a antiviral strategies unit, Institut Pasteur, 75724, Paris, France B Institut Pasteur d'Algérie, Dely Ibrahim, Algiers, Algeria C Technological Platform Biomics-Center for Resources and Technological Research (C2RT), Institut Pasteur, 75724, Paris, France d unit viral neuroimmunology, Institut Pasteur, 75724生物信息学和生物统计枢纽,研究所,USR 3756 CNR,75724,巴黎,法国,法国分子蛋白工程(Simopro)服务(Simopro),CEA,巴黎 - 萨克莱大学,91191,91191,GIF-SUR-SUR-YVETTE,FIF-SUR-YVETTE,FARANCE GIO-YVETTE,FARANCE GIOORGANIC-SAC-SAC-SAC-SAC-SACLAIN-SACLANIC CEA,SCBM(SCBM),SCBM,SCBM,SCEBM),SCBM,CCEA,SCEBM) 91191, GIF-SUR-YVETTE, France H Institut Pasteur de Guinea, BP 4416, Conakry, Guinea corresponding AUTHORS: Christmas Tordo, Unit Antiviral Strategies, Institut Pasteur, 25 rue du Dr. Roux, 75724 Paris Cedex 15 France, Keywords: Rabies Virus, Endosomal途径抑制剂,药物协同作用,晚期内体,糖蛋白狂犬病。
摘要:我们对 2018-2019 年提交给康涅狄格州兽医诊断实验室 (CVMDL) 的蝙蝠中检测到的狂犬病毒 (RABV) 进行了全基因组测序和遗传表征。在提交给 CVMDL 的 88 只蝙蝠中,6 个脑样本(6.8%,95% 置信区间:1.6% 至 12.1%)经直接荧光抗体试验检测呈阳性。在棕蝠 (Eptesicus fuscus, n = 4)、灰毛蝠 (Lasiurus cinereus, n = 1) 和未知蝙蝠物种 (n = 1) 中检测到了 RABV。获得了六种检测到的 RABV 中的四种的完整编码序列。在系统发育分析中,大棕蝠的 RABV(18-62、18-4347 和 19-2274)属于蝙蝠 EF-E1 进化枝,与在宾夕法尼亚州和新泽西州从同种蝙蝠中检测到的 RABV 聚类。从迁徙灰毛蝠中检测到的蝙蝠 RABV(19-2898)属于蝙蝠 LC 进化枝,与在亚利桑那州、华盛顿州、爱达荷州和田纳西州从同种蝙蝠中检测到的 11 种病毒聚类。本研究中使用的方法产生了有关 RABV 变体遗传关系的新数据,包括它们的宿主和空间起源,这些数据将作为未来在北美研究 RABV 的参考数据。需要对蝙蝠 RABV 进行持续监测和基因组测序,以监测病毒的进化和传播,并评估可能与公共卫生相关的基因突变的出现。
在Chi等人发表的文章中,将MERS-COV S1亚基的序列注入了人CD4的跨膜结构域(TM)和RABV G蛋白的细胞质结构域(CD)。将单个转录单元插入RABV(SRV9菌株)cDNA克隆中,用于营救嵌合RABV,RSRV9-MERS S1,将融合片段S1 -TM-CD插入了RABV(SRV9菌株)cDNA克隆。透射电子显微镜表明,使用反向遗传学成功救出了活病毒。间接免疫荧光测定法证明了S1亚基被表达并转运到细胞表面。随后,收集了RSRV9 -MERS S1库存,被B-丙二醇酮灭活,然后在不连续的蔗糖梯度上通过超速离心纯化。进一步,Chi等。使用三种不同的动物进行体内测试:小鼠,骆驼和羊驼。小鼠的测试表明
最大进化枝可信度(MCC)树的124种RABV糖蛋白序列来自中国和东南亚(Wenjie Gong等人。病毒研究。2010)
大型 SARS-CoV-2 刺突 (S) 蛋白是当前 COVID-19 候选疫苗的主要靶标,但可诱导非中和抗体,这可能导致疫苗引起的并发症或 COVID-19 疾病的加重。此外,在具有复制能力的病毒载体疫苗中编码功能性 S 可能会导致出现具有改变或扩大的趋向性的病毒。在这里,我们开发了一个安全的单轮弹状病毒复制子疫苗平台,用于增强 S 受体结合域 (RBD) 的呈递。采用结构引导设计来构建嵌合微刺突,该微刺突包含与源自狂犬病毒 (RABV) 糖蛋白 (G) 的跨膜茎锚序列相连的球状 RBD。编码微刺突蛋白的水泡性口炎病毒 (VSV) 和 RABV 复制子不仅允许抗原在细胞表面表达,还可以将其整合到分泌的非感染性颗粒的包膜中,从而将经典的载体驱动抗原表达和颗粒状病毒样颗粒 (VLP) 呈递结合在一起。单剂量原型复制子疫苗 VSVΔG-minispike-eGFP (G) 刺激小鼠产生高滴度的 SARS-CoV-2 中和抗体,相当于 COVID-19 患者体内的抗体滴度。使用相同复制子进行加强免疫可进一步增强中和活性。这些结果表明,弹状病毒微刺突蛋白复制子是使用具有复制能力的病毒和/或整个 S 抗原的疫苗接种方法的有效且安全的替代方案。