜,然后在4°C的冰箱中发育。
组合片段的序列和所得的吸光度光谱用于开发计算模型,以预测片段的进一步组合,从而导致其他新型颜色。用适配器(TwistBioscience®,South San Francisco,CA)重新排序基因片段,以进行扩增,并使用Q5®热启动High Fidelity 2X Master Mix(NEB#M0494)在50 µL反应中放大了PCR,并使用Spri®Beads清洁,并在100 µL水中洗净。使用Opentrons OT-2,将包含目的地矢量的主混合物和15 µL Nebridge Golden Gate组件套件(BSAI-HFV2)的组件组件组装在4°C温度模块上,然后通过涡旋将其混合在甲板上。然后,液体处理程序在没有温度控制的情况下将主混合物分布在96孔板上。使用OT-2,在3小时以上(总计576个零件)的过程中,将每个组件的6个零件移动。然后将板密封,并进行37°C的30个循环1分钟16°C 1分钟,然后在60°C的最终持有5分钟。2 µL转化为20 µL T7 Express Compation E.Coli。5 µL的稀释或浓缩转化铺在LB KAN上,并在37°C下生长过夜。菌落生长后,将它们从孵化器中取出,并允许在台式上开发颜色过夜,然后在4°C的冰箱中发育。
组合片段的序列和所得的吸光度光谱用于开发计算模型,以预测片段的进一步组合,从而导致其他新型颜色。用适配器(TwistBioscience®,South San Francisco,CA)重新排序基因片段,以进行扩增,并使用Q5®热启动High Fidelity 2X Master Mix(NEB#M0494)在50 µL反应中放大了PCR,并使用Spri®Beads清洁,并在100 µL水中洗净。使用Opentrons OT-2,将包含目的地矢量的主混合物和15 µL Nebridge Golden Gate组件套件(BSAI-HFV2)的组件组件组装在4°C温度模块上,然后通过涡旋将其混合在甲板上。然后,液体处理程序在没有温度控制的情况下将主混合物分布在96孔板上。使用OT-2,在3小时以上(总计576个零件)的过程中,将每个组件的6个零件移动。然后将板密封,并进行37°C的30个循环1分钟16°C 1分钟,然后在60°C的最终持有5分钟。2 µL转化为20 µL T7 Express Compation E.Coli。5 µL的稀释或浓缩转化铺在LB KAN上,并在37°C下生长过夜。菌落生长后,将它们从孵化器中取出,并允许在台式上开发颜色过夜,然后在4°C的冰箱中发育。