1。Arun Sethi,(2003年)。 有机化学实验实验。 新德里:新时代出版商。 2。 Bansal,R。K,(2008)。 有机化学实验室手册(IV版)。 新德里:新时代出版商。 1。 Furniss,B.S.,Hannaford,A.J.,Smith,P.W。G.和Tatchell,A.R。,(2004年)。 Vogel的实用有机化学教科书(V Edition)。 新加坡:皮尔逊教育有限公司Arun Sethi,(2003年)。有机化学实验实验。新德里:新时代出版商。2。Bansal,R。K,(2008)。有机化学实验室手册(IV版)。新德里:新时代出版商。1。Furniss,B.S.,Hannaford,A.J.,Smith,P.W。G.和Tatchell,A.R。,(2004年)。 Vogel的实用有机化学教科书(V Edition)。 新加坡:皮尔逊教育有限公司Furniss,B.S.,Hannaford,A.J.,Smith,P.W。G.和Tatchell,A.R。,(2004年)。Vogel的实用有机化学教科书(V Edition)。新加坡:皮尔逊教育有限公司
每次温度测量转换的数字输出都存储在只读温度寄存器中。TMP112-Q1 器件的温度寄存器配置为 12 位只读寄存器(在配置寄存器中将 EM 位设置为 0;请参阅扩展模式 (EM) 部分),或配置为 13 位只读寄存器(在配置寄存器中将 EM 位设置为 1),用于存储最新转换的输出。必须读取两个字节才能获得数据,如表 8-8 所示。字节 1 是最高有效字节 (MSB),后跟字节 2,即最低有效字节 (LSB)。前 12 位(扩展模式下为 13 位)用于指示温度。如果不需要该信息,则不必读取最低有效字节。温度的数据格式如表 8-2 和表 8-3 所示。一个 LSB 等于 0.0625°C。负数以二进制补码格式表示。上电或复位后,温度寄存器读数为 0°C,直到第一次转换完成。字节 2 的位 D0 表示正常模式(EM 位等于 0)或扩展模式(EM 位等于 1),可用于区分两种温度寄存器数据格式。温度寄存器中未使用的位始终读取 0。
摘要 成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 相关蛋白 9 (Cas9) 是一种精确的基因组操作工具,可在各种细胞和生物体中产生靶向基因突变。尽管 CRISPR/Cas9 可以有效地产生基因敲除,但同源定向修复介导的基因敲入 (KI) 效率仍然很低,尤其是对于大片段整合。在本研究中,我们建立了一种有效的方法,用于 CRISPR/Cas9 介导的大型转基因盒整合,该盒携带唾液腺表达的多种消化酶 (20 kbp) 在猪胎儿成纤维细胞 (PFF) 的 CEP112 基因座中。我们的结果表明,使用具有短臂和长臂的最佳同源供体在 CEP112 基因座中产生了最好的 CRISPR/Cas9 介导的 KI 效率,并且 CEP112 基因座的靶向效率高于 ROSA26 基因座。CEP112 KI 细胞系被用作核供体,进行体细胞核移植以创建转基因猪。我们发现 KI 猪 (705) 在唾液腺中成功表达三种微生物酶 (b-葡聚糖酶、木聚糖酶和植酸酶)。这一发现表明 CEP112 基因座通过组织特异性启动子支持外源基因表达。总之,我们利用我们的最佳同源臂系统成功地在猪体内靶向 CEP112 基因座,并建立了一种改良的猪唾液中表达外来消化酶的模型。
