RAA 志愿者 我想感谢 RAA 成员,他们让办公室运转起来,并努力将这本杂志送到您的邮箱。Rob Schieck 和 Clare Snyder 多年来一直在幕后工作,让 RAA 计算机保持运转,现在我们有了一个新的会员计划,可以省去以前必须进行的大量重复手动输入。George Gregory 十年来一直负责《休闲传单》的布局和插图,并追踪、编辑和撰写了数千篇文章。在过去的一年里,他还制作和管理了新的 www.raa.ca 网站。Ron Seyffer 在安大略省巴里市的 Rose Printing 公司印刷每一期《休闲传单》,并给我们非常优惠的价格。巴里-奥里利亚 RAA 成员 Dave Evans、Ron Seyffer、David James、Ed Martin、Eugene 和 Gloria Bemus、Jim Mantyla、Jim 和 Eileen O'Loan 以及 Lawrence Shaw 共同负责杂志的邮寄。感谢你们多年来所做的工作。如果没有这些 RAA 成员的志愿工作,就不会有 RAA 加拿大。
在病原体检测的领域中,等温扩增技术已成为常规PCR的迅速,精确和敏感的替代品。本文探讨了重组酶聚合酶扩增(RPA)和重组酶-AID扩增(RAA)的基本原理,并回顾了将CRISPR-CAS系统与RPA/RAA技术集成的当前状态。此外,本文探讨了等温扩增和CRISPR-CAS技术的融合,从而对现有的合并方法(例如Sherlock and Dentectr)进行了全面的综述和增强。我们研究了RPA/RAA与CRISPR-CAS在病原体检测中的实际应用,并强调了这种综合方法在该领域的研究和临床实施如何显着进步。本文旨在为读者提供对RPA/RAA和CRISPR-CAS技术融合的简洁理解,从而为他们的临床效用,持续的增强和这种综合方法在病原体检测中的有希望的前景提供了见解。
皇家审计局(RAA)审查了PTDP提供的答复并在报告中纳入了。在六个[6]审核调查结果中,有五个[5]的答复,并提供了支持的文件和证据,这些文件和证据是根据第二部分(管理评估报告)报告的,以供将来参考和合规性。要求PTDP/PIU审查所指出的缺陷和失误,并设立适当的检查和平衡,以遏制以后的失误。RAA会在报告之日起一个月内收到一份诉讼报告(ATR)。PTDP/PIU应采取共同的努力来解决对RAA的暗示。RAA承认PTDP/PIU官员向审计团队扩展了友好的合作和援助,该官员促进了及时完成审计。真诚的,
公共帐户委员会(PAC)与Dzongkhag管理局和Pema Gatshel和Trashigang的Gewogs进行了协商会议,并在Trashigang Dzongkhag Tshogdu Hall进行了审查,以审查Dzongkhag Admin-Istration and Gewogs of Trashigs of Trashigs of Trashigs of Trashigs和Pema Aspema和Pema inthece inthers the the the the the the a后的尚未解决的更新。委员会在关于未解决的财务违规行为的问题进行了广泛讨论之后,可能有助于解决一些问题,而有些则尚未解决。PAC指示Dzongkhag政府和GEWOGS解决剩余的未解决的违规行为,并在2021年8月31日之前向皇家审计局(RAA)提交报告,该报告应在2021年9月30日之前通过RAA提交PAC。
2 本文使用的未另行定义的大写术语具有 PJM 开放接入输电关税(“OATT”)、PJM 运营协议(“OA”)或 PJM 可靠性保证协议(“RAA”)中的含义。
图1通过整合侧向流条(RAA -LF)系统,重组酶 - AID放大测定法的特异性和灵敏度。(a)横向流条的说明。FITC-生物素标记的RAA扩增子首先与胶体金标记的抗FITC抗体结合。随着偶联的飞行,该建筑群被测试线上的链霉亲和蛋白捕获。其余的复合物继续向前扩散,并被控制线的抗FITC抗体抗体捕获。在测试和控制线上的视觉带表示正读数,而控制线处的单个频段仅表示负读数。(b,c)用底漆和探针集对MPXV和VACV DNA的RAA -LF检测,靶向D6R,E9L,N3R和N4R基因。控件不包括模板控件(模拟)。(d)使用MPXV DNA作为具有横向流量读数的模板的D6R,E9L,N3R和N4R引物的检测极限。MPXV DNA浓度作为基因组拷贝/μL表示。控件不包括模板对照(模拟)。(E)在手掌温度下放大N4R引物和探针设置的横向流量结果。在指定的时间消除了10μL反应产物的体积并用横向读数进行测试。所有实验重复了三次,显示了一个代表性结果。
