Thermo Scientific™Phusion™高保真DNA聚合酶启用了高性能PCR。自推出以来,Thermo Scientific™Phusion™产品已不断改进,以应对更多的应用和挑战。最新的添加(Thermo Scientific™Phusion™加上DNA聚合酶)适用于许多应用,因为它的高忠诚度,鲁棒性,抑制剂耐受性和通用引物退火。
少于 20 个核苷酸,应使用与下引物 T 相等的退火温度。也可以使用温度梯度来优化每个引物对的退火温度。对于两步循环,梯度
批次 数量 描述 2727858 2 x 1.25 mL Phusion™ Plus PCR Master Mix 2740002 1.25 mL Phusion™ GC 增强剂 2720703 2 x 1.25 mL 水,无核酸酶
Lot Quantity Description 3070014 0.2 kU Phusion DNA Polymerase 3130783 0.4 mL 10 mM dNTP MixPhusion kit component 3048246 0.04 mL Lambda-DNA 3085897 0.4 mL Lambda & PhiX MixReady to Use Marker 3016845 0.05 mL Primer Mix 1.3 kb 3083834 0.05 mL Primer Mix 10 kb 3121943 3×1.5 ml 5x phusion hf缓冲液3121933 1.5 ml 50 mm MGCl2 3087331 1.5 ml 5x 5x phusion GC缓冲液3085597 0.5 ml DMSO
图3。增加MGCL₂浓度对目标下90%的扩增的影响。富裕的s。金黄色葡萄球菌gDNA靶序列使用Phusion Plus Plus DNA聚合酶在Proflex PCR系统上进行扩增。每个20 µL反应含有10 ng的s。金黄色葡萄球菌和另外1 mm,1.5 mm,2 mm或2.5 mmmgcl₂。热循环条件:98°C的30秒;在98°C,最佳退火温度下10秒的10秒循环(表4),在64°C时为1分钟/kb;在64°C下5分钟。PCR产品以2%E-Gel 48含Sybr安全染色的琼脂糖凝胶运行。车道M:E-GEL 1 KB Plus Express DNA梯子。
摘要在这项工作中,将牛津纳米孔测序作为量化放大DNA异质性的可访问方法。此方法可以快速量化缺失,插入和取代,每个突变误差的概率及其在复制序列中的位置。放大技术测试的是传统的聚合酶链反应(PCR),具有不同水平的聚合酶保真度(OnETAQ,phusion和Q5),以及滚动圆扩增(RCA)和PHI29聚合酶。还评估了使用细菌扩增的质粒扩增。通过分析每个样本中大量序列中误差的分布,我们检查了每个样本中的异质性和误差模式。该分析表明,Q5和渗流聚合酶表现出在扩增的DNA中观察到的最低错误率。作为二级验证,我们分析了使用细胞游离表达与放大DNA合成的SFGFP荧光蛋白的发射光谱。易易受错误的聚合酶链反应证实了报道蛋白发射光谱峰宽度与DNA误差率的依赖性。所提出的纳米孔测序方法是量化其他基因扩增技术准确性的路线图,从而使它们被发现,从而实现了所需蛋白质的更无均匀的细胞表达。
液氮 n/an/a 关键商业检测 NEBuilder® HiFi DNA 组装预混液 New England Biolabs E2621S BsaIHF®v2 (20 U/µL) New England Biolabs R3733S Phusion TM 高保真 DNA 聚合酶 Thermo Fisher Scientific F530S MluI (10 U/µL) Thermo Fisher Scientific ER0561 ApaI (10 U/µL) Thermo Fisher Scientific ER1411 XhoI (10 U/µL) Thermo Fisher Scientific ER0691 EcoRI (10 U/µL) Thermo Fisher Scientific ER0271 RevertAid TM 逆转录酶 Thermo Fisher Scientific EP0441 RiboLock RNase 抑制剂 (40 U/μL) Thermo Fisher Scientific EO0381 NucleoSpin® 质粒试剂盒 Macherey-Nagel 740588.250 Zymoclean 凝胶 DNA 回收试剂盒 Zymo Research D4001 Zymo-Spin I Zymo Research C1003-250 嗜热菌 (Tth) DNA 聚合酶 Biotools 10.003 寡核苷酸 D1789 GGGAATCAATCACAGTGTTGGC
β-Mercaptoethanol PanReac-AppliChem A4338,0100 Sodium chloride (NaCl) PanReac-AppliChem 131659.1211 Tryptone Condalab 1612 Yeast Extract Condalab 1702 Bacteriological Agar Condalab 1800 Agarose D1 Medium EEO Condalab 8019 Liquid nitrogen n/a n/a Critical commercial assays NEBuilder® HiFi DNA Assembly Master Mix New England Biolabs E2621S Phusion TM High-fidelity DNA polymerase Thermo Fisher Scientific F530S MluI (10 U/µL) Thermo Fisher Scientific ER0561 BsaIHF®v2 (20 U/µL) New England Biolabs R3733S DNA Clean & Concentrator TM -5 Zymo研究D4004Nucleospin®质粒DNA纯化机构 - 纳格尔740588.250 Ribolock RNase抑制剂(40 u/μl)Thermo Fisher Scientific EO0381恢复TM逆转录(TM)逆转录酶Thero Fisher Fisher Fisher Scientific EP0441 Therus prolainsir prolapers themophirs dna Polymsisriast dna Polymsiss dna Prolymasse:003 3.003.003 3.003 3.003 3.003 3.003 3.003 3.003; 003 3.003 3.003 Nicotiana Benthamiana cas9(Bernabé-ortts等,2019)N/A寡核苷酸D2409 atttatattattAttCataCaatCaaAcc
价格 B0202S—T4 DNA 连接酶反应缓冲液 29.00 美元 27.84 美元 M0319L—耐热 5' App DNA/RNA 连接酶 336.00 美元 322.56 美元 E2610L—5' DNA 腺苷酸化试剂盒 50 次反应 563.00 美元 540.48 美元 M0486L—模板转换 RT 酶混合物 236.00 美元 226.56 美元 E5520S—NEBuilder HiFi DNA 组装克隆试剂盒 212.00 美元 203.52 美元 M0271L—快速加载 Taq 2X 预混液 277.00 美元 265.92 美元 R0176S--DpnI 77.00 美元 73.92 美元 N4040S—M13mp18 单链 DNA 50.00 美元$48.00 M2401S—ET SSB $190.00 $182.40 C3019H—10-beta 感受态大肠杆菌 (H. Eff) $269.00 $258.24 R0507S--ApaLI $77.00 $73.92 E2610S--5' DNA 腺苷酸化试剂盒 10 次反应 $140.00 $134.40 M0251S—T7 RNA 聚合酶 $75.00 $72.00 R0630S--AsiSI $80.00 $76.80 M0492L—Q5 高保真 2X 预混液 $868.00 $833.28 R3133M—SpeI-HF $331.00 $317.76 C3040H—NEB 稳定感受态大肠杆菌 381.00 美元 365.76 美元 M0530S—Phusion 高保真 DNA 聚合酶 131.00 美元 125.76 美元 E5360S—NEBExpress 无细胞大肠杆菌蛋白质合成系统 244.00 美元 234.24 美元 E2621S—NEBuilder HiFi DNA 组装主混合物 180.00 美元 172.80 美元 您可以随时通过 stockroom@utexas.edu 联系我们,查看任何特定商品的价格。