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耦合CRISPR/Cas9和Lambda Red重组工程系统对鸡沙门氏菌进行基因组编辑及ssaU敲除突变体对细菌毒力的影响
摘要：发展中国家的养禽业仍然面临着鸡伤寒的巨大威胁，这种疾病由鸡沙门氏菌引起，在经济较发达国家已得到较好的控制。除了大型毒力质粒 (85 kb) 表现出的毒力外，鸡沙门氏菌致病岛 2 还通过其 III 型分泌系统 (TTSS) 在介导疾病方面发挥关键作用。TTSS 分泌效应蛋白穿过含有沙门氏菌的液泡，并通过调节囊泡通道介导细菌的内化。在本研究中，使用 CRISPR/Cas9 和 lambda 重组系统通过同源定向修复，成功从本土分离的鸡沙门氏菌基因组中删除编码 III 型分泌系统的候选毒性 ssaU 基因 (~1 kb)。基于 CRISPR/Cas9 的家禽鸡沙门氏菌基因组编辑此前尚未见报道，这可能与其遗传工具效率低下有关。这是首次展示从该细菌基因组中完全进行基于 CRISPR/Cas9 的基因删除的研究。更重要的是，采用家禽实验模型评估了该突变菌株 (∆ ssaU_ S G18) 的毒力潜力，与野生型菌株相比，该突变菌株无法在实验攻毒的鸟类中产生任何死亡率。在我们的攻毒模型中，没有观察到对体重增加的影响，而细菌无法在肠道和肝脏中定植。突变菌株体内毒力的丧失使该系统具有出色的功能，可用于开发针对这种耐药性和致病性细菌的活疫苗。
太空学说和航天工业的未来
空间活动。需要强调的是，长期的空间研究计划证明了我们尚未展现的成熟度和能力。制定这样的计划（更确切地说是理论）超出了正式文件的准备范围。我们概述的挑战是关于空间理论在定义空间部门可持续发展领域的概念文件体系中的作用。在研究中，对客观现实的认识中的辩证唯物主义方法使我们能够全面分析制定“空间理论”概念的理论规定。实证研究基于以下统计和分析材料：世界贸易组织 2019 年年度报告、俄罗斯航天局 2018 年国家航天活动公司、总统航空航天报告——2019 财年活动、乌克兰国家航天局 (SSAU) 1997-2020 年统计数据和报告。该研究得出了一些结论。未来太空理论的实施应该是从初始状态转向新的太空活动模式和航天工业的可持续发展。该研究揭示了太空理论的三个层次：基础、战略和战术（作战）。