带来了下来的一天,缝制导致秘密地方的层,它们是。 div>一所哀悼的学校,可爱的爱。 div>祝贺Pootata的房子和游戏的首领。 div>Waiaheia也应该招聘,对他和他的房子太多。 div>从Waikato视频从Tainui独木舟河口的Waikato视频到风。 div> 我会仰望它。 div> 一只鸟在头部头顶奔跑。 div> 它将飞向旋转,海洋听起来哭泣。 div> 转向加入Hotororoa代理作为超自然代理。 div> 这只鸟将被带到Matoooh的鼻子,Mangitakake。 div> 有点时间! div> Haperoa岛Hape Puketakaha被岸上Hape。 div> 将继续担任Poutoukeka的神圣职位,称为“ Tuaoho的足迹”。 div> 那是时候了! div> 对我们来说是一种指导我们面前工作的区域活动。 div> 希望将保留该地区及其人民的所有安排。 div> 发表声明“ Tupamaki的最佳和丰富性”。 div>从Waikato视频从Tainui独木舟河口的Waikato视频到风。 div>我会仰望它。 div>一只鸟在头部头顶奔跑。 div>它将飞向旋转,海洋听起来哭泣。 div>转向加入Hotororoa代理作为超自然代理。 div>这只鸟将被带到Matoooh的鼻子,Mangitakake。 div>有点时间! div>Haperoa岛Hape Puketakaha被岸上Hape。 div>将继续担任Poutoukeka的神圣职位,称为“ Tuaoho的足迹”。 div>那是时候了! div>对我们来说是一种指导我们面前工作的区域活动。 div>希望将保留该地区及其人民的所有安排。 div>发表声明“ Tupamaki的最佳和丰富性”。 div>
恒温扩增核酸检测技术因其耗时短、对扩增 设备要求低和引物探针商品化合成稳定等优势 , 在 病原快速检测技术中脱颖而出。 Piepenburg 等 [ 13 ] 参 照 T4 噬菌体 DNA 复制系统于 2006 年创建了一种新 型等温扩增技术 , 使用酶来打开双链 DNA, 该技术 称为重组酶聚合酶扩增 (Recombinase polymerase am- plification, RPA) 。随后发明的重组酶介导链置换 核酸扩增技术 (Recombinase-aid amplification, RAA) 技术原理与 RPA 类似 , 不同之处在于 RAA 的重组酶 来源于细菌或真菌 , 而 RPA 的重组酶来自 T4 噬菌 体。 2017 年 [ 14 ] 结合以上重组酶 , SHERLOCK (Specifi- chigh-sensitivity enzymatic reporter unlocking) 检测 方案问世 , 并应用于新冠病毒的检测技术开发 [ 15 ] , 该技术通过改造规律间隔成簇短回文重复序列及 其关联蛋白 (Clustered regularly interspaced short pa- lindromic repeats/CRISPR-associated proteins system, CRISPR/Cas) 系统 , 使其能够识别特定的严重急性 呼吸综合征冠状病毒 2 (Severe acute respiratory syn- drome coronavirus 2, SARS-Cov-2) 基因组片段 , 1h 就能确定检测结果 , 检测限可低至 2 amol/L 。 SHER- LOCK 技术特异和简便 , 将 SHERLOCK 与 RAA 整合 集成 , 能够凸显两者的优势 , 不仅可以实现靶标核 酸的快速扩增 ( 保留等温扩增技术的优势 ), 还增强 了检测特异性。