描述:PRMT1 化学发光检测试剂盒旨在测量 PRMT1 活性,用于筛选和分析应用。PRMT1 化学发光检测试剂盒采用方便的形式,8 孔试纸条预涂有组蛋白 H4 肽底物、针对组蛋白 H4 甲基化精氨酸残基的抗体、HRP 标记的二抗、S-腺苷甲硫氨酸、甲基转移酶检测缓冲液和纯化的 PRMT1 酶,可进行 96 种酶反应。PRMT1 化学发光检测试剂盒的关键是一种高度特异性的抗体,可识别组蛋白 H4 甲基化的 R3 残基。使用此试剂盒,只需三个简单的步骤即可检测甲基转移酶。首先,将 S-腺苷甲硫氨酸与含有检测缓冲液和甲基转移酶的样品一起孵育。接下来,添加一抗。最后,用 HRP 标记的二抗处理试纸条,然后添加 ELISA ECL 底物以产生化学发光,然后可以使用化学发光读数仪进行测量。组件:
背景:蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMT)家族成员在癌症过程中具有重要作用。然而,它在调节肝细胞癌(HCC)的癌症免疫疗法中的功能尚不完全了解。这项研究旨在研究PRMT1在HCC中的作用。方法:获得单细胞RNA测序(SCRNA-SEQ)和临床病理数据,并用于探索HCC中PRMT1的免疫微环境调节中的诊断和预后价值,细胞功能以及在HCC中的PRMT1调节中的作用。使用基因和基因组(KEGG)和基因本体论(GO)以及基因集富集分析(GSEA)(GSEA)的基因和基因组(KEGG)和基因组学百科全书(GSEA)探索了PRMT1的功能。计时器和Cibersort用于分析PRMT1表达与免疫细胞浸润之间的关系。字符串数据库用于构建蛋白质 - 蛋白质相互作用(PPI)网络。结果:PRMT1在HCC中异常表达,高表达与HCC患者的肿瘤进展相关,总生存期(OS)和无病生存期(DFS)。PRMT1也与免疫细胞浸润有关。此外,它是在免疫细胞中特异性表达的,包括耗尽的CD8 T细胞,B细胞和单宏/宏观细胞。在HCC患者的高PRMT1表达组中,免疫检查点的表达显着增加。在PRMT1敲低HCC细胞中被抑制。此外,与PRMT1共表达的基因参与了脂肪酸代谢过程,并富含脂肪和药物诱导的肝病。结论:综上所述,这些结果表明PRMT1可能通过HCC中的免疫微环境调节和脂肪酸代谢发挥其致癌作用。我们的发现将为进一步的研究提供基础,并表明对肝癌的潜在临床治疗靶点。关键词:蛋白精氨酸甲基转移酶,PRMT1,预后,肿瘤浸润,脂肪酸代谢
摘要 背景 尽管免疫疗法已获批用于治疗多种癌症,但大多数患者对免疫疗法无反应或在初次应答后复发。这些失败可能归因于肿瘤细胞所利用的免疫抑制机制。然而,使用常规方法系统地评估肿瘤内在因子作为癌症患者免疫调节剂的潜力具有挑战性。 方法 为了以公正的方式识别对癌症免疫疗法无反应者的免疫抑制机制,我们进行了全基因组 CRISPR 免疫筛选,并将我们的结果与多组学临床数据相结合,以评估肿瘤内在因子在调节癌症免疫疗法的两个限速步骤中的作用,即 T 细胞肿瘤浸润和 T 细胞介导的肿瘤杀伤。 结果 我们的研究揭示了两种不同类型的免疫抗性调节剂,并证明了它们作为治疗靶点以提高免疫疗法疗效的潜力。其中,PRMT1 和 RIPK1 分别被确定为双重免疫抗性调节剂和细胞毒性抗性调节剂。尽管不同类型的免疫疗法的强度各不相同,但基因靶向 PRMT1 和 RIPK1 可使肿瘤对 T 细胞杀伤和抗 PD-1/OX40 治疗敏感。有趣的是,尽管对 T 细胞肿瘤浸润的影响有限,但 RIPK1 特异性抑制剂增强了基于 T 细胞和抗 OX40 疗法的抗肿瘤活性。结论总的来说,这些数据为合理的免疫肿瘤学组合提供了丰富的新靶点资源。
DNA 损伤激活信号通路对于协调多个细胞过程至关重要,必须严格调控这些过程才能维持基因组稳定性。为了提供全面、公正的 DDR 信号通路观点,我们在人类细胞系中进行了 30 次基于荧光激活细胞分选的全基因组 CRISPR 筛选,使用识别不同内源性 DNA 损伤信号蛋白的抗体来识别参与 DNA 损伤反应 (DDR) 的关键调节剂。我们发现蛋白酶体介导的加工是细胞触发喜树碱和依托泊苷诱导的 DDR 信号的早期和先决条件事件。此外,我们还确定 PRMT1 和 PRMT5 是调节 ATM 蛋白水平的调节剂。此外,我们发现 GNB1L 是 DDR 信号的关键调节剂,因为它作为辅助伴侣分子,专门调节 PIKK 蛋白。总的来说,这些筛查为进一步研究 DDR 提供了丰富的资源,可能有助于深入了解针对这些 DDR 通路以改善治疗结果的策略。
1神经病学系,山东第一医科大学和山东省Qianfoshan医院,山东神经免疫学研究所,中国人民共和国Jinan; 2中华人民共和国山东大学医学院基础医学科学学院医学遗传学系; 3山东第一医科大学和山东医学科学院,吉南,中华民国; 4中华人民共和国的山东大学,山东大学切鲁医学院Qilu医院老年医学系; 5中华人民共和国的山东大学切鲁医学院医学院5; 6中国人民共和国北京北京友谊医院神经病学系
