1。简介4 1.1。协议正时4 1.2。PipSeq平台概述5 1.2.1。pipseq v t10 3ʹ捕获和条形码套件5 1.2.2。PIPSEQ V通用入门设备套件6 1.2.3。pipseq v t10 3ʹ捕获和条形码消耗品套件6 1.2.4。PIPSEQ V T10 3 capture&Barcoding环境套件7 1.2.5。pipseq v t10 3ʹ捕获和条形码-20℃套件7 1.2.6。PIPSEQ V T10 3 capture&Barcoding -80℃套件7 1.2.7。PIPSEQ V库准备套件8 1.2.8。PIPSEQ V库准备环境套件8 1.2.9。pipseq v库准备-20℃套件8 1.3。第三方试剂,设备和消耗量要求8 1.3.1所需的第三方试剂8 1.3.2所需的第三方消耗量9 1.3.3。所需的第三方设备10 1.3.4。PIPSEQ兼容替代RNase抑制剂10 1.4协议注释指南11 2。最佳实践11 2.1。使用RNA 11 2.2。使用PCR产品12 2.3。离心步骤12 2.4。热环状盖压力13 2.5。单元格载13 3.Pipseq设备准备13 3.1。PipSeq Vortexer操作13 3.2。Pipseq干浴操作14 3.2.1。Pipseq Dry Bath 14 3.2.2。Pipseq干浴盖设置和控制14 3.2.3。Pipseq Dry Bath Control 15 3.2.4。pipseq干浴协议16 4。样品制备17 4.1。细胞制备17 4.1.1与固定细胞一起工作19 4.2。核制剂20 4.2.1。核分离20 4.2.2。使用固定核21 4.2.3。核悬浮缓冲液制备21 5。PIPSEQ V T10协议22 5.1。捕获和裂解22
还建议在用户指南中查看“ PipSeq Dry Bath操作”指令,以了解如何在不同的干浴协议之间进行更改以及如何为每个程序手动设置盖子模式(请参阅用户指南第3.2.3节)。选择程序时不会自动设置盖模式。您必须选择正确的程序,然后选择“编辑”,然后使用编辑屏幕底部的“ Lidmode”按钮,以切换到正确的盖子模式设置。“ +5.0”设置用于细胞裂解(程序A),“ 105”设置用于核裂解(程序B)和cDNA合成(程序C)。选择“保存/返回”以返回操作屏幕。另外,请确保将正确的管块安装在干浴中以用于使用的套件(T2/T10的0.5 ml管块,T20的1.5 ml管块,T100的5 ml管块)